發(fā)布時(shí)間：2020-12-04 11:17

　　線粒體為植物體內(nèi)各項(xiàng)生命活動(dòng)提供能量,其DNA編碼植物體內(nèi)一些重要酶類和蛋白質(zhì)。提取高質(zhì)量的線粒體DNA是線粒體基因組測(cè)序的重要前提。本研究以‘21世紀(jì)’、‘琿春’、‘早霞露’、‘中華壽桃’、‘Mafirm’、‘瑞光21’6個(gè)品種的桃葉片作為外植體,24℃完全避光條件下進(jìn)行了愈傷組織誘導(dǎo)及增殖。并以獲得的‘21世紀(jì)’桃愈傷組織為材料,通過(guò)勻漿化處理、差速離心和蔗糖襯墊等操作提取并純化線粒體、利用SDS裂解法等方法提取并純化mtDNA,最終獲得了滿足測(cè)序要求的‘21世紀(jì)’桃mtDNA,建立了一套適合桃的簡(jiǎn)便快速高效的mtDNA提取技術(shù)體系,豐富了薔薇科果樹mtDNA提取的研究。對(duì)‘21世紀(jì)’桃線粒體基因組進(jìn)行了測(cè)序,初步分析了桃線粒體基因組的特點(diǎn)和基因的功能,為后續(xù)開展更廣泛、更深入的研究奠定了基礎(chǔ)。主要結(jié)果如下:1.MS培養(yǎng)基中同時(shí)添加6-BA和2,4-D可顯著提高6個(gè)桃品種愈傷組織的誘導(dǎo)率,縮短誘導(dǎo)時(shí)間。當(dāng)6-BA濃度達(dá)到3 mg/L時(shí),誘導(dǎo)率可達(dá)到100%,愈傷組織的生長(zhǎng)情況良好。最佳愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為MS+3.0 mg/L6-BA+1.0mg/L2,4-D。2.熒光顯微鏡檢測(cè)顯... 

【文章來(lái)源】：河北科技師范學(xué)院河北省

【文章頁(yè)數(shù)】：54 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

‘21世紀(jì)’桃愈傷組織生長(zhǎng)情況

圖 2-2 20 g 新鮮愈傷組織量Figure 2-2 Fresh callus (20g)泛應(yīng)用于各類研究中。依據(jù)不同數(shù)桃組織培養(yǎng)的研究都集中在砧用莖段和種胚，關(guān)于以葉片為材則嘗試著以新采集桃葉片為外植定芽作為外植體有如下幾個(gè)優(yōu)點(diǎn)或不定芽作為材料誘導(dǎo)愈傷組織體誘導(dǎo)愈傷組織可以省略不定芽較多，其各個(gè)縫隙間極易因消毒點(diǎn)，在正確進(jìn)行消毒操作的基礎(chǔ)而言，獲得材料本身限制較多，

3-1 兩次獨(dú)立試驗(yàn)捕捉到的線粒體熒光顯微鏡觀ndrial fluorescence microscopic observations capturexperiments取結(jié)果分析紫外吸收光度分析NA 經(jīng) Bio-Drop 超微量蛋白核酸分析儀測(cè) A260/A280 均介于 1.8~2.0，說(shuō)明不含蛋白 2，說(shuō)明不含有機(jī)鹽等雜質(zhì)，該提取方法提表 3-3 mtDNA 濃度及紫外吸光度分析 Concentration and ultraviolet absorption spectrop1 2 3 4 921.5 1457.8 1486.3 1216.5

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
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[4]白樺低溫脅迫響應(yīng)與葉綠體RNA結(jié)合蛋白的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[D]. 烏鳳章.東北林業(yè)大學(xué) 2008

碩士論文
[1]桃種質(zhì)資源多酚類物質(zhì)評(píng)價(jià)及其QTL定位[D]. 丁體玉.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2017
[2]桃線粒體DNA多態(tài)性及其與抗寒性的關(guān)系[D]. 趙慧敏.河北科技師范學(xué)院 2013
[3]不同抗寒/凍性葡萄CBF2基因克隆分析及表達(dá)載體構(gòu)建[D]. 張哲敏.甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué) 2012
[4]根癌農(nóng)桿菌介導(dǎo)的抗寒基因轉(zhuǎn)錄因子CBF轉(zhuǎn)化蘋果的研究[D]. 楊麗麗.河北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2006



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