發(fā)布時間：2021-01-08 07:53

　　禾谷鐮刀菌中,由于子囊孢子是初侵染源,有性生殖在侵染循環(huán)中起著至關(guān)重要的作用。作為同宗配合絲狀真菌,禾谷鐮刀菌基因組同時含有MAT1-1和MAT1-2位點(diǎn)。為了更好地研究它們的功能以及如何調(diào)節(jié)有性生殖和致病力,在本文中我們分析了交配型位點(diǎn)基因的表達(dá)、互作以及每個基因的缺失突變體表型。盡管MAT1-1-1和MAT1-2-1基因的表達(dá)量在子囊殼誘導(dǎo)生長后立即迅速上升并在誘導(dǎo)一天后開始下降,但是MAT1-1-2和MAT1-1-3基因的表達(dá)在第四天達(dá)到最高。MAT1-1-2和MAT1-1-3的表達(dá)譜極其相似而且很有可能共用同一個雙向的啟動子。盡管所有的MAT位點(diǎn)基因?qū)ψ幽覛ば纬啥疾皇潜匦璧?但在自交時子囊孢子的生成需要MAT位點(diǎn)基因。在雜交實(shí)驗(yàn)中,mat1-1-2和mat1-1-3突變體具有可育性,但是mat1-2-1和mat1-1-1突變體分別具有雄性和雌性可育缺陷。mat1-2-1突變體降低了Fg SO基因的表達(dá)和菌絲融合現(xiàn)象。Mat1-1-2蛋白和其它所有的MAT位點(diǎn)轉(zhuǎn)錄因子都相互作用,說明它們可能在有性生殖時期形成一個蛋白復(fù)合體。Mat1-1-1和Fg Mcm1相互作用,可能在細(xì)胞識別... 

【文章來源】：西北農(nóng)林科技大學(xué)陜西省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 禾谷鐮刀菌
        1.1.1 禾谷鐮刀菌生物學(xué)特征
        1.1.2 禾谷鐮刀菌侵染循環(huán)
        1.1.3 禾谷鐮刀菌的毒素
        1.1.4 禾谷鐮刀菌致病基因及侵染小麥過程研究
        1.1.5 禾谷鐮刀菌DON生物合成的分子路徑
        1.1.6 禾谷鐮刀菌基因組及交配型位點(diǎn)研究進(jìn)展
    1.2 真菌有性生殖過程
    1.3 交配型位點(diǎn)
        1.3.1 交配型位點(diǎn)基因
        1.3.2 交配型位點(diǎn)的作用
    1.4 絲狀真菌的菌絲融合
        1.4.1 細(xì)胞融合現(xiàn)象
        1.4.2 融合相關(guān)蛋白
    1.5 信息素和信息素受體基因
    1.6 關(guān)于MCM1 蛋白
    1.7 本研究的內(nèi)容和意義
第二章 交配型位點(diǎn)基因缺失突變體的基本表型分析
    2.1 材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)所用菌株
        2.1.2 試劑及培養(yǎng)基
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.4 實(shí)驗(yàn)培養(yǎng)條件
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 生物信息學(xué)分析
        2.2.2 敲除突變體的獲得
        2.2.3 有性生殖實(shí)驗(yàn)
        2.2.4 半薄切片樣品處理實(shí)驗(yàn)
        2.2.5 構(gòu)建重組質(zhì)粒實(shí)驗(yàn)
        2.2.6 植物侵染實(shí)驗(yàn)
        2.2.7 定量分析實(shí)驗(yàn)
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 生物信息分析結(jié)果
        2.3.2 交配型位點(diǎn)基因在禾谷鐮刀菌中的表達(dá)
        2.3.3 交配型位點(diǎn)基因的缺失導(dǎo)致有性生殖功能缺陷
        2.3.4 小麥穗部侵染
        2.3.5 玉米桿侵染
    2.4 討論
第三章 MAT位點(diǎn)基因在有性生殖時期的不同作用
    3.1 材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)所用菌株
        3.1.2 試劑及培養(yǎng)基
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 酵母雙雜實(shí)驗(yàn)
        3.2.2 雙分子熒光互補(bǔ)（BiFC）實(shí)驗(yàn)
        3.2.3 雜交實(shí)驗(yàn)
        3.2.4 定量分析實(shí)驗(yàn)
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 MAT1-1-2 和其他位點(diǎn)基因的互作
        3.3.2 Mat1-1-1 和Mcm1 互作
        3.3.3 MAT-1-11 和MAT1-2-1 在雜交中起著不同的作用
        3.3.4 單個MAT基因的缺失影響其它MAT位點(diǎn)基因的表達(dá)
    3.4 討論
第四章 MAT位點(diǎn)基因缺失對菌絲融合和信息素表達(dá)的影響
    4.1 材料
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)所用菌株
        4.1.2 試劑及培養(yǎng)基
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)儀器
    4.2 實(shí)驗(yàn)方法
        4.2.1 雜交實(shí)驗(yàn)
        4.2.2 DAPI和Calcofluor染色實(shí)驗(yàn)
        4.2.3 定量分析實(shí)驗(yàn)
    4.3 結(jié)果
        4.3.1 SO基因和菌絲融合對有性生殖不可或缺
        4.3.2 信息素和信息素受體基因在MAT突變體中表達(dá)上升
    4.4 討論
第五章 結(jié)論和展望
參考文獻(xiàn)
附錄
英文縮寫表
致謝
作者簡介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]禾谷鐮刀菌基因組學(xué)研究進(jìn)展[J]. 張大軍,邱德文,蔣伶活.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(17)
[2]禾谷鐮刀菌在小麥穗部侵染過程的細(xì)胞學(xué)研究[J]. 康振生,黃麗麗,H.BUCHENAUER,韓青梅,蔣選利.  植物病理學(xué)報. 2004(04)



本文編號：2964222