發(fā)布時間：2020-12-15 17:41

　　水稻（Oryza sativa L.）是我國重要的谷類作物,同時也是我國的主要糧食作物之一。株高是影響水稻產(chǎn)量的重要農(nóng)藝性狀,水稻植株過高會讓水稻易倒伏而減產(chǎn),而適當(dāng)?shù)陌�化可以提高水稻抗倒伏、耐肥的能力從而使水稻增產(chǎn)。本研究通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法,將源于玉米（Zea mays L.）中的10個DOF轉(zhuǎn)錄因子家族基因和11個GATA轉(zhuǎn)錄因子家族基因轉(zhuǎn)入到了水稻品種日本晴中,經(jīng)篩選獲得了穩(wěn)定遺傳的矮化株系dof34,對其進行了農(nóng)藝性狀、光合作用的測定,并對矮化機制進行了初步探討,以期為水稻矮化株型育種提供材料和技術(shù)支持。主要研究結(jié)果如下:1.利用GATEWAY克隆技術(shù)成功構(gòu)建了10個DOF家族基因和11個GATA家族基因的過表達載體。2.通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)獲得423株轉(zhuǎn)DOF家族基因和GATA家族基因的組培苗,對T0代和T1代進行篩選鑒定,最終獲得了能夠穩(wěn)定遺傳的轉(zhuǎn)Dof34基因的矮化水稻株系。3.dof34株系的農(nóng)藝性狀調(diào)查,結(jié)果表明,其光合速率、蒸騰速率、氣孔導(dǎo)度、胞間CO₂濃度均顯著高于野生型;千粒重、有效分蘗數(shù)、結(jié)實率相較于野生型無顯著差異;株高和生物量較野生型降低。4... 

【文章來源】：河北科技大學(xué)河北省

【文章頁數(shù)】：56 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

GATEWAY目標載體示意圖

12圖2-2轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α抗性篩選結(jié)果M:DL2000DNAMarker；1-11：鑒定轉(zhuǎn)入大腸桿菌載體上潮霉素抗性特異性條；12：質(zhì)粒陽性對照；13：陰性對照圖2-3大腸桿菌轉(zhuǎn)化Hyg抗性基因的PCR電泳結(jié)果2.3.2質(zhì)粒提取檢測結(jié)果將從已轉(zhuǎn)化的大腸桿菌中提取的質(zhì)粒用凝膠電泳檢測，載體大小約為13.5kb左右，電泳結(jié)果（見圖2-4）顯示，載體條帶大小一致，為單條帶且條帶清晰。表明成功提取出了大腸桿菌內(nèi)的過表達載體。對質(zhì)粒用目的基因通用引物進行PCR來進一步檢測過表達載體是否構(gòu)建成功（詳情見圖2-5），所轉(zhuǎn)入的基因大小在1000bp左右，結(jié)果均能擴增出目的基因特異條帶，條帶清晰大小正確，21個過表達載體全部構(gòu)建成功。750bp13

12圖2-2轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α抗性篩選結(jié)果M:DL2000DNAMarker；1-11：鑒定轉(zhuǎn)入大腸桿菌載體上潮霉素抗性特異性條；12：質(zhì)粒陽性對照；13：陰性對照圖2-3大腸桿菌轉(zhuǎn)化Hyg抗性基因的PCR電泳結(jié)果2.3.2質(zhì)粒提取檢測結(jié)果將從已轉(zhuǎn)化的大腸桿菌中提取的質(zhì)粒用凝膠電泳檢測，載體大小約為13.5kb左右，電泳結(jié)果（見圖2-4）顯示，載體條帶大小一致，為單條帶且條帶清晰。表明成功提取出了大腸桿菌內(nèi)的過表達載體。對質(zhì)粒用目的基因通用引物進行PCR來進一步檢測過表達載體是否構(gòu)建成功（詳情見圖2-5），所轉(zhuǎn)入的基因大小在1000bp左右，結(jié)果均能擴增出目的基因特異條帶，條帶清晰大小正確，21個過表達載體全部構(gòu)建成功。750bp13

【參考文獻】：
期刊論文
[1]脫落酸拮抗赤霉素抑制水稻地上部生長的研究[J]. 戚義東,秦華,高雅迪,王芳芳,黃榮峰,權(quán)瑞黨.  生物技術(shù)進展. 2019(05)
[2]不同溫度、枝段部位對文冠果愈傷組織形成的效果影響[J]. 王慧琳.  防護林科技. 2019(07)
[3]作物高光效種質(zhì)篩選的研究進展[J]. 張耀文,趙小光,關(guān)周博,侯君利,王學(xué)芳,董育紅,田建華,李殿榮,王竹云.  中國農(nóng)學(xué)通報. 2019(18)
[4]農(nóng)桿菌介導(dǎo)的水稻快速高效基因轉(zhuǎn)化系統(tǒng)[J]. 高璐,薛永來.  江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué). 2019(04)
[5]植物組培新方法——開放式組織培養(yǎng)研究概況[J]. 周亞輝.  中國園藝文摘. 2018(06)
[6]我國水稻半矮稈性狀與抗倒伏育種研究獲得新進展[J]. 劉剛.  農(nóng)藥市場信息. 2018(01)
[7]水稻矮桿突變體D814基因圖位克隆與功能分析[J]. 陳新兵,黃榮峰,王娟.  生物技術(shù)進展. 2017(06)
[8]水稻組織培養(yǎng)相關(guān)研究綜述[J]. 尹祥佳,趙慧軍,李艷玫,郝楠.  甘肅農(nóng)業(yè)科技. 2017(08)
[9]我國水稻生產(chǎn)現(xiàn)狀及發(fā)展對策研究[J]. 鐘桂花.  農(nóng)民致富之友. 2017(12)
[10]水稻半矮稈基因sd1功能標記的開發(fā)與利用[J]. 徐建軍,張云輝,顧嘯,姚麒麟.  上海農(nóng)業(yè)學(xué)報. 2016(04)

碩士論文
[1]水稻矮化多分蘗突變體的表型分析與基因克隆[D]. 謝婷婷.聊城大學(xué) 2015
[2]水稻在我國糧食安全中的戰(zhàn)略地位分析[D]. 虞國平.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2009



本文編號：2918640