發(fā)布時(shí)間：2020-11-22 11:37

　　 本研究旨在探討給予不同濃度降鈣素基因相關(guān)肽(calcitonin gene-related peptide, CGRP)對(duì)小鼠海馬區(qū)長(zhǎng)時(shí)程抑制(long-termdepression,LTD)的作用。將60只30日齡C57BL/6J雄性小鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、不同濃度(50,100,200nmol/L)CGRP組、CGRP+CGRP_(8-37)組以及CGRP+APV組,每組10只。用離體場(chǎng)電位方法檢測(cè)外源性給予腦片不同濃度CGRP對(duì)小鼠海馬區(qū)突觸可塑性及LTD的作用。結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,100和200 nmol/L CGRP可明顯易化海馬區(qū)LTD的誘發(fā),差異具有顯著性,并且CGRP可提高N-甲基-D-天門(mén)冬氨酸(N-methyl-D-aspartate, NMDA)受體介導(dǎo)的興奮性突觸后電流的幅度。CGRP的上述作用均可被CGRP選擇性阻斷劑CGRP_(8-37)和NMDA受體阻斷劑APV所阻斷。以上結(jié)果提示,CGRP可劑量依賴(lài)性地易化小鼠海馬區(qū)LTD的誘發(fā),作用機(jī)制可能與NMDA受體功能的調(diào)節(jié)有關(guān)。
【部分圖文】：

1.3.4 神經(jīng)元膜片鉗記錄記錄電極內(nèi)液配方成分(mmol/L):Cs-gluconate 122.5,Cs Cl 17.5,EGTA 0.2,HEPES 10,Na Cl 8,Mg-ATP 2,Na-GTP 0.3,QX3145,pH 7.2，滲透壓280～290 mOsmol/L。在記錄EPSCs時(shí)，將刺激電極插入海馬CA3區(qū)，將裝有電極內(nèi)液的記錄電極(電阻約為2～4 MΩ)與海馬CA1區(qū)的突觸后神經(jīng)元進(jìn)行封接破膜，然后通過(guò)刺激CA3區(qū)產(chǎn)生EPSCs。對(duì)照組外源性給予CNQX(20μmol/L)，在-70 mV鉗制電壓并且無(wú)Mg2+條件下記錄NMDA受體介導(dǎo)的EPSCs。各組腦片的處理如下：在CGRP組ACSF中加入CGRP(200 nmol/L)；在CGRP+CGRP8-37組ACSF中加入CGRP(200 nmol/L)和CGRP阻斷劑CGRP8-37(1μmol/L)；在CGRP+APV組ACSF中加入CGRP(200 nmol/L)和NMDA受體阻斷劑APV(50μmol/L)，給藥后均孵育20min，然后記錄NMDA受體介導(dǎo)的EPSCs。每組記錄4只小鼠，每只小鼠記錄2張腦片。

結(jié)果顯示，給予不同濃度的CGRP后，在各組小鼠海馬區(qū)LTD的誘發(fā)過(guò)程中，fEPSP斜率分別下降至(77.81±1.68)%(50 nmol/L CGRP組)、(77.84±3.01)%(100 nmol/L CGRP組)和(72.45±1.87)%(200nmol/L CGRP組)。與對(duì)照組相比，給予100 nmol/L和200 nmol/L CGRP易化了LTD的誘發(fā)，差異具有顯著性(P<0.05,P<0.01)(圖1)。2.2 CGRP阻斷劑CGRP8-37及NMDA受體阻斷劑APV可阻斷CGRP對(duì)海馬區(qū)LTD誘發(fā)的易化作用

與對(duì)照組(198.20 pA±31.88 pA)比較，給予CGRP(200 nmol/L)可顯著增加小鼠海馬區(qū)NMDA受體介導(dǎo)的EPSCs的幅度(369.11 pA±53.65 pA)(P<0.01)。而給予CGRP阻斷劑CGRP8-37和NMDA受體阻斷劑APV后，NMDA受體介導(dǎo)的EPSCs顯著下降，與對(duì)照組沒(méi)有顯著性差異[對(duì)照組：(185.79±25.68)p A;CGRP+CGRP8-37組：(213.0±27.29)pA。對(duì)照組：163.39 pA;CGRP+APV組：(180.90±24.71)pA](圖3)。上述結(jié)果提示，CGRP是通過(guò)與其受體結(jié)合易化了NMDA受體依賴(lài)性L(fǎng)TD的誘發(fā)。3 討論
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