發(fā)布時間：2024-07-06 02:52

　　目的:本實驗用大鼠原代心肌細胞建立心肌細胞缺氧/復氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)損傷模型,探討大株紅景天注射液對線粒體功能及線粒體動力學相關蛋白表達的影響,明確其抗心肌細胞H/R損傷的作用及其可能的機制。方法:分離并培養(yǎng)新生SD大鼠原代心肌細胞,選取生長狀態(tài)良好的心肌細胞,隨機分為五組:①空白對照組;②缺氧/復氧組(H/R組);③后干預組(H/R組+大株紅景天注射液);④前干預組(大株紅景天注射液+H/R組);⑤前后干預組(大株紅景天注射液+H/R組+大株紅景天注射液)。采用四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT法)測定大株紅景天注射液對心肌細胞活力的影響,確定最佳給藥濃度;用多功能酶標儀測定反映線粒體功能的指標變化,包括細胞內活性氧(ROS)含量、三磷酸腺苷(ATP)水平、線粒體膜電位(MMP);免疫印跡法(Westernblotting)測定線粒體動力學相關蛋白OPA1、Drp1以及p-Drp1的表達水平。結果:1.大株紅景天對H/R損傷的原代心肌細胞ATP、ROS含量的影響與空白對照組相比,H/R組心肌細胞內ATP含量明顯降低、ROS含量明顯升高,差異有統(tǒng)計學意義...

【文章頁數】：41 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１線粒體動力學及線粒體自瞻個片來源于［４０］）??２．３．２線粒體分裂的調節(jié)??在哺季Ｌ類動物細胞內，調控線粒體分裂的蛋白主要有動力相關蛋白ｌ（ｄｙｎａｍｉｎ－ｒｅｌａｔｅｄ??

由相同的兩種Ｍｆｎ蛋白（Ｍｆｎｌ和Ｍｆｎ２）形成異二聚體，依賴Ｈ憐酸鳥昔酶（ｇｕａｎｏｓｉｎｅ??ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔａｓｅ，?ＧＴＰａｓｅ）介導融合線粒體外膜；第；步，由線粒體內膜融合蛋白一視神經萎??縮蛋白ｌ（ｏｐｔｉｃａｔｒｏｐｈｙｌ，?０ＰＡ１）介導的依賴ＧＴＰａｓｅ的....

圖２－２大株紅景天對Ｈ／Ｒ損傷的原代也肌細胞肉ＡＴＰ含量的比較??（注：與空白對照紀比較，＊Ｐ＜〇．胎；與缺氧／復氧組比乾排＜〇．〇５！與前后干預組比較，ＡＰ＾ＯＳ）??

預組及前后干預組，細胞肉ＤＣＦ英光強度減弱，即ＲＯＳ生成減少，差異有統(tǒng)計學意義??（Ｐ＜０．０５）；前后干預組較單一前干預組、后干預組ＲＯＳ生成減少，差異有統(tǒng)計學意文??（戶＜０．０５）；前干預組與后干預組ＲＯＳ含量無明顯差異。（表２－３，圖２－３）??表２－３大株紀景天對Ｈ／Ｒ....

圖２－４大株紅景天對Ｈ／Ｒ的原代也肌細胞ＭＭＰ的影響??（注：與空白對照組比，叩＜０．０５；與缺氧／復氧組比乾紐＜０．胎；與前后干預組比較，▲Ｐ＾ＯＳ）??

差異有統(tǒng)計學意文（ＰＯ．０５）；前后干預組較單一前干預組、后干預組，紅綠焚光比值明??顯升高，說明ＭＭＰ升高，差異有統(tǒng)計學意義（ｆ＜０．０５）；前干預組與后干預組比較ＭＭＰ??無明顯變化。（表２－４，圖２－４）??表２－４大株紅景天注射液對Ｈ／Ｒ損傷的原代也膽細胞ＭＭＰ的影響（支....

圖２－６大株紅景天對Ｈ／Ｒ損傷的原代也肌細胞中０巧１、ｐ－Ｄｈ）１蛋白表達的影響??（注：與空白對照組比，＊Ｐ＜〇．胎；與缺氧／復氧組比較，排＜０．胎；與前后干預組比較，▲？＜〇．胎）??４．討論??

Ｈ?Ｍｉｌ??空白對暖沮巧氧／！氧祖后干柿組?前干巧坦前后干巧組??圖２－４大株紅景天對Ｈ／Ｒ的原代也肌細胞ＭＭＰ的影響??（注：與空白對照組比，叩＜０．０５；與缺氧／復氧組比乾紐＜０．胎；與前后干預組比較，▲Ｐ＾ＯＳ）??３．?４大株紅景天對Ｈ／Ｒ損傷的原代心肌細胞中０ＰＡ１蛋....

本文編號：4001946