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家蠶自噬受體蛋白p62及Ref(2)P的核質穿梭和翻譯后修飾研究

發(fā)布時間:2024-06-28 20:41
  家蠶p62蛋白(又名sequestosome-1,SilkDB:BGIBMGA002620-PA)具有多個功能結構域,在細胞自噬、凋亡等生命過程中起著十分重要的作用。家蠶p62的一個旁系同源蛋白(paralog)Ref(2)P比p62缺少一個PB1結構域,其他結構域完全相同。本論文主要研究了家蠶p62及Ref(2)P蛋白的核質穿梭特性及對BmNPV多角體蛋白亞細胞定位的影響,初步探討了病毒與宿主之間的“博弈”關系。主要結果如下:1.家蠶自噬受體蛋白p62及Ref(2)P核質穿梭特性分析⑴參考人類p62蛋白的核質穿梭特性,構建eGFP與p62、Ref(2)P的融合表達載體,轉染BmN細胞后,激光共聚焦顯微鏡分析發(fā)現(xiàn)p62和Ref(2)P在細胞質中呈斑點狀分布;加入出核轉運抑制劑來普霉素B(Leptomycin B,LMB),p62及Ref(2)P被轉運到細胞核內。這些結果表明家蠶p62和Ref(2)P蛋白是CRM1依賴的核質穿梭蛋白。另外,p62(K8A/D59A)入核時間遠快于野生型p62蛋白,表明PB1結構域對p62蛋白滯留在細胞質中起到重要作用。⑵以結構相對簡單的Ref(2)P為研...

【文章頁數(shù)】:82 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1.1核孔復合體的結構特征

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圖1.1核孔復合體的結構特征[19]Figure1.1Structuralcharacteristicsofthenuclearporecomplex1.1.2.2核定位信號序列和出核信號序列核定位信號序列(nuclearlocalizationsign....


圖1.2蛋白質的核質轉運過程簡化圖

圖1.2蛋白質的核質轉運過程簡化圖

家蠶自噬受體蛋白p62及Ref(2)P的核質穿梭和翻譯后修飾研究節(jié)復合物通過NPC,當復合物運送到細胞核后,RanGTP與Importin-β結合并改變其構象,解離復合物,將貨物蛋白釋放到細胞核中(圖1.2a)[41]。另一種是含有非典型NLS的蛋白質,可以與....


圖1.3p62的結構域及相互作用蛋白[62]

圖1.3p62的結構域及相互作用蛋白[62]

家蠶自噬受體蛋白p62及Ref(2)P的核質穿梭和翻譯后修飾研究身通過PB1結構域相互作用,形成二聚體,進而促進自噬[59]。LIR基序可以促進p62蛋白分子與LC3的結合,從而有利于蛋白質通過自噬途徑降解[60]。UBA結構域有利于p62與被泛素化鏈標....


圖1.4p62在DNA損傷修復中的圖示

圖1.4p62在DNA損傷修復中的圖示

江蘇大學碩士學位論文蛋白進行修復[70],p62蛋白入核后,能與DNA修復相關蛋白形成聚集體,包括FLNA和RAD51,進而直接在細胞核內通過泛素-蛋白酶體途徑降解聚集體,導致DNA損傷修復的效率降低。因此細胞核內p62蛋白的水平會影響DNA損傷修復的效率。....



本文編號:3996655

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