發(fā)布時間：2018-04-08 16:24

  本文選題：氨氧化菌　切入點：絕對定量　出處：《實驗室研究與探索》2017年10期

【摘要】：為了快速準(zhǔn)確地檢測活性污泥中氨氧化菌(AOB)的拷貝數(shù),探求一種新的快速簡便的絕對定量標(biāo)準(zhǔn)品的制備方法。利用純化的PCR產(chǎn)物和重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品分別進(jìn)行絕對定量,比較兩者熔解曲線、擴(kuò)增曲線、標(biāo)準(zhǔn)曲線和絕對拷貝數(shù)等方面的差異,分析兩種標(biāo)準(zhǔn)品制備方法應(yīng)用方面的優(yōu)勢。結(jié)果顯示,兩種標(biāo)準(zhǔn)品制備的熔解曲線都呈單一尖峰、擴(kuò)增曲線指數(shù)期平行、標(biāo)準(zhǔn)曲線R299%,PCR產(chǎn)物作為標(biāo)準(zhǔn)品得到的AOB絕對拷貝數(shù)小于質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品的結(jié)果(P0.05),表明純化的PCR產(chǎn)物作為標(biāo)準(zhǔn)品較制備重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品而言,操作過程更加簡便、經(jīng)濟(jì)、對人員專業(yè)要求更低,在其純度較高的情況下,具有和重組質(zhì)粒標(biāo)準(zhǔn)品一樣的應(yīng)用效果。
[Abstract]:In order to detect the copy number of AOB in activated sludge quickly and accurately, a new rapid and simple preparation method of absolute quantitative standard was explored.Using the purified PCR product and the recombinant plasmid standard product for absolute quantification, the differences of fusion curve, amplification curve, standard curve and absolute copy number were compared, and the advantages of the two preparation methods were analyzed.The results showed that the melting curves of the two kinds of standard products showed a single peak, and the exponential periods of the amplification curves were parallel.The absolute copy number of AOB obtained by standard curve R299product was smaller than that of plasmid standard product (P0.05N), which indicated that the operation of purified PCR product was simpler and more economical than that of preparing recombinant plasmid standard product.It has the same application effect as the recombinant plasmid standard in the case of high purity.
【作者單位】： 蘇州科技大學(xué)江蘇省環(huán)境科學(xué)與工程重點實驗室環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院;
【基金】：國家研發(fā)計劃項目(2016YFC0401103) 國家自然科學(xué)基金項目(51478284,51408387) 蘇州市分離凈化材料與技術(shù)重點實驗室項目(SZS201512) 江蘇省高等教育教改研究項目(2015JSJG248)
【分類號】：Q503;X703

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本文編號：1722396