濃香型白酒大曲中五種主要酶產生菌的多樣性及變化規(guī)律研究
發(fā)布時間：2020-12-05 15:35
在濃香型白酒大曲發(fā)酵過程中,大曲在很大程度上決定了釀造質量,不同的大曲含有不同的產酶微生物群落結構及生物多樣性。采用分子生物學的方法。所得實驗結論如下:(1)實驗分離得到產果膠酶原核產生菌菌落形態(tài)為9類,真核產生菌的菌落形態(tài)有10類。分子生物學鑒定產果膠酶原核微生物隸屬于一個屬6個種,為Bacillus屬。產果膠酶真核微生物有Aspergillus(3種)和Penicillium(1種)兩個屬4個種,其中Aspergillus為優(yōu)勢菌群。此外,疑似未報道產果膠酶的原核微生物為Bacillus paralicheniformis strain。(2)產木聚糖酶原核微生物的菌落形態(tài)有12類,真核微生物的菌落形態(tài)有10類。鑒定到產木聚糖酶原核微生物有兩個屬(Bacillus和Cronobacter)10個種,其中,Bacillus屬有8個種,表現出豐富的多樣性。產木聚糖酶真核微生物有四個屬,分別為Aspergillus(2種)、Lichtheimia(2種)、Rhizomucor(1種)、Penicillium(1種)。其中Bacillus oryzaecorticis strain、Bac...
【文章來源】：西華大學四川省
【文章頁數】：73 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
大曲制作流程
篩選和分離實驗工藝流程如圖2.1所示。根據圖2.1流程,準確稱取適量粉碎的大曲,倒入帶玻璃珠的無菌水中浸泡振蕩。靜置5min待澄清后取適量的上清液進行梯度稀釋[24],然后吸取適當的稀釋液進行涂布平板,培養(yǎng)完成后,挑取顯色的代表菌落進行純化和保藏,并記錄菌落形態(tài)特征。
菌株經過16S r DNA基因擴增后,挑選代表性菌株的送檢結果,進行序列同源性比對,下載序列同源性最高的進行分析。為了進一步考察產果膠酶原核菌株的種屬親緣關系情況,實驗應用MEGA軟件構建系統(tǒng)進化樹,結果如圖2.2所示。圖2.2中分析可以得到,產果膠酶原核微生物隸屬于2個屬,分別為Bacillus和Bacterium。菌株G-2B、G-3B、G-4B、G-6B、C46、C68都隸屬于Bacillus,其中G-2B與Bacillus subtilis strain相似性最高,G-3B和G-4B與同一個模式菌株(Bacillus velezensis strain)的系統(tǒng)發(fā)育關系最近,C46與Bacillus licheniformis strain的相似性達99%,C68與Bacillus paralicheniformis strain的系親緣性最近,G-6B與Bacillus sp的進化樹節(jié)點支持率達99%;菌株C37屬于Bacterium,與Bacterium strain的親緣性達99%。綜上,產果膠酶原核微生物主要為芽孢桿菌屬,鑒定的送檢菌株與模式菌株親緣關系較近。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]脈沖強光誘變對黑曲霉產果膠酶活力的影響[J]. 張佰清,葛新宇,馬鳳鳴,馬藝超,張士豪,謝加豪. 農業(yè)工程學報. 2020(03)
[2]木聚糖酶對全麥面團特性的影響研究[J]. 王佳玉,陳鳳蓮,湯曉智. 中國糧油學報. 2019(09)
[3]基于CRISPR/Cas9加工番茄α-Man突變體的構建[J]. 張圓圓,邵冬南,崔百明. 生物技術通報. 2019(06)
[4]嗜熱擬青霉糖化酶的性質及其在黃酒釀造中的應用[J]. 劉雙平,謝雅茜,江正強,閆巧娟,毛健. 釀酒科技. 2019(06)
[5]纖維素酶結合堿性蛋白酶提高冷榨大豆出油率的工藝優(yōu)化[J]. 朱秀清,曾劍華,房媛媛,石彥國. 中國油脂. 2019(05)
[6]山西老陳醋高產糖化酶霉菌的篩選、鑒定及產酶條件優(yōu)化[J]. 王佳麗,朗繁繁,陳旭峰,王如福,許女. 中國釀造. 2019(04)
[7]一株糖化真菌T6的分離篩選[J]. 曹文悅,李靈靈,高亞梅,晏磊,王偉東. 黑龍江八一農墾大學學報. 2019(02)
