發(fā)布時間：2020-12-08 01:11

　　本研究以中華鱉為研究對象,探討高脂日糧對中華鱉肌肉和肝臟中生物鐘核心基因、重要功能基因及microRNA表達的影響。其方法和結(jié)果如下:通過克隆、測序及生物信息學(xué)方法,獲得中華鱉Clock、Bmal2和Per2三個生物鐘核心基因的ORF區(qū)序列大小分別為2553 bp、1902 bp和3888 bp,共編碼氨基酸850個、633個和1295個。其中,Clock、Bmal2兩個蛋白均含有1個BHLH結(jié)構(gòu)域和2個PAS保守結(jié)構(gòu)域,而Per2只含有1個PAS結(jié)構(gòu)域。且中華鱉Clock、Bmal2和Per2三個生物鐘核心基因在進化上與其它爬行類動物和鳥類具有更親的親緣關(guān)系,而與魚類和哺乳類關(guān)系較遠一些。采用qRT-PCR技術(shù)和geNorm、NormFinder與BestKeeper三個軟件,對GAPDH、18S rRNA、RPL13、RPL19、RPS2和β-actin 6個內(nèi)參基因進行篩選。得出中華鱉肌肉和肝臟中最適內(nèi)參基因分別為RPL13和RPL19。選取180只中華鱉隨機分成兩個組即對照組和實驗組,分別投喂脂肪含量為7.98%和13.86%的飼料,定制光周期為12 h光照vs 12 h黑暗。... 

【文章來源】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)湖南省

【文章頁數(shù)】：118 頁

【學(xué)位級別】：博士

【部分圖文】：

生物鐘系統(tǒng)的構(gòu)成

圖 1-2 哺乳動物生物鐘核心基因反饋環(huán)路模式圖[4]Fig. 1-2 Ideograph on mammalian core circadian gene feedback loop[4]此外，在生物鐘分子調(diào)控機制中，還存在另一個核受體 Rev-erbα (NR1D1)基因Rorα 基因參與的輔助反饋環(huán)（圖 1-3）。一方面，其相應(yīng)蛋白進入細胞核內(nèi)抑制正調(diào)節(jié)端的 Bmal1 基因的轉(zhuǎn)錄，從而降低 Bmal1 基因的表達；另一方面，在負(fù)向調(diào)端的Cry基因可以抑制Rev-erbα基因的轉(zhuǎn)錄表達以增加節(jié)律振蕩的穩(wěn)定性和維持其物鐘功能[7]。

圖 1-2 哺乳動物生物鐘核心基因反饋環(huán)路模式圖[4]Fig. 1-2 Ideograph on mammalian core circadian gene feedback loop[4]外，在生物鐘分子調(diào)控機制中，還存在另一個核受體 Rev-erbα (NR1D1)基因基因參與的輔助反饋環(huán)（圖 1-3）。一方面，其相應(yīng)蛋白進入細胞核內(nèi)抑制正的 Bmal1 基因的轉(zhuǎn)錄，從而降低 Bmal1 基因的表達；另一方面，在負(fù)向調(diào)ry基因可以抑制Rev-erbα基因的轉(zhuǎn)錄表達以增加節(jié)律振蕩的穩(wěn)定性和維持其能[7]。


本文編號：2904191