發(fā)布時間：2024-04-09 01:10

　　Takeout(to)基因是一種節(jié)律調控輸出基因,廣泛存在于昆蟲的營養(yǎng)功能和化學感受等相關組織。to基因主要參與昆蟲的生長發(fā)育、行為調節(jié)及多種生理代謝過程。為探究to基因在蜜蜂中的表達規(guī)律和相關生物學功能,我們克隆了中華蜜蜂Apis cerana cerana和意大利蜜蜂Apis mellifera ligustica的to基因,分析該基因在哺育蜂和采集蜂各組織的mRNA表達規(guī)律,并利用RNA干擾技術進一步探討了其生物學功能。主要研究結果如下:通過反轉錄多聚酶鏈式反應技術(RT-PCR)首次克隆獲得了中華蜜蜂和意大利蜜蜂to基因的cDNA序列分別為1058 bp和783 bp,依次命名為AcTO1和AmTO1,其開放閱讀框(ORF)長度均為738 bp,均編碼246個氨基酸,預測的蛋白質分子質量分別為27.09和27.07 kDa,等電點pI均為8.40。生物信息學分析結果表明,AcTO1和AmTO1蛋白在N端均有一段信號肽序列,無跨膜結構,均為分泌蛋白。此外,2種蛋白的氨基酸序列中都存在一個保幼激素結合蛋白(JHBP)超家族的保守結構域。采用熒光定量PCR技術qRT-PCR對中華蜜蜂...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２－２?ＰＣＲ產物電泳分析??Ｆｉｇｕｒｅ?２－２．?Ｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｔｉｃ?ａｎａｌｙｓｉｓ?ｏｆ?ＰＣＲ?ｐｒｏｄｕｃｔｓ??

３結果與分析??３．?１中華蜜蜂和意大利蜜蜂總ＲＮＡ質量鑒定??部分樣本ＲＮＡ經１．５％瓊脂糖凝膠電泳檢測（見圖２－〗），左邊兩個泳道為中華蜜蜂??樣品，右邊兩個泳道為意大利蜜蜂樣品，電泳圖可清晰地看到三條帶，從上到下依次為??２８Ｓ，１８Ｓ和５Ｓ�？傮w上來看，所提取的蜜蜂總ＲＮ....

圖２－４?ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ蛋白的信號肷預測結果??Ｆｉｇｕｒｅ?２－４．?Ｐｒｅｄｉｃｔｅｄ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｆｏｒ?ｓｉｎｇａｌ?ｐｅｐｔｉｄｅ?ｉｎ?ＡｃＴＯｌ?ａｎｄ?ＡｍＴＯｌ??

??圖２－５?ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ蛋白跨膜結構的預測??Ｆｉｇｕｒｅ?２－５．?Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔｒａｎｓｍｅｍｂｒａｎｅ?ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ＡｃＴＯｌ?ａｎｄ?ＡｍＴＯｌ??２０??

圖２－６?ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ的保守結構區(qū)域??Ｆｉｇｕｒｅ?２－６．?Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?Ｄｏｍａｉｎｓ?ｏｆ?ＡｃＴＯｌ?ａｎｄ?ＡｍＴＯｌ??

?３．３．４?保守結構區(qū)域的分析??２個ＴＯ蛋白的保守結構域預測采用ＮＣＢＩ?Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?Ｄｏｍａｉｎｓ對（圖２－６），??結果表明它們均具有ＪＨＢＰ?ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ家族的保守結構域。ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ的??保守結構區(qū)域都位于第７－２４４位氨基酸之間，Ｅ－ｖａ....

圖２－７?ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ的功能結構域??－

?３．３．４?保守結構區(qū)域的分析??２個ＴＯ蛋白的保守結構域預測采用ＮＣＢＩ?Ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ?Ｄｏｍａｉｎｓ對（圖２－６），??結果表明它們均具有ＪＨＢＰ?ｓｕｐｅｒｆａｍｉｌｙ家族的保守結構域。ＡｃＴＯｌ和ＡｍＴＯｌ的??保守結構區(qū)域都位于第７－２４４位氨基酸之間，Ｅ－ｖａ....

本文編號：3949085