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麥胚清蛋白的酶法水解及其產(chǎn)物的抗氧化性研究

發(fā)布時間:2019-09-25 06:49
【摘要】:小麥胚芽是一種優(yōu)質(zhì)的植物蛋白源,蛋白質(zhì)含量占營養(yǎng)物質(zhì)的30%左右。麥胚蛋白的主要組成為清蛋白、球蛋白和麥醇溶蛋白,其中麥胚清蛋白含量最大,氨基酸組成配比最佳,且是可用水浸提法提取的一類蛋白質(zhì)。本文在提取麥胚清蛋白的基礎(chǔ)上,探究了麥胚清蛋白酶解的最佳酶解工藝,對不同水解度的清蛋白酶解物進行了功能特性和抗氧化力研究,并探究了合適水解度的酶解物抗氧化活性成分及其氨基酸組成分析。主要結(jié)論如下:(1)麥胚清蛋白氨基酸組成豐富且均衡,是一種優(yōu)質(zhì)的蛋白。SDS-PAGE電泳圖表明,麥胚清蛋白是由多種亞基蛋白組成,分子量分別為14.61,19.49,24.77,30.02,48.51,67.88和82.22 kDa,其亞基蛋白多數(shù)分子量較大。(2)麥胚清蛋白酶解的最佳用酶為堿性蛋白酶,最優(yōu)酶解條件為加酶量8000U/g蛋白,底物濃度2%,pH9.1,溫度60℃,酶解時間2h,此時水解度達9.32%。(3)在最適酶解條件下制備不同水解度的麥胚清蛋白酶解物,溶解性得到改善,水解度越高溶解性越好,水解度為8.34%時,等電點處的溶解度從未水解時的49.52%提高到74.09%。而乳化性和乳化穩(wěn)定性隨水解度的增加而降低。當(dāng)水解度低于7.54%時,酶解物對DPPH自由基和對羥自由基的清除率隨水解度的提高而增強。濃度為100mg/mL,水解度為7.54%時的酶解物對DPPH自由基清除率達到59.68%,對羥自由基清除率達50.23%。(4)先利用超濾將水解時間60min的麥胚清蛋白酶解物分成分子量3kDa和≤3kDa兩部分,其中≤3kDa部分含有較高的自由基清除率;Sephadex G-25凝膠層析對麥胚清蛋白酶解物的分離條件為:洗脫液為去離子水,洗脫速度為1.0m L/min的,上樣濃度為100 mg/m L,上樣量為1.0mL。在此條件下,≤3kDa部分的清蛋白酶解物被分離出3個峰(F1、F2、和F3),各峰都具有清除自由基能力,其中F3峰具有最高的自由基清除力,對DPPH?、OH?和O2-?清除率分別高達73.98%、46.21%和89.74%;使用超高效液相色譜對F3峰進行分析,圖譜表明,F3峰不是單一物質(zhì),能被分成四個組分峰;對F3峰的氨基酸組成分析表明,F3峰氨基酸含量高,其中含量較多的幾種氨基酸,如Glu、Asp、Leu、Phe等都具有抗氧化作用。
【學(xué)位授予單位】:合肥工業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2017
【分類號】:TS201.21

【參考文獻】

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本文編號:2541296

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