發(fā)布時間：2024-05-22 01:40

　　植物開花和花青素合成調(diào)控與植物生殖、次級代謝產(chǎn)物合成、逆境脅迫響應(yīng)、產(chǎn)量等密切相關(guān),因此對植物開花和花青素合成調(diào)控的遺傳機(jī)制研究具有重要的意義。研究表明,SPL9(SQUAMOSA PROMOTER BINDING PROTEIN-LIKE 9)基因參與調(diào)控植物開花、植物花青素生物合成等重要過程。本研究前期在篩選與SPL9互作蛋白時發(fā)現(xiàn),bHLH(Basic helix-loop-helix,堿性螺旋-環(huán)-螺旋)家族成員bHLH113與SPL9在蛋白水平上互作。bHLH113 T-DNA插入缺失突變體bhlh113開花延遲并且莖基部紫色加深,這些表型和SPL9缺失突變體相似。我們推測bHLH113可能與年齡途徑有關(guān),在調(diào)節(jié)植物開花和花青素合成中發(fā)揮功能。本研究利用遺傳學(xué)和分子生物學(xué)方法對此假設(shè)進(jìn)行了驗(yàn)證,取得了如下結(jié)果:1.通過酵母雙雜交和雙分子熒光互補(bǔ)實(shí)驗(yàn)證實(shí)bHLH113與SPL9存在蛋白水平上的互作。2.長日照條件下,與野生型相比,bhlh113表現(xiàn)出植株矮小、開花延遲的表型;同時bhlh113整株植物的花青素含量顯著高于野生型,在開花時莖和分支中尤為明顯。3.qRT-PCR檢測...

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.1花青素生物合成途徑

，花青素生物合成的直接前體苯丙氨酸(Phenylalanine)經(jīng)初始代謝反應(yīng)生成4-香豆酰輔酶A(4-coumaroylCoA)；其次，查爾酮合成酶(Chalconesynthase，CHS)催化4-香豆酰輔酶A和丙二酰輔酶A(MalonylCoA)合成二氫黃酮醇(Dihydr....

圖1.2酵母雙雜結(jié)果

bHLH轉(zhuǎn)錄因子家族種類眾多，功能多樣，在植物生長發(fā)育，次級代謝產(chǎn)物合成和響應(yīng)逆境脅迫等過程都有重要研究意義。1.4研究內(nèi)容與技術(shù)路線1.4.1研究基礎(chǔ)本實(shí)驗(yàn)室主要從事植物年齡途徑的分子調(diào)控研究。植物幼年向成年階段轉(zhuǎn)變稱為植物營養(yǎng)生長階段轉(zhuǎn)變，植物營養(yǎng)生長階段轉(zhuǎn)變主要受miR15....

圖1.3技術(shù)路線圖

12（1）bHLH113與SPL9雙分子熒光互補(bǔ)分析（2）bhlh113突變體開花表型統(tǒng)計(jì)分析（3）bhlh113突變體花青素表型統(tǒng)計(jì)分析（4）bhlh113突變體開花途徑和花青素途徑相關(guān)基因表達(dá)檢測（5）UBQ10::bHLH113表型統(tǒng)計(jì)分析（6）UBQ10::bHLH113....

圖2.1pGADT7和pGBKT7結(jié)構(gòu)圖

16表2.5逆轉(zhuǎn)體系-2Table2.5SystemofRNAreversal-2體系體積PrimeScriptIIBuffer（5×）2μLRNaseInhibitor0.25μLDEPCH2O2.25μLPrimeScriptIIRase0.5μL得到的10μL體系混合充分，....

本文編號：3980212