發(fā)布時間：2020-12-03 09:26

　　本論文以豬肩胛骨為原料,通過酶解制備降血壓肽,以血管緊張素轉(zhuǎn)化酶（Angiot-ensin Ⅰ-Converting Enzyme, ACE）抑制率為主要指標(biāo),篩選出最適酶作為酶解用酶；通過單因素和響應(yīng)面試驗優(yōu)化該種酶的酶解條件；在此基礎(chǔ)上,對酶解底物進(jìn)行超聲波預(yù)處理,通過單因素和響應(yīng)面試驗優(yōu)化超聲條件；利用超濾、凝膠層析等分離純化技術(shù)從酶解液中分離純化降血壓肽；探討豬肩胛骨降血壓肽耐消化特性及各種理化因素對其穩(wěn)定性的影響。研究結(jié)果如下。篩選出的最適蛋白酶為風(fēng)味蛋白酶,最佳酶解條件為：pH 7.0、底物濃度5%、酶解溫度53℃、酶解時間4.5 h、酶底比6900 U/g。此條件下制備出豬肩胛骨降血壓肽的ACE抑制率為65.31%,半數(shù)抑制濃度（Half-inhibitory concentration, IC50）為1.34 mg/mL。對底物的超聲條件進(jìn)行優(yōu)化,獲得的最佳超聲條件為：超聲時間25 min,超聲功率717 W,超聲溫度40℃,酶解時間3 h。此條件下制備出ACE抑制率為75.58%的豬肩胛骨降血壓肽。IC5o值為0.90 mg/mL。采用超濾離心管將酶解液分離為分子量大... 

【文章來源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 前言
    1.1 畜禽骨研究概況
        1.1.1 畜禽骨
        1.1.2 畜禽骨的營養(yǎng)價值
        1.1.3 畜禽骨膠原蛋白降血壓肽研究進(jìn)展
    1.2 高血壓與血管緊張素轉(zhuǎn)化酶
    1.3 食源性降血壓肽
        1.3.1 酶解法制備降血壓肽
        1.3.2 超聲波輔助制備降血壓肽
    1.4 降血壓肽的分離純化
    1.5 降血壓肽活性的評價方法
        1.5.1 體外評價方法
        1.5.2 體內(nèi)抑制率測定
    1.6 體外模擬胃腸道消化過程
    1.7 降血壓肽功能性食品研究進(jìn)展
        1.7.1 降血壓肽對產(chǎn)品感官特性的影響
        1.7.2 食品加工對降血壓肽的影響
    1.8 研究目的及意義
2 材料與方法
    2.1 材料與試劑
    2.2 主要試驗儀器
    2.3 方法
        2.3.1 豬肩胛骨降血壓肽酶解條件優(yōu)化
        2.3.2 超聲波輔助酶解制備降血壓肽工藝優(yōu)化
        2.3.3 降血壓肽的分離純化
        2.3.4 不同理化因素對降血壓肽活性的影響測定
        2.3.5 降血壓肽體外模擬胃腸道消化穩(wěn)定性試驗
        2.3.6 指標(biāo)測定
        2.3.7 統(tǒng)計分析
3 結(jié)果與分析
    3.1 蛋白質(zhì)含量的測定結(jié)果
    3.2 酶活的測定結(jié)果
    3.3 蛋白酶篩選結(jié)果
    3.4 風(fēng)味蛋白酶酶解條件優(yōu)化結(jié)果
        3.4.1 酶解溫度對酶解液的水解度及ACE抑制率的影響
        3.4.2 酶解pH對酶解液的水解度及ACE抑制率的影響
        3.4.3 酶解時間對酶解液的水解度及ACE抑制率的影響
        3.4.4 酶底比對酶解液的水解度及ACE抑制率的影響
        3.4.5 底物濃度對酶解液的水解度及ACE抑制率的影響
        3.4.6 豬肩胛骨降血壓肽制備工藝響應(yīng)面法優(yōu)化結(jié)果
    3.5 超聲波輔助酶解制備降血壓肽工藝優(yōu)化結(jié)果
        3.5.1 超聲功率對酶解液ACE抑制率的影響
        3.5.2 超聲時間對酶解液ACE抑制率的影響
        3.5.3 超聲溫度對酶解液ACE抑制率的影響
        3.5.4 超聲后酶解時間對酶解液ACE抑制率的影響
        3.5.5 超聲波輔助酶解制備降血壓肽的響應(yīng)面優(yōu)化結(jié)果
    3.6 豬肩胛骨降血壓肽的分離純化結(jié)果
        3.6.1 超濾對豬肩胛骨降血壓肽的純化結(jié)果
        3.6.2 凝膠層析對豬肩胛骨降血壓肽的純化結(jié)果
    3.7 不同理化因素對降血壓肽活性影響的測定結(jié)果
        3.7.1 不同溫度對降血壓肽活性影響的測定結(jié)果
        3.7.2 不同pH對降血壓肽活性影響的測定結(jié)果
        3.7.3 食品添加劑對降血壓肽穩(wěn)定性影響的測定結(jié)果
    3.8 降血壓肽體外模擬胃腸道消化穩(wěn)定性測定結(jié)果
        3.8.1 酶解液的胃腸道穩(wěn)定性試驗測定結(jié)果
        3.8.2 超濾液的胃腸道穩(wěn)定性試驗測定結(jié)果
4 討論與結(jié)論
    4.1 討論
        4.1.1 關(guān)于選擇豬肩胛骨制備降血壓肽
        4.1.2 關(guān)于豬肩胛骨前處理
        4.1.3 關(guān)于豬肩胛骨的酶解
        4.1.4 關(guān)于底物的超聲波預(yù)處理
        4.1.5 關(guān)于分離純化
        4.1.6 關(guān)于豬肩胛骨降血壓肽的穩(wěn)定性
    4.2 結(jié)論
5 問題與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表文章


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[7]分步酶解法制備菜籽降血壓肽[J]. 張艷,劉志偉.  食品科學(xué). 2013(03)
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碩士論文
[1]綠豆粉絲廢水生物法制備降血壓肽的研究[D]. 龔琴.湖北工業(yè)大學(xué) 2011
[2]牛骨酶解制備血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制肽的研究[D]. 蔡麗華.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010
[3]豬髖骨膠原多肽的制備及其生物活性研究[D]. 李珂.湖南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2009



本文編號：2896263