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抗沙門菌O:9抗原單克隆抗體的制備及初步應用

發(fā)布時間:2024-06-29 00:58
  沙門菌是一種重要的人獸共患病原菌,在全世界范圍內(nèi)普遍存在,易感染各種家畜家禽,對養(yǎng)殖業(yè)的生產(chǎn)和人類的食品衛(wèi)生安全造成威脅,F(xiàn)代規(guī);仪蒺B(yǎng)殖業(yè)中,沙門菌的感染主要以O:9血清型的雞白痢沙門菌和腸炎沙門菌為主。這些沙門菌能引起雛雞極高的發(fā)病率和死亡率,被感染的成年雞表現(xiàn)為無癥狀帶菌,通過垂直傳播感染雞蛋,從而降低下一代雛雞的成活率,且成年雞的產(chǎn)蛋能力也會因感染顯著下降。這些都對養(yǎng)禽業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失。感染沙門菌的家禽作為主要傳染源之一,是沙門菌防控與凈化的關鍵控制點。因此,快速、精確、有效的沙門菌檢測方法,有利于盡早發(fā)現(xiàn)家禽沙門菌的感染,從而切斷傳染源,保證食品的衛(wèi)生安全和人類的健康。沙門菌血清型劃分的主要依據(jù)是其細菌表面O-抗原的差異。O-抗原作為革蘭陰性菌表面的O-特異側鏈,由不同的重復寡糖單元構成,位于細胞壁結構中的脂多糖(LPS)上,能夠誘導動物機體產(chǎn)生特異性的抗體,可作為沙門菌感染的診斷靶標。目前,被廣泛使用的禽沙門菌抗體診斷方法以基于O-抗原與抗體結合的玻板凝集試驗(PAT)為主。但在臨床應用中,PAT檢測依靠肉眼觀察,所用的染色抗原存在批次差異,導致PAT的檢測結果不夠穩(wěn)...

【文章頁數(shù)】:84 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖2細菌LPS的化學結構(Erridgeetal.,2002)??Figure?2?Chemical?structure?of?bacterial?LPS??沙門菌眾多的血清型根據(jù)〇-抗原的不同,可分成多個不同的血清群

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圖3夾心ELISA方法的大致流程(Jin?etal.,2013)??Figure?3?General?flow?of?sandwich?ELISA??

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是特定激發(fā)光下熒光信號強度的變化,且結合計算機軟件可將實驗結果進行數(shù)字化,??有利于數(shù)據(jù)的分析(Gonzdlez-Marti'nezetal.,?2018)。ELISA技術自上世紀發(fā)明以來,??己經(jīng)成為許多免疫學實驗、臨床診斷和生物醫(yī)學中最為常見的免疫學檢測方法之一。??如今,使....


圖4LFIA裝置的組裝示意圖(Gaoetal.,?2018)??Figure?4?Assembly?diagram?of?LFLA??LFIA的性能可能受諸多因素的影響,例如材料,樣品粘度,抗體親和力,信號產(chǎn)??生系統(tǒng)等

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體金顆粒會??顯示出肉眼可見的紅色(Song?etal.,2019)。其他材料也可以直接觀察到實驗結果,或??間接地在相應的信號檢測器的幫助下獲得檢測結果。最后,多余的液體樣品在通過捕??獲線之后,會被末端的吸收墊吸收。??剛?sa_?Cap^pad?c〇ntr〇1?stripe....


圖5流式細胞術示意圖(Gao?etal.,2018)??Figure?5?Schematic?diagram?of?flow?cytometry??單克隆抗體則用于將熒光染料結合到待檢測顆粒的目標靶抗原上

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?Cytometry)被廣泛應用于免疫學的各種研究,尤其是液體樣品??中細胞等顆粒物的分析。其依賴于多個系統(tǒng)的整合,包括光學,力學,流體學和計算??機科學等。流式細胞術可以同時分析一個顆粒樣品的多個參數(shù),其基本原理是控制粒??子一個接一個地依次通過激光束發(fā)射裝置和信號檢測傳感器,....



本文編號:3996919

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