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中華烏塘鱧重要免疫相關(guān)基因的分子克

發(fā)布時間:2020-12-06 06:39
  中華烏塘鱧(Bostrychus sinensis)隸屬于鱸形目(Perciformes)、塘鱧科(Eleotridae)、烏塘鱧屬(Bostrychus),系河口咸淡水暖水性小型魚類,具有生命力強(qiáng)、生長快、喜穴居等特點。生理學(xué)研究表明,中華烏塘鱧耐干露能力強(qiáng),干露20h不死亡,非常適合活體運輸遠(yuǎn)銷。近年來,廣西、廣東、福建等沿海地區(qū)掀起了一股養(yǎng)殖中華烏塘鱧的熱潮,使其成為重要的人工養(yǎng)殖對象。隨著養(yǎng)殖面積的不斷增加,包括腸炎病、赤皮病、弧菌病、寄生蟲病等各種養(yǎng)殖疾病也相繼出現(xiàn),對中華烏塘鱧養(yǎng)殖業(yè)造成較大的經(jīng)濟(jì)損失。因此,開展中華烏塘鱧養(yǎng)殖病害方面的研究,對于促進(jìn)養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)健康發(fā)展具有重要的意義。本研究從臺州患病中華烏塘鱧體內(nèi)分離出1株優(yōu)勢菌,通過回歸感染、組織病理切片、生理生化及分子生物學(xué)等手段,對患病中華烏塘鱧開展病原學(xué)、免疫學(xué)等方面的研究,為該病的診斷和防治提供參考。利用中華烏塘鱧在感染副溶血弧菌后脾臟進(jìn)行轉(zhuǎn)錄組測序分析和建立cDNA文庫,然后篩選了以下4個重要的先天免疫基因進(jìn)行分析:1.中華烏塘鱧超氧化物歧化酶(BsCu/Zn-SOD與BsMn-SOD)基因的克隆及mRNA表... 

【文章來源】:浙江海洋大學(xué)浙江省

【文章頁數(shù)】:116 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

中華烏塘鱧重要免疫相關(guān)基因的分子克


菌株TZ-01的菌落特征和革蘭氏染色Fig.2.1ColoniescharacteristicsandGramstainoftheStrainTZ-01

16SrDNA序列,瓊脂糖,菌株,凝膠電泳


中華烏塘鱧重要免疫相關(guān)基因的分子克壟基因表達(dá)及功能研究12NCBI數(shù)據(jù)庫選取10種弧菌的16SrDNA序列,利用MEGA7軟件構(gòu)建Neighbor-Joining(NJ)系統(tǒng)發(fā)育樹。結(jié)果表明,菌株TZ-01首先與副溶血弧菌發(fā)生聚類,置信度為97%(如圖3所示),說明菌株TZ-01與副溶血弧菌的親緣關(guān)系最近。結(jié)合生理生化鑒定的結(jié)果,可以將菌株TZ-01鑒定為副溶血弧菌TZ-01。圖2-2菌株TZ-01的16SrDNAPCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳。Fig.2.2Agarosegelelectrophoresisof16SrDNAPCRproductsofthestrainTZ-01.1.16SrDNAPCR產(chǎn)物;2.哈維氏弧菌陽性對照;3.陰性對照。Fig.2Agarosegelelectrophoresisof16SrDNAPCRproductsofthestrainTZ-01.Lane1:16SrDNAPCRproducts;Line2:positivecontrolofVibrioharveyi;Line3:negativecontrol.2.2.6藥敏試驗結(jié)果藥敏試驗結(jié)果如表2所示。在所試驗的20種藥物中,菌株TZ-01對米諾環(huán)素、多西環(huán)素、四環(huán)素、頭孢哌酮、頭孢曲松、頭孢他啶和頭孢呋辛等7種抗生素高度敏感;對頭孢拉定、哌拉西林、氨芐西林、苯唑西林和青霉素等5種抗生素不敏感。圖3基于16SrDNA序列的系統(tǒng)發(fā)育樹。Fig.3Phylogenetictreebasedon16SrDNAsequences.

16SrDNA序列,弧菌,菌株,抗生素


中華烏塘鱧重要免疫相關(guān)基因的分子克壟基因表達(dá)及功能研究12NCBI數(shù)據(jù)庫選取10種弧菌的16SrDNA序列,利用MEGA7軟件構(gòu)建Neighbor-Joining(NJ)系統(tǒng)發(fā)育樹。結(jié)果表明,菌株TZ-01首先與副溶血弧菌發(fā)生聚類,置信度為97%(如圖3所示),說明菌株TZ-01與副溶血弧菌的親緣關(guān)系最近。結(jié)合生理生化鑒定的結(jié)果,可以將菌株TZ-01鑒定為副溶血弧菌TZ-01。圖2-2菌株TZ-01的16SrDNAPCR產(chǎn)物瓊脂糖凝膠電泳。Fig.2.2Agarosegelelectrophoresisof16SrDNAPCRproductsofthestrainTZ-01.1.16SrDNAPCR產(chǎn)物;2.哈維氏弧菌陽性對照;3.陰性對照。Fig.2Agarosegelelectrophoresisof16SrDNAPCRproductsofthestrainTZ-01.Lane1:16SrDNAPCRproducts;Line2:positivecontrolofVibrioharveyi;Line3:negativecontrol.2.2.6藥敏試驗結(jié)果藥敏試驗結(jié)果如表2所示。在所試驗的20種藥物中,菌株TZ-01對米諾環(huán)素、多西環(huán)素、四環(huán)素、頭孢哌酮、頭孢曲松、頭孢他啶和頭孢呋辛等7種抗生素高度敏感;對頭孢拉定、哌拉西林、氨芐西林、苯唑西林和青霉素等5種抗生素不敏感。圖3基于16SrDNA序列的系統(tǒng)發(fā)育樹。Fig.3Phylogenetictreebasedon16SrDNAsequences.


本文編號:2900912

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