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乙烯合成關鍵基因ZjACO及相關調控基因與狗頭棗果實成熟關系的研究

發(fā)布時間:2020-11-11 22:42
   棗經(jīng)濟價值高,栽培面積廣泛,是農(nóng)業(yè)經(jīng)濟的重要組成部分。棗果的品質直接影響其經(jīng)濟價值,而果實成熟度與棗果品質密切相關。乙烯被明確認為是調控果實成熟的主要因素。目前乙烯合成相關基因以及乙烯受體基因參與果實成熟調控的研究已取得重要進展,但對其參與果實成熟的分子調控機制尚不明確。本研究以陜西延川的“狗頭棗”果實為材料,分析其7個不同生長發(fā)育時期的果皮顏色的變化,輔助判斷棗果的成熟度;克隆出狗頭棗ZjACO1基因,同時在棗基因組數(shù)據(jù)庫中比對到2個同源基因ZjACO2和ZjACO3,對其啟動子序列進行分析,預測了潛在的相關基因,并對這些基因在狗頭棗果實發(fā)育7個不同時期的表達水平進行了檢測。主要實驗結果如下:1.棗果色差分析顯示,狗頭棗在生長發(fā)育成熟過程中,果皮顏色的變化規(guī)律主要呈現(xiàn)由青色(藍綠疊加色)變棗紅色(紅黃疊加色)的過程,說明狗頭棗果實的成熟外觀表征是由青色向棗紅色變化的。2.ZjACO1、ZjACO2和ZjACO3在棗果實7個不同發(fā)育期的基因表達量檢測顯示:ZjACO1-ZjACO3的相對表達量與果實成熟度呈顯著正相關,ZjACO1的相關性最高。為了驗證棗果實7個不同生長發(fā)育成熟過程中ZjACO1基因的功能,利用農(nóng)桿菌轉化法,建立遺傳轉化體系,誘導出狗頭棗轉基因愈傷組織。3.乙烯受體基因ZjERS1、ZjERS2、ZjETI、ZjETR1和ZjETR2在棗果實7個不同發(fā)育時期的基因表達量結果表明:ZjETR1在狗頭棗果實中未檢測到表達量,ZjETR2與棗果成熟呈正相關;ZjERS1、ZjERS2和ZjETI與果實成熟負相關,這表明ZjETR2是乙烯調節(jié)棗果成熟潛在的受體基因。4.本研究從棗基因組內(nèi)分別尋找到ZjACO1、ZjACO2和ZjACO3基因的2000 bp序列作為相應的啟動子區(qū)域,并對其順式作用元件預測分析,顯示含有乙烯應答元件ERE、水楊酸應答元件TCA-element、生長素應答元件TGA-element、干旱應答元件MBS、HD-Zip和W-box等元件。由于ERF是特異性響應乙烯信號的轉錄因子、HD-Zip和TCP家族基因是參與逆境脅迫相應的轉錄因子,因此ERF、HD-Zip和TCP三個家族基因可能作為潛在的調控ACO基因表達的轉錄因子。5.ERF、HD-Zip和TCP在棗果實7個不同發(fā)育時期的基因表達量結果顯示:ZjTCP19與狗頭棗果實成熟相關性較高;ZjHD-Zip1和ZjHD-Zip6表達與果實成熟呈顯著正相關(P≤0.01),ZjHD-Zip2和ZjHD-Zip4表達與果實成熟呈顯著負相關(P≤0.01),ZjERF1與狗頭棗果實的成熟呈顯著正相關(P≤0.01),完熟期稍有下降,推測ZjERF1與乙烯調控狗頭棗果實成熟有關;ZjERF3與狗頭棗果實成熟呈顯著負相關(P≤0.01),推測ZjERF3可能參與了延緩狗頭棗果實成熟的調控。綜上所述,在棗果實7個發(fā)育成熟過程中,ZjACO1、ZjACO2和ZjACO3基因的表達與棗果實成熟呈正相關;ZjETR2基因的表達與棗果實成熟呈正相關,ZjERS1和ZjETI基因的表達與果實成熟呈負相關;ZjTCP19、ZjHD-Zip1、ZjHD-Zip6和ZjERF3可能通過參與乙烯的合成或乙烯信號轉導來調控狗頭棗果實成熟。果實成熟過程并不是受單一因素的調控,本研究初步顯示狗頭棗果的成熟可能通過調控棗ACO基因的表達進而影響乙烯的合成,并通過調控乙烯受體的表達,以及轉錄因子調控乙烯生物合成,或其參與乙烯信號轉導來調控果實成熟。本研究通過基因調控的策略對狗頭棗果實成熟機制進行了初探,為狗頭棗果實的儲存以及保鮮提供參考依據(jù),以及為利用分子育種手段選育高品質狗頭棗品種提供了理論參考依據(jù)。
【學位單位】:延安大學
【學位級別】:碩士
【學位年份】:2019
【中圖分類】:S665.1
【部分圖文】:

乙烯生物合成,途徑,乙烯信號轉導,受體


圖 1-1 乙烯生物合成途徑Figure 1-1 Ethylene biosynthesis pathwaCC 氧化酶(ACO)催化下形成乙C 含量有著密切的關系。這在躍和 ACC 合成酶(ACS)是乙烯合吸躍變兩種不同類型的作物中,CS 催化合成反應這一系列反應中乙烯信號轉導機制的研究尚不明烯受體,擬南芥和番茄的遺傳分。乙烯信號轉導模型已通過模式與 ETR 受體結合后,與受體下端復合體;位于 CTR 受體下端的

系統(tǒng)進化樹,番茄,果實,著果


析O 基因家族系統(tǒng)發(fā)育分析棗 ZjACO 基因的進化關系以及所具有的功能(如圖 2-發(fā)現(xiàn)棗 ZjACO1 和 ZjACO2 與番茄 LeACO4 和 LeACO在一起,推測 ZjACO1 和 ZjACO2 與 LeACO4 和 LeACO化上可能經(jīng)歷了相同的歷程且可能具有相似的功能果實的成熟其表達量不斷地增加;LeACO2 在果實中不達較高,隨著果實的成熟表達量受到抑制;LeACO4 在著果實的成熟表達量下降;LeACO5 在果實中的表達模式CO1 和 ZjACO2 可能在果實成熟中扮演著重要的作用,Z,但具體模式尚不清楚。

啟動子序列,上游序列,應答元件,乙烯


第二章 狗頭棗 ZjACO1 基因克隆與表達分析2.3.2 ZjACO 基因家族啟動子序列分析對冬棗 ZjACO1-ZjACO3 基因 2000 bp 的啟動子序列進行分析(圖 2-2),棗ZjACO1 包括 4 個乙烯應答元件 ERE、1 個水楊酸應答元件 TCA-element、1 個生長素應答元件 TGA-element、2 個干旱應答元件 MBS、1 個葉肉細胞相關的元件 HD-zip(CAAT(A/T)ATTG)、4 個 DNA 綁定元件 Box、W-box 和 4 個厭氧感應元件 ARE。ZjACO2 含有 1 個乙烯應答元件 ERE、2 個茉莉酸甲酯應答元件 CGTCA-motif、1個干旱應答元件和 2 個 B-box 應答元件。ZjACO3 含有 3 個乙烯應答元件 ERE、1個水楊酸應答元件 TCA-element、1 個脫落酸應答元件和 1 個 W-box 應答元件。根據(jù)啟動子元件分析,推測狗頭棗 ZjACO1、ZjACO2 和 ZjACO3 與棗果生長抗逆過程和果實發(fā)育成熟過程有密切的關系。
【相似文獻】

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本文編號:2879851

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