發(fā)布時(shí)間：2017-12-20 15:30

  本文關(guān)鍵詞：黃瓜褐斑病菌（Corynespora cassiicola）生物學(xué)特性、遺傳多樣性及防治基礎(chǔ)研究　出處：《沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)》2017年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：黃瓜褐斑病(Cucumber brown spot)是當(dāng)前黃瓜生產(chǎn)中呈嚴(yán)重發(fā)生態(tài)勢的重要病害,對黃瓜的產(chǎn)量和品質(zhì)構(gòu)成顯著的威脅。黃瓜褐斑病由多主棒孢霉[Corynesporacassiicola(BerkKert)Wei]侵染所致。本文對集中采自遼(遼寧)、冀(河北)、魯(山東)三省的黃瓜褐斑病菌就培養(yǎng)性狀、致病力分化、遺傳多樣性以及對殺菌劑的敏感性等方面進(jìn)行了系統(tǒng)性研究。取得的研究結(jié)果如下:1.系統(tǒng)研究了黃瓜褐斑病菌的培養(yǎng)性狀。從遼、冀、魯三省地源廣泛的4 3個(gè)市(區(qū))采集的黃瓜褐斑病葉標(biāo)本中分離得到百余個(gè)純菌株,經(jīng)形態(tài)學(xué)觀測和分子生物學(xué)鑒定獲得106個(gè)多主棒孢菌(C.cassiicola)。培養(yǎng)性狀試驗(yàn)表明,在統(tǒng)一培養(yǎng)條件下(于PDA、28℃、無光照條件)供測106個(gè)菌株的菌絲生長速率分為快、中、慢3種類型,菌株數(shù)依次為65株(占61.32%)、37株(占34.91%)和4株(占3.77%);氣生菌絲類型分為密集型和幾無菌絲型,菌株數(shù)分別為88株(占83.02%)和18株(占16.98%);菌落顏色表現(xiàn)深墨綠、深褐、灰、淺灰和白色等多樣顏色,以灰色和淺灰色為多;菌株色素分泌情況包括無色素分泌(菌株65株,占61.32%)和分泌土黃色、微紅色和酒紅色色素等性狀;產(chǎn)孢能力試驗(yàn)表明,供試106個(gè)菌株產(chǎn)孢能力均較強(qiáng),在單位平方厘米的菌落面積上平均的產(chǎn)孢量至少處于(2.45±0.20)×105個(gè)孢子的數(shù)量范圍,且產(chǎn)孢能力與菌株氣生菌絲類型較為相關(guān)。2.選擇培養(yǎng)性狀存在較大差異同時(shí)來自不同地區(qū)的4株代表性黃瓜褐斑病菌LJP-2,SJN-3,SQD-1和HHJ-1進(jìn)行了培養(yǎng)條件研究。在培養(yǎng)基偏好性方面,菌株SJN-3、SQD-1和HHJ-1的最適培養(yǎng)基為PDA,而菌株LJP-2在PSA培養(yǎng)基上生長態(tài)勢最好。28℃是4株菌的最適生長溫度,各菌株在較低、較高溫度下生長相對緩慢,35℃時(shí)供試菌株菌落會(huì)透明化或菌落顏色完全變白以及影響色素分泌。完全光照能促進(jìn)菌株LJP-2、SJN-3和SQD-1的菌落擴(kuò)展和菌絲生長,菌株HHJ-1在完全黑暗條件下生長最快且長勢最好,光照則抑制其生長。菌株LJP-2最適碳源為乳糖,最不適碳源為麥芽糖;菌株SJN-3最適碳源為甘露醇,最不適碳源為淀粉;菌株SQD-1和HHJ-1最適碳源為甘露醇,最不適碳源為麥芽糖。在氮源方面,蛋白胨和酵母浸粉有利于4株菌的快速生長,且長勢良好,而在(NH4)2SO4培養(yǎng)基上4株菌都表現(xiàn)為最不適宜生長。3.利用通用性較好、抗感性差異明顯且穩(wěn)定的4個(gè)黃瓜鑒別寄主津優(yōu)38號(高抗)、新連研4號(中抗)、德瑞特10號(中感)和山東密刺(高感)對采自遼、冀、魯三省的106株黃瓜褐斑病菌進(jìn)行了致病力分化研究,并劃分出3種致病力類型。