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基于定量蛋白質(zhì)組學(xué)探究β1腎上腺素能受體自身抗體表達(dá)增強(qiáng)誘發(fā)心房顫動的作用機(jī)制

發(fā)布時間:2024-06-25 19:24
  目的:構(gòu)建β1腎上腺素能受體自身抗體(β1ARAb)表達(dá)增強(qiáng)的主動免疫兔模型,研究β1ARAb表達(dá)增強(qiáng)對心房電生理特性及心房顫動(房顫)誘發(fā)率的影響。使用TMT定量蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)篩選造模完成后的免疫組和對照組兔左心房組織之間表達(dá)水平差異有統(tǒng)計學(xué)意義的蛋白質(zhì),進(jìn)行后續(xù)蛋白質(zhì)功能注釋、生物學(xué)分析、蛋白相互作用網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建,探討β1ARAb表達(dá)增強(qiáng)誘發(fā)房顫的可能作用機(jī)制,并進(jìn)一步在動物模型、房顫患者中進(jìn)行驗證。方法:1)設(shè)計并合成β1腎上腺素能受體(β1AR)的細(xì)胞外第二環(huán)功能表位肽段(ECL2)。將16只成年雄性新西蘭大白兔隨機(jī)分為對照組和與免疫組,免疫組給予人工合成的β1AR的ECL2混合弗氏佐劑注射,構(gòu)建β1ARAb過表達(dá)的主動免疫兔模型,對照組不給予β1AR的ECL2注射。每兩周通過ELISA測定兩組實驗兔的血清β1ARAb表達(dá)水平、通過ELISA方法比較造模前后兩組實驗兔血清cAMP表達(dá)水平變化、通過蛋白質(zhì)印跡方法(Western blot)測定兩組實驗兔左心房β1AR蛋白表達(dá)水平。造模結(jié)束后對所有實驗兔進(jìn)行心房電生理檢查,包括測量靜息心率、記錄5分鐘內(nèi)自發(fā)性心律失常情況;測量心房有效...

【文章頁數(shù)】:137 頁

【學(xué)位級別】:博士

【文章目錄】:
摘要 ABSTRACT 前言 第一部分 β1腎上腺素能受體自身抗體表達(dá)增強(qiáng)的主動免疫兔模型構(gòu)建及其對心房電生理特性及房性心律失常的影響
1 研究方法與內(nèi)容
    1.1 實驗動物、分組
    1.2 實驗所需儀器設(shè)備
    1.3 動物模型建立方法
    1.4 主動免疫兔模型的驗證
    1.5 心房電生理檢查及房性心律失常的誘發(fā)與記錄
    1.6 統(tǒng)計學(xué)處理及分析
2 結(jié)果
3 討論
4 小結(jié) 第二部分 基于TMT技術(shù)的β1腎上腺素能受體自身抗體表達(dá)增強(qiáng)主動免疫兔模型的心房差異表達(dá)蛋白質(zhì)篩選及生物信息學(xué)分析
1 研究方法與內(nèi)容
    1.1 實驗標(biāo)本及研究流程
    1.2 實驗所需儀器設(shè)備
    1.3 蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)鑒定差異表達(dá)蛋白質(zhì)
    1.4 生物信息學(xué)分析
2 結(jié)果
3 討論
4 小結(jié) 第三部分 β1腎上腺素能受體自身抗體表達(dá)增強(qiáng)通過促進(jìn)心房纖維化誘發(fā)心房顫動的驗證研究(一)—β1腎上腺素能受體自身抗體表達(dá)增強(qiáng)對免疫兔模型心房結(jié)構(gòu)重構(gòu)的作用
1 研究方法與內(nèi)容
    1.1 實驗動物與造模方法
    1.2 實驗所需儀器設(shè)備
    1.3 心臟超聲檢查
    1.4 組織學(xué)病理染色檢測
    1.5 透射電鏡檢查
    1.6 左心房纖維化相關(guān)蛋白的蛋白表達(dá)水平檢測
    1.7 左心房纖維化相關(guān)蛋白的m RNA表達(dá)水平檢測
    1.8 統(tǒng)計學(xué)分析
2 結(jié)果
3 討論
4 小結(jié) 第四部分 β1腎上腺素能受體自身抗體表達(dá)增強(qiáng)通過促進(jìn)心房纖維化誘發(fā)心房顫動的驗證研究(二)—陣發(fā)性心房顫動患者血清β1腎上腺素能受體自身抗體水平與心房纖維化水平的相關(guān)性分析
1 研究對象與方法
    1.1 倫理委員會批準(zhǔn)、知情同意
    1.2 研究對象及分組
    1.3 臨床資料獲取
    1.4 統(tǒng)計學(xué)方法
2 結(jié)果
3 討論
4 小結(jié) 結(jié)論 致謝 參考文獻(xiàn) 綜述
參考文獻(xiàn) 攻讀博士學(xué)位期間獲得的學(xué)術(shù)成果 個人簡歷 導(dǎo)師評閱表



本文編號:3995789

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