發(fā)布時間：2020-11-20 12:47

　　 布魯氏菌病(簡稱布病)是由布魯氏菌引起的一種變態(tài)反應性人畜共患傳染病。近年來,隨著牛羊業(yè)的快速發(fā)展,活畜及其產(chǎn)品的頻繁調(diào)運,人畜間布病發(fā)病率上升,防控形勢嚴峻。開展牛羊布病流行病學調(diào)查,掌握流行現(xiàn)狀及流行率,為布病進一步防控和凈化奠定基礎(chǔ)。過去布病檢測方法單一,國標規(guī)定是用虎紅平板凝集試驗(RBT)進行篩選,試管凝集試驗(SAT)進行確診,近年來出現(xiàn)了一些快速檢測方法如競爭酶聯(lián)免疫吸附試驗(cELISA)、膠體金免疫層析試驗(GICA,簡稱膠體金)等,因此,開展快速檢測方法的符合情況研究勢在必行。本研究通過對不同檢測方法進行比對,篩選更簡單快捷的檢測方法�！秶�家布魯氏菌病防治計劃(2016—2020年)》要求,全國布病防控實行區(qū)域化管理,共劃分為三類區(qū)域,我省屬于一類地區(qū)�！渡綎|省布魯氏菌病防控推進工作方案》(魯牧動衛(wèi)發(fā)[2018]22號)要求,青島、威海、煙臺為布病非免疫區(qū),采取檢測凈化的措施,其余13市為免疫區(qū),采取檢測免疫措施。2018年我省首次大面積使用豬種布魯氏菌S2疫苗(S2疫苗)對牛羊灌服免疫,免疫效果如何在我省還缺乏相關(guān)數(shù)據(jù),為此本研究對疫苗免疫后的免疫效果進行了檢測。本研究調(diào)查了2019年山東省牛羊布病的流行情況,旨在為山東省制定符合現(xiàn)階段的布病綜合防控措施提供科學合理的依據(jù)。2019年共采集山東省16個地市的474個養(yǎng)殖場,牛羊非免疫血清共22212份,其中219個養(yǎng)牛場,非免疫血清11675份;255個養(yǎng)羊場,非免疫血清10537份。經(jīng)檢測,牛布病陽性樣品56份,涉及15個養(yǎng)殖場,個體陽性率0.48%,群體陽性率6.85%;羊布病陽性樣品9份,涉及3個養(yǎng)殖場,個體陽性率0.09%,群體陽性率1.18%。經(jīng)分析,牛羊布病陽性樣品來源7個市,共18個養(yǎng)殖場。從空間上看,主要分布在魯西、魯中地區(qū);從季節(jié)上看,牛羊布病在春季為發(fā)病高峰;從群體看,牛布病多發(fā)于存欄量100-500頭的小規(guī)模養(yǎng)殖場,羊布病在存欄量大于100的規(guī)模養(yǎng)殖場中均有存在。布病常用的血清學檢測方法無論是敏感性和特異性,還是操作簡便、易行和快速等方面都存在一定差異。本研究通過對四種血清學方法RBT、SAT、cELISA和膠體金進行比較,分析四種檢測方法的敏感性、特異性以及符合率,篩選更適用的血清學檢測方法。采用四種檢測方法分別對648份牛羊血清(其中牛血清328份,羊血清320份)進行檢測。結(jié)果表明SAT、RBT、cELISA和膠體金四種布病血清學檢測方法符合率較高(85%~90%)。膠體金特異性略低,但操作方便快捷,可用在調(diào)運過程中的現(xiàn)場檢測;cELISA敏感性最高,實驗室操作簡易,可用在布病的防控、凈化中實驗室檢測。為評價牛羊免疫S2疫苗后免疫效果,本研究采用膠體金、RBT、cELISA三種方法,對奶牛、綿羊免疫S2疫苗后的轉(zhuǎn)陽率進行檢測,分別在免疫后第7天、15天、30天、60天、90天、150天、180天,進行跟蹤監(jiān)測。結(jié)果表明奶牛、綿羊免疫S2疫苗后均能在第7天檢測到布病抗體;奶牛免疫后第15天抗體轉(zhuǎn)陽率最高,綿羊免疫后第30天抗體轉(zhuǎn)陽率最高;此后逐漸下降,在免疫150天后抗體轉(zhuǎn)陽率均低于10%;在免疫180天后綿羊全部轉(zhuǎn)陰,奶牛僅2%尚未轉(zhuǎn)陰。同時檢測免疫后血清中IFN-γ和IL-10含量變化,S2疫苗試驗組血清中IL-10、IFN-γ的含量比對照組略有所增加,并且隨免疫時間延長而變化;奶牛、綿羊試驗組在免疫后第15至30天血清中IFN-γ的含量顯著高于對照組(P0.05),S2疫苗能刺激奶牛、綿羊產(chǎn)生抗布魯氏菌的IFN-γ。綜上所述本研究掌握了2019年山東省牛羊布病個體陽性率、群體陽性率,以及在空間、時間和群體上的分布;明確了SAT、RBT、cELISA和膠體金四種布病檢測方法敏感性、特異性以及符合率;摸清奶牛、綿羊灌服S2疫苗后不同時間點抗體轉(zhuǎn)陽率,以及S2疫苗免疫一年后可以進行檢測淘汰。
【學位單位】：山東農(nóng)業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2020
【中圖分類】：S855.12
【部分圖文】：