[8]多糧濃香型白酒中特征酵母菌與耐酸乳桿菌的關系[J]. 張霞,鄭佳,趙東,喬宗偉,安明哲,楊康卓,羅青春. 微生物學通報. 2019(07)
[9]高產纖維素酶突變株的篩選及其產酶條件優(yōu)化[J]. 鄒宗勝,王婧雅,趙運英,毛銀,鄧禹. 食品科學. 2019(06)
[10]木聚糖酶和甘露聚糖酶在畢赤酵母中的共表達及產酶分析[J]. 姚銀,閔琪,熊海容,張莉. 中國生物工程雜志. 2019(03)
碩士論文
[1]高產糖化酶的誘變育種及其基因克隆和表達[D]. 周曉紅.中南林業(yè)科技大學 2019
本文編號：2899684
【文章來源】：西華大學四川省
【文章頁數】：73 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
大曲制作流程
篩選和分離實驗工藝流程如圖2.1所示。根據圖2.1流程,準確稱取適量粉碎的大曲,倒入帶玻璃珠的無菌水中浸泡振蕩。靜置5min待澄清后取適量的上清液進行梯度稀釋[24],然后吸取適當的稀釋液進行涂布平板,培養(yǎng)完成后,挑取顯色的代表菌落進行純化和保藏,并記錄菌落形態(tài)特征。
菌株經過16S r DNA基因擴增后,挑選代表性菌株的送檢結果,進行序列同源性比對,下載序列同源性最高的進行分析。為了進一步考察產果膠酶原核菌株的種屬親緣關系情況,實驗應用MEGA軟件構建系統(tǒng)進化樹,結果如圖2.2所示。圖2.2中分析可以得到,產果膠酶原核微生物隸屬于2個屬,分別為Bacillus和Bacterium。菌株G-2B、G-3B、G-4B、G-6B、C46、C68都隸屬于Bacillus,其中G-2B與Bacillus subtilis strain相似性最高,G-3B和G-4B與同一個模式菌株(Bacillus velezensis strain)的系統(tǒng)發(fā)育關系最近,C46與Bacillus licheniformis strain的相似性達99%,C68與Bacillus paralicheniformis strain的系親緣性最近,G-6B與Bacillus sp的進化樹節(jié)點支持率達99%;菌株C37屬于Bacterium,與Bacterium strain的親緣性達99%。綜上,產果膠酶原核微生物主要為芽孢桿菌屬,鑒定的送檢菌株與模式菌株親緣關系較近。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]脈沖強光誘變對黑曲霉產果膠酶活力的影響[J]. 張佰清,葛新宇,馬鳳鳴,馬藝超,張士豪,謝加豪. 農業(yè)工程學報. 2020(03)
[2]木聚糖酶對全麥面團特性的影響研究[J]. 王佳玉,陳鳳蓮,湯曉智. 中國糧油學報. 2019(09)
[3]基于CRISPR/Cas9加工番茄α-Man突變體的構建[J]. 張圓圓,邵冬南,崔百明. 生物技術通報. 2019(06)
[4]嗜熱擬青霉糖化酶的性質及其在黃酒釀造中的應用[J]. 劉雙平,謝雅茜,江正強,閆巧娟,毛健. 釀酒科技. 2019(06)
[5]纖維素酶結合堿性蛋白酶提高冷榨大豆出油率的工藝優(yōu)化[J]. 朱秀清,曾劍華,房媛媛,石彥國. 中國油脂. 2019(05)
[6]山西老陳醋高產糖化酶霉菌的篩選、鑒定及產酶條件優(yōu)化[J]. 王佳麗,朗繁繁,陳旭峰,王如福,許女. 中國釀造. 2019(04)
[7]一株糖化真菌T6的分離篩選[J]. 曹文悅,李靈靈,高亞梅,晏磊,王偉東. 黑龍江八一農墾大學學報. 2019(02)
[8]多糧濃香型白酒中特征酵母菌與耐酸乳桿菌的關系[J]. 張霞,鄭佳,趙東,喬宗偉,安明哲,楊康卓,羅青春. 微生物學通報. 2019(07)
[9]高產纖維素酶突變株的篩選及其產酶條件優(yōu)化[J]. 鄒宗勝,王婧雅,趙運英,毛銀,鄧禹. 食品科學. 2019(06)
[10]木聚糖酶和甘露聚糖酶在畢赤酵母中的共表達及產酶分析[J]. 姚銀,閔琪,熊海容,張莉. 中國生物工程雜志. 2019(03)
碩士論文
[1]高產糖化酶的誘變育種及其基因克隆和表達[D]. 周曉紅.中南林業(yè)科技大學 2019
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