發(fā)布時間：2017-12-20 22:20

  本文關(guān)鍵詞：湖南湘西獼猴桃潰瘍病分子檢測鑒定及其防治藥劑的篩選　出處：《湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)》2015年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：獼猴桃潰瘍病為我國森林植物檢疫性對象,是獼猴桃生產(chǎn)中的一種毀滅性的細菌性病害。獼猴桃潰瘍病在我國湖南、陜西、四川、福建以及安徽等省的獼猴桃栽培區(qū)普遍發(fā)生,造成了嚴重的經(jīng)濟損失。本研究從湖南省的吉首、瀘溪、麻陽、鳳凰、永順等縣(市)的獼猴桃主產(chǎn)區(qū)收集到獼猴桃潰瘍病感病樣品,分離并純化病原菌后,對獲得的潰瘍病致病菌株進行了分子檢測鑒定；采用平板菌落計數(shù)法和田間噴霧+刮除病斑涂抹法進行了7種常用殺菌劑對獼猴桃潰瘍病菌的室內(nèi)毒力測定和田間藥劑防治效果試驗。主要研究結(jié)果如下：1、從湖南湘西地區(qū)采集感染獼猴桃潰瘍病的樣品中,共分離純化得到14份病原菌分離物,分別編號為：YSHY、YSML、YSJK、MYHY、MYCH、FHML、FHHY、 JSCH、JSHY、LXHY、LXML、JSML、TDCY、TDHY。2、利用引物27F/1492R和PsaF1/PsaR2對分離物的16S rDNA和16S-23S rDNA間隔區(qū)序列(ITS)進行了PCR擴增,分別獲得了長度為1.4 kb和300 bp的目的片段。將目的片段回收純化并進行測序,發(fā)現(xiàn)獲得的14株致病菌的16S rDNA基因片段均為1383bp及16S-23S rDNA間隔區(qū)序列為280 bp,且序列一致。可以推斷,所獲得的14份菌株為同一致病菌。3、16S rDNA基因Blast比對結(jié)果顯示：與國外報道的法國181、新西蘭ABAC9、意大利IKB4等株系的16S rDNA基因序列完全一致；與日本的KW11和NCPPB3740、意大利PsaH108、韓國KBE9等株系存在3個堿基的差異,相似性為99.78%；與國內(nèi)分離的11-830-1株系存在4個堿基的差異,相似性為99.71%。構(gòu)建進化樹可以看出,所分離的株系與已報道的Pseudomonas. syringae pv. actinidiae(Psa)菌株JF323029.1. JQ957916.、JX282390.1聚在同一個進化枝上。4、16S-23S rDNA-ITS序列Blast比對結(jié)果顯示：與已報道的中國SXHY11-1、西班牙EFA131.1、葡萄牙PA838等株系的16S-23S rDNA-ITS序列一致；與韓國報道的引起獼猴桃潰瘍病P.syringae pv. morsprunorum屬LMG5075株系有2個堿基的差異。系統(tǒng)發(fā)育樹來看,所分離的株系與P. syringae pv. actinidiae已報道的菌株JQ314412.1、JN378730.1等在同一個進化枝上,同時能與LMG5075區(qū)分開來。以上結(jié)果表明,湖南湘西地區(qū)分離的14個獼猴桃潰瘍病菌致病株系均屬于P. syringae pv. actinidiae。5、7種殺菌劑對獼猴桃潰瘍病菌的室內(nèi)毒力測定和田間藥劑防治效果結(jié)果如下：室內(nèi)毒力測定20%噻森銅懸浮劑抑菌效果較好,ECso為64.01 μg/mL,其次是72%農(nóng)用鏈霉素,ECso為80.28 μg/mL。此外,50%噻唑鋅·中生、85%枯菌酯·VA霉、46%氫氧化銅可殺得叁千、3%中生菌素、80%代森·錳鋅的ECso值分別為129.42μg/mL、242.75 μg/mL、143.50μg/mL、256.66μg/mL、167.82μg/mL。田間噴霧試驗表明,供試的7種藥劑對獼猴桃潰瘍病均有較好的防治效果,以20%噻森銅600倍液的防效最好,達到87.05%,其次是50%噻唑鋅·中生800倍液和72%農(nóng)用鏈霉素800倍液倍液,防效分別為85.33%和85.27%；80%代森·錳鋅700倍液、46%氫氧化銅可殺得叁千1300倍液、85%枯菌酯·VA霉1300倍液、3%中生菌素1000倍液的防效較差,分別為77.30%、74.24%、72.03%、62.76%�；�于以上試驗,20%噻森銅600倍液、72%農(nóng)用鏈霉素800倍液可在生產(chǎn)上推廣應(yīng)用；同時還發(fā)現(xiàn)大田防治中采用病斑刮除涂抹法比噴霧法效果要好。
【學(xué)位授予單位】：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：S436.634

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