2019年山東省牛羊布魯氏菌病流行病學調(diào)查及S2疫苗免疫效果評價18表5奶牛血清樣品來源Table5Sourceofbovineserumsamples血清來源Serumsource總數(shù)total陽性數(shù)Positivenumber陽性率Positiverate（%）濟南78040.51棗莊93590.96青島87000.00臨沂67071.04淄博57500.00聊城630111.75煙臺61000.00菏澤67000.00濟寧53500.00日照78000.00濱州64000.00濰坊72000.00東營75500.00威海90000.00德州87560.69泰安730192.60總計11675560.48圖1奶牛布病陽性場空間分布圖Fig1Spatialdistributionmapofbovinebrucellosispositivefield3.1.2季節(jié)分布對春季、秋季采樣數(shù)量以及奶牛陽性樣品統(tǒng)計（表6）。2019年奶牛布病在春季為發(fā)病高峰。奶牛布病季節(jié)分布圖見圖2。

山東農(nóng)業(yè)大學碩士專業(yè)學位論文19表6不同季節(jié)奶牛陽性樣品統(tǒng)計Table6Statisticsofcattlepositivesamplesindifferentseasons季節(jié)seasons奶牛陽性樣品數(shù)Numberofbovinepositivesamples奶牛采血清總數(shù)Totalbovineserum奶牛陽性樣品占比Proportionofbovinepositivesamples（%）春季3054020.56秋季2662730.41總計56116750.48圖2奶牛布病季節(jié)分布圖Fig2Bovinediseaseseasonsdistributionmap3.1.3群體分布檢測發(fā)現(xiàn)219個奶牛養(yǎng)殖場（戶）中有15個陽性場（戶）。存欄量在100-500之間的陽性養(yǎng)殖場有8個；500-1000的陽性養(yǎng)殖場有3個。奶牛布病陽性場主要集中在存欄量在100-500之間的小規(guī)模養(yǎng)殖場，大于1000的大規(guī)模場數(shù)量較少。陽性養(yǎng)殖場（戶）存欄量統(tǒng)計表見表7。表7奶牛陽性場存欄量統(tǒng)計Table7Statisticsontheinventoryofcattle-positivefarms存欄量/頭Inventory/Each采樣場數(shù)Numberofsamplingfields陽性場數(shù)Numberofpositivefield陽性場占比（%）Proportionofpositivefields＜10016212.50100-50054814.81500-10007633.95＞10007322.74總計219156.853.22019年山東省羊布魯氏菌病流行病學調(diào)查結(jié)果羊主要采集商品代養(yǎng)殖場，商品代養(yǎng)殖場的樣品量占總樣品數(shù)的68%以上。開展布

山東農(nóng)業(yè)大學碩士專業(yè)學位論文21圖3羊布病陽性場空間分布圖Fig3Spatialdistributionofsheep-positivefield3.2.2季節(jié)分布對春季、秋季羊采樣數(shù)量以及陽性樣品統(tǒng)計（表10），2019年羊布病在春季為發(fā)病高峰，羊布病季節(jié)分布圖（圖4）。表10：不同季節(jié)羊陽性樣品統(tǒng)計Table10:Statisticsofsheeppositivesamplesindifferentseasons季節(jié)seasons羊陽性樣品數(shù)Numberofbovinesheepsamples羊采血清總數(shù)Totalsheepserum羊陽性樣品占比Proportionofsheeppositivesamples（%）春季742440.16秋季262930.03總計9105370.09圖4羊布病季節(jié)分布Fig4Sheepdiseaseseasonsdistribution3.2.3群體分布檢測255個羊養(yǎng)殖場（戶）中發(fā)現(xiàn)有3個陽性場（戶）。存欄量在100-500之間的陽性養(yǎng)殖場有1個、存欄量在500-1000之間的陽性養(yǎng)殖場有1個、存欄量在>1000的規(guī)
【參考文獻】

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本文編號：2891435