發(fā)布時(shí)間：2024-07-01 20:23

　　癌癥是一種危害全世界人民身體健康的疾病,僅2018年新發(fā)病例達(dá)1,810萬,死亡病例960萬。由于其發(fā)現(xiàn)難、診斷難、易轉(zhuǎn)移等特點(diǎn),導(dǎo)致目前癌癥的徹底性治療研究依然很艱巨。因此,本文主要是基于微流控技術(shù)構(gòu)建了惡性腫瘤無創(chuàng)診斷的三種方法并進(jìn)行了臨床應(yīng)用測試。與此同時(shí),研發(fā)了基于“腫瘤芯片”的免疫治療途徑,初步探討了應(yīng)用自然殺傷細(xì)胞(NK)分泌的外泌體來進(jìn)行的腫瘤抑制效果研究,以期為臨床上腫瘤篩查、治療提供新的思路。首先,我們研發(fā)了集成的微流控芯片,可在芯片上進(jìn)行尿液脫落腫瘤細(xì)胞分離、富集及芯片-ELISA定量檢測,從而量化膀胱癌患者尿液樣本中的脫落腫瘤細(xì)胞數(shù)量。該芯片的檢測的原理,主要是基于尺寸排阻,即通過一個(gè)尺寸為在5μm的聚碳酸酯膜的微流控芯片來分離、富集尿液樣本里的脫落腫瘤細(xì)胞。同時(shí)針對(duì)所分離到的細(xì)胞進(jìn)行了掃描電鏡、熒光染色及突變點(diǎn)測序分析以驗(yàn)證其為脫落腫瘤細(xì)胞,并利用直接ELISA方法在芯片上原位定量檢測分析脫落腫瘤細(xì)胞的數(shù)量。檢測結(jié)果顯示:與健康的供試者相比,膀胱癌患者尿液樣本里的脫落腫瘤細(xì)胞數(shù)量顯著性的提高。受試者工作特征曲線(ROC)分析顯示,利用該芯片初篩膀胱癌的方法具有很...

【文章頁數(shù)】：141 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖1.12015年世界范圍內(nèi)因癌癥在70歲以前就死亡的國家分布圖l21eFig.1.1Globa

１．癌癥流行性統(tǒng)計(jì)??癌癥，是最為常見的惡性腫瘤，病因非常復(fù)雜，診斷難、治療難。據(jù)調(diào)查統(tǒng)計(jì)，??癌癥將成為２１世紀(jì)危害世界各國人類健康的主要原因，也將成為影響人類壽命的最??主要的障礙【１］。尤其是在世衛(wèi)組織（Ｗｏｒｌｄ?Ｈｅａｌｔｈ?Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ，?ＷＨＯ）于２０１....

圖１．２外泌體在惡性腫瘤中的撿測方法??Ｆｉｇ．?１．２?Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｃａｎｃｅｒ?ｕｓｉｎｇ?ｏｆ?ｍａｌｉｇｎａｎｔ?ｔｕｍｏｒ－ｄｅｒｉｖｅｄ?ｅｘｏｓｏｍｅｓ．??

第一章癌癥篩査、診斷及主要免疫防治技術(shù)研宂進(jìn)展??來源的外泌體可作為腫瘤篩查的有效標(biāo)志物，其檢測途徑一般可通過對(duì)外泌體進(jìn)行分??離，再針對(duì)特異性ｍａｒｋｅｒ來分析，具體可見圖１．２。??Ｄｉｒｅｃｔ?Ｑｗｉｎｔｉｆｉｃ＾ｔｉｏｉｉ??＾?＞ｉ?？?Ｓｉｎｇｌｅ?Ｃｅｌｌ?Ｄｒｏｐ....

圖２．１尿液腫瘤脫落細(xì)胞撿測芯片示意圖??．．

直徑為２?ｃｍ的聚碳酸酯膜，膜孔徑為５?ｐｍ；第四層（底板）ＰＭＭＡ板中間不切割。??每一層ＰＭＭＡ板邊緣均切割有孔徑為２?ｍｍ的圓孔，每一層ＰＭＭＡ板最后通過８個(gè)??螺絲穿過圓孔進(jìn)行固定，完成組裝（詳見圖２．１和２．２）。??圖２．１尿液腫瘤脫落細(xì)胞撿測芯片示意圖??Ｆｉｇ．?....

圖2.3.利用集成的過濾芯片來分離、富集及定量檢測尿液脫落腫瘤細(xì)胞工作原理

Ｆｉｇ?２．３．?Ｔｈｅ?ｐｒｉｎｃｉｐｌｅ?ｏｆ?ｉｓｏｌａｔｉｏｎ，?ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ?ａｎｄ?ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｕｒｉｎａｒｙ?ｅｘｆｏｌｉａｔｅｄ?ｔｕｍｏｒ??ｃｅｌｌｓ?（ＥＴＣｓ）?ｕｓｉｎｇ?ａｎ?ｉｎｔｅｇｒａｔｅｄ?ｍｉｃｒｏｆｉｌｔｒａｔｉｏｎ?....

本文編號(hào)：3999136