4個(gè)黃瓜鑒別品種是通過苗期人工接種從7個(gè)黃瓜品種中篩選而出。致病力測定研究表明,供試106個(gè)菌株可分為3種致病類型,即強(qiáng)致病力類型(29株,占27.36%)、中等致病力類型(70株,占66.04%)和弱致病力類型(7株,6.60%),其中,來自遼寧的菌株均屬強(qiáng)或中等致病力類型,而來自河北和山東的菌株都有強(qiáng)、中、弱致病力類型的劃分,但來自河北的菌株大多數(shù)為中等和或弱致病力類型,來自山東的菌株幾乎皆為強(qiáng)或中等致病力類型。4.通過進(jìn)行基于ITS序列測定和ISSR分子標(biāo)記聚類分析,對92個(gè)代表性的黃瓜褐斑病菌株進(jìn)行了遺傳多樣性研究。結(jié)果表明:所有菌株與模式菌株Corynespora cassiicola(KP211426)ITS序列同源性高達(dá)98%以上,且完全聚在一類。經(jīng)1SSR分子標(biāo)記方法分析了 92個(gè)菌株間遺傳差異,結(jié)果顯示,6條ISSR引物擴(kuò)增出74個(gè)重復(fù)性條帶,條帶多態(tài)性頻率為90.54%,92個(gè)黃瓜褐斑病菌株間的相似性系數(shù)范圍在0.76～0.97之間,由此反應(yīng)出菌株間有一定的遺傳差異存在。在相似性系數(shù)為0.82的位置,供試的92株黃瓜褐斑病菌可劃分成4個(gè)類群(ISSR Groups,1G)。通過分析得知,IG類群所反映的遺傳多態(tài)性與菌株地理來源無明顯相關(guān)性,而與致病型存在一定相關(guān)性,歸屬為IGⅠ類群的菌株為強(qiáng)致病型和中等致病型,IGⅢ類群菌株包含有強(qiáng)、中、弱三種致病型,但仍然以強(qiáng)和中等致病型菌株占大多數(shù),而歸屬在IGⅣV類群的菌株多為中等致病型和弱致病型。5.利用3種殺菌劑測定了對30株在地理來源、培養(yǎng)性狀、致病類型及遺傳類群等方面均有代表性的黃瓜褐斑病菌的室內(nèi)藥劑毒力及對黃瓜褐斑病的田間防效。結(jié)果表明:30個(gè)菌株之間對每種藥劑的敏感性均存在差異,供試菌株整體上對80%福·福鋅敏感程度最高,30個(gè)菌株的EC50值的范圍在0.017～0.309μg/mL之間,平均EC50值為0.073μg/mL對250g/L吡唑醚菌酯敏感程度較高,EC50值介于0.022～0.759μg/mL之間,均值為0.262μg/mL,而對2%春雷霉素敏感程度相比前兩種藥劑偏低,但菌株間敏感性差異幅度非常大,表現(xiàn)為敏感性差異最為顯著,EC50值介于1.167～181.948μg/mL之間,其均值為26.523μg/mL。菌株地理來源與其對藥劑的敏感程度之間并不明顯相關(guān)。另外發(fā)現(xiàn),菌株的生長速率類型和菌絲類型與其對藥劑敏感性之間較為相關(guān),而菌株的致病型及遺傳類群與其對藥劑敏感性相關(guān)性并不明顯�；�于室內(nèi)藥劑毒力結(jié)果選擇�！じｄ\和吡唑醚菌酯進(jìn)行田間防效,結(jié)果表明:80%福·福鋅可濕性粉劑相比250g/L的吡唑醚菌酯乳油對黃瓜褐斑病的防治體現(xiàn)出更好的藥效,其1000倍液和1500倍液的兩次防效均分別顯著高于250g/L的吡唑醚菌酯乳油。
【學(xué)位授予單位】：沈陽農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：S436.421.1

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本文編號：1312611