本文關(guān)鍵詞：養(yǎng)肺通絡(luò)法干預(yù)Notch信號通路防治肺纖維化的機制研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

《重慶醫(yī)科大學(xué)》 2015年

氯胺酮干擾非洲爪蟾早期胚胎分子機制的研究

陳春江  

【摘要】：目的：氯胺酮俗稱K粉,是非特異性N-甲基-天門冬氨酸(NMDA)受體拮抗劑,臨床常用于手術(shù)麻醉,是國際上流行的一類新型毒品。關(guān)于氯胺酮濫用對早期胚胎發(fā)育的影響開展了大量的研究。目前認(rèn)為氯胺酮的主要藥理作用是通過對NMDA受體的拮抗實現(xiàn)的,NMDA受體是一類對Ca2+高度通透的配體門控離子通道,在神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育、神經(jīng)元存活和突觸可塑性上發(fā)揮著重要的作用。然而對于氯胺酮濫用影響早期胚胎發(fā)育所引起的出生缺陷目前尚缺乏有效的干預(yù)手段,很大部分原因是因為我們目前還不完全了解氯胺酮對早期胚胎發(fā)育的影響以及其作用的分子機制。因此研究氯胺酮暴露對胚胎早期發(fā)育影響的分子機制對于我們了解該類藥物的藥理毒性作用、評估該類藥物在手術(shù)麻醉中的潛在風(fēng)險、預(yù)防和干預(yù)該類藥物濫用導(dǎo)致的出生缺陷具有很強的現(xiàn)實意義和科學(xué)價值。材料和方法：胚胎原位雜交,胚胎顯微注射,RT-PCR,雙重?zé)晒馑孛笀蟾娣治?分子克隆技術(shù)構(gòu)建質(zhì)粒,細(xì)胞培養(yǎng)與轉(zhuǎn)染,電泳遷移率分析結(jié)果：1.氯胺酮暴露導(dǎo)致胚胎發(fā)生色素細(xì)胞減少或消失、腸道粗大、無神經(jīng),眼睛發(fā)育異常、顱面軟骨縮小或消失等一系列的發(fā)育缺陷；2.氯胺酮可以抑制Zic5在神經(jīng)嵴區(qū)域的表達；3.氯胺酮使得Notch信號通路下游靶基因的表達量下降；4. Notch信號通路的核內(nèi)部分NICD能夠明顯增強爪蛙zic5基因的表達；5.成功構(gòu)建爪蛙Zic5基因啟動子驅(qū)動重組熒光素酶報告基因質(zhì)粒共10個,并通過雙重?zé)晒馑孛笀蟾娣治鲲@示NICD對爪蛙Zic5基因-186/-29啟動子轉(zhuǎn)錄活性的增強作用明顯低于-200/-29啟動子轉(zhuǎn)錄活性,初步估計NICD結(jié)合Zic5基因啟動子的區(qū)域在-186到-2006.電泳遷移率分析發(fā)現(xiàn)爪蛙Zic5-200/-186探針能與轉(zhuǎn)染了 NICD的SY5Y細(xì)胞總蛋白結(jié)合。結(jié)論：1氯胺酮通過干擾胚胎神經(jīng)嵴發(fā)育引起一系列的發(fā)育缺陷2.Zic5是氯胺酮干擾早期胚胎神經(jīng)嵴誘導(dǎo)的分子靶點3. NICD能上調(diào)Zic5基因的表達,顯著增強爪蛙zic5啟動子活性并且其識別位點為啟動子-200/-1864.Notch信號通路在氯胺酮干擾神經(jīng)嵴誘導(dǎo)中發(fā)揮這關(guān)鍵作用

【關(guān)鍵詞】：
【學(xué)位授予單位】：重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R96
【目錄】：

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