發(fā)布時間：2019-01-08 19:05

【摘要】：南果梨是遼寧省的特產(chǎn)水果,采收期為9月上、中旬。采收時的南果梨肉脆、汁少、無香氣,但后熟后的南果梨多汁、果肉綿軟、香氣濃郁。南果梨貯藏期短,在常溫貯藏半個月左右達(dá)到最佳食用期,隨后果實會快速衰老。目前,國內(nèi)普遍通過冷藏來延長其貯藏期。然而,生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn),經(jīng)過冷藏的南果梨在后熟至最佳食用期時香氣明顯變淡,嚴(yán)重影響了冷藏南果梨的商品價值。因此,研究南果梨經(jīng)冷藏后香氣變淡的機制有重要的意義。本研究系統(tǒng)的分析了南果梨采后自然后熟及冷藏后常溫貨架期間酯類香氣成分種類及含量的變化、酯類香氣代謝合成途徑關(guān)鍵酶活性及相應(yīng)蛋白的表達(dá)。采用程序降溫處理的方法,調(diào)控冷藏南果梨香氣轉(zhuǎn)淡的問題。主要研究結(jié)果如下:(1)優(yōu)化western blot檢測南果梨組織蛋白質(zhì)表達(dá)的條件,得出優(yōu)化條件為:選用Trizol法提取南果梨果實總蛋白,聚丙烯酰胺凝膠電泳分離總蛋白的最適上樣量為50μg,抗體孵育最適時間為一抗室溫、搖床條件下孵育2 h,二抗置于搖床上在室溫條件下孵育1h,采用ECL化學(xué)發(fā)光分析試驗結(jié)果,南果梨果實Actin、LOX及AAT蛋白一抗的最適稀釋比分別為1:400、1:200和1:600。(2)冷藏90 d和180 d后的常溫貨架期間,酯類香氣成分的種類和總酯含量均出現(xiàn)減少,且冷藏時間越長,酯類香氣成分損失越嚴(yán)重。冷藏180d的南果梨果實在常溫貨架期間,脂氧合酶(lipoxidase,LOX)和醇�；�轉(zhuǎn)移酶(alcohol acyltransferase,AAT)活性及LOX蛋白表達(dá)出現(xiàn)的高峰較冷藏90 d的處理提早3 d,LOX和AAT的蛋白表達(dá)及AAT活性在整個常溫貨架期間顯著低于冷藏90 d的處理,冷藏后常溫最佳食用期時LOX蛋白表達(dá)、AAT活性與對應(yīng)蛋白表達(dá)量均受到抑制,且隨冷藏時間延長,抑制現(xiàn)象越明顯。說明AAT活性、AAT及LOX蛋白表達(dá)的下調(diào)可能影響了南果梨果實酯類香氣物質(zhì)的合成,可能與南果梨果實酯類香氣的變淡相關(guān)。(3)程序降溫處理的南果梨冷藏期間及冷藏90d后的常溫貨架期間,當(dāng)果實后熟至最佳食用期時酯類香氣的種類和總酯含量較常規(guī)冷藏組有大幅度提升,主要的酯類香氣成分均顯著高于常規(guī)冷藏組。程序降溫處理提高了 LOX和AAT的活性和對應(yīng)蛋白表達(dá)量,可能在一定程度上促進(jìn)了南果梨酯類香氣的生成。
[Abstract]:Nanguo Pear is a special fruit in Liaoning Province. The flesh of Nanguo pear is crisp, less juice, no aroma, but after ripening, Nanguo pear is juicy, soft and fragrant. Nanguo pear has a short storage period and reaches the optimum edible period at room temperature for about half a month, and then the fruit will senescence quickly. At present, cold storage is widely used in China to prolong its storage period. However, it was found in the production that the aroma of the refrigerated Nanguo pear decreased obviously from the later ripening to the optimum edible period, which seriously affected the commercial value of the refrigerated Nanguo pear. Therefore, it is of great significance to study the mechanism of aroma thinning after cold storage of Nanguo pear. This study systematically analyzed the changes of the kinds and contents of ester aroma components, the key enzyme activities and the expression of corresponding proteins in the metabolic synthesis pathway of Nanguo pear during the natural ripening after harvest and at room temperature after cold storage. The method of programmed cooling was used to control the problem of aroma thinning of refrigerated Nanguo pear. The main results are as follows: (1) the optimal conditions for detecting protein expression in Nanguo pear tissue by western blot were obtained as follows: extraction of total protein from Nanguo pear by Trizol method. The optimum sample amount for the separation of total protein by polyacrylamide gel electrophoresis was 50 渭 g, the optimum incubation time of antibody was room temperature of the first antibody, the second antibody was incubated in shaking bed for 2 hours, and the second antibody was incubated at room temperature for 1 hour. The results of ECL chemiluminescence analysis showed that the optimal dilution ratios of Actin,LOX and AAT proteins were 1: 400: 1 200 and 1: 600 respectively. (2) the shelf life at room temperature after 90 days and 180 days of cold storage. The species and total ester contents of ester aroma components decreased, and the longer the storage time was, the more serious the loss of ester aroma components was. The peak of lipoxygenase (lipoxidase,LOX) and alcohol acyltransferase (alcohol acyltransferase,AAT) activity and the expression of LOX protein in fruits of Nanguo pear were 3 days earlier than those of 90 days of cold storage. The protein expression and AAT activity of LOX and AAT were significantly lower than those of 90 d cold storage treatment during the whole shelf life at room temperature. The expression of LOX protein, AAT activity and corresponding protein expression were inhibited during the optimum eating period of normal temperature after cold storage, and the expression of AAT and corresponding protein were inhibited with the prolongation of cold storage time. The more obvious the inhibition was. These results suggested that the downregulation of AAT activity and the expression of AAT and LOX proteins might affect the synthesis of esters in the fruits of Nanguo pear. It may be related to the light aroma of fruit esters. (3) the cold storage period of Nanguo pear and the shelf period of normal temperature after 90 days of cold storage. When the fruit matured to the best edible stage, the species and total ester contents of esters increased significantly, and the main ester aroma components were significantly higher than those of the conventional cold storage group. The programmed cooling treatment increased the activity of LOX and AAT and the expression of corresponding proteins, which may promote the formation of esters in Nanguo pear to some extent.
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：TS255.1

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本文編號：2405006