發(fā)布時間：2024-06-27 23:10

　　目的:本研究旨在確定miR-152-3p是否在甲狀腺乳頭狀癌細胞(papillary thyroid carcinoma,PTC)的生長中起到關鍵作用,并探討其靶向關系。方法:miR-152-3p的表達水平由實時熒光定量聚合酶鏈反應(Realtime-PCR)的方法進行檢測,研究對象是20對PTC組織和癌旁甲狀腺組織。轉(zhuǎn)染miR-152-3p模擬物(mimics)和miR-152-3p抑制物(inhibitor)至PTC細胞株(KTC-1)中,設置陰性對照組(Negative control),PCR檢測miR-152-3p各分組的轉(zhuǎn)染效率。通過細胞計數(shù)試劑盒CCK-8法,能夠檢測出PTC細胞株的增殖能力,細胞遷移能力則應用細胞劃痕實驗中劃痕寬度的比值來反映,采用Transwell小室法對各組PTC細胞的侵襲能力進行實驗。經(jīng)靶向預測篩得TGFA(Transforming growth factor-α)為miR-152-3p靶點,雙熒光素酶報告基因檢測TGFA與mi R-152-3p是否互補結(jié)合,行免疫印跡實驗(Western blot)和PCR(Polymerase Chain Re...

【文章頁數(shù)】：52 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1.前言
2.材料與方法
    2.1 材料
        2.1.1 樣本的收集
        2.1.2 試劑及其配置
        2.1.3 主要儀器
    2.2 方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)及轉(zhuǎn)染
        2.2.2 實時聚合酶鏈式反應(Realtime-PCR)
        2.2.3 細胞增殖能力檢測
        2.2.4 細胞劃痕實驗
        2.2.5 細胞侵襲實驗
        2.2.6 免疫印跡實驗(Western blot)
        2.2.7 雙熒光素酶報告基因檢測
        2.2.8 統(tǒng)計學分析
3.結(jié)果
    3.1 組織中mi R-152-3p和 TGFA的表達
    3.2 細胞轉(zhuǎn)染效率的檢測
    3.3 mi R-152-3p對 KTC-1 細胞增殖的影響
    3.4 mi R-152-3p對 KTC-1 細胞遷移的影響
    3.5 mi R-152-3p對 KTC-1 細胞侵襲的影響
    3.6 TGFA作為mi R-152-3p靶點的分析
    3.7 TGFA對 PTC細胞增殖和侵襲的影響
4.討論
5.結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
附錄一
附錄二
致謝



本文編號：3996077