發(fā)布時(shí)間：2020-12-12 13:52

　　[目的]隨著社會(huì)老齡化問題日趨嚴(yán)重,舒張性心力衰竭（DHF）所占比重及發(fā)病率逐年提高,而松弛素今年近幾年來發(fā)現(xiàn)具有心血管保護(hù)作用,我們既往研究已經(jīng)發(fā)現(xiàn)松弛素可以改善DHF模型兔的舒張功能,但是其具體機(jī)制不明。藉此,我們探索人重組松弛素（RLX）對(duì)舒張性心力衰竭（DHF）模型兔心肌組織蛋白激酶G（PKG）活性的調(diào)控作用,旨在揭示重組人松弛素改善DHF舒張功能的病理生理機(jī)制,進(jìn)一步為DHF的臨床靶向治療提供重要實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。[方法]1.采用腹主動(dòng)脈縮窄術(shù)建立DHF模型兔,新西蘭家兔42只隨機(jī)分為假手術(shù)組（Sham組,6只）、DHF組（12只）、RLX小劑量組（12只）、RLX大劑量組（12 只）。2.術(shù)后8周,剔除術(shù)后死亡及不符合DHF診斷的家兔,經(jīng)耳緣靜脈注射給予RLX藥物,RLX小劑量組為30μg/kg·d,大劑量組為98μg/kg·d,持續(xù)經(jīng)兔耳緣靜脈給藥2周。3.術(shù)后第10周,取血清標(biāo)本,分別采用酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定方法（ELISA）檢測(cè)腦鈉肽（BNP）、松弛素（RLX）濃度,制備10%心肌勻漿液分別采用ELISA方法檢測(cè)3-硝基酪氨酸（3-NT）、一氧化氮（NO）、環(huán)磷酸鳥苷（cGMP）... 

【文章來源】：安徽醫(yī)科大學(xué)安徽省

【文章頁數(shù)】：39 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１．采用腹主動(dòng)脈縮窄法建立ＤＨＦ模型??

待各組家兔抽血完畢后，將抽取，４０００ｒｐｍ／ｍｉｎ持續(xù)約１０分鐘，離心后�。埃�４ｍｌ免疫法（ＥＬＩＳＡ法）檢測(cè)各組家兔鈉尿肽（ＢＮ含量，并進(jìn)行對(duì)比。檢測(cè)方法嚴(yán)格按照試劑說明肌勻漿液??］方法制作心肌勻漿液：１．處死：采用空氣栓塞法心臟。２．取心肌組織：預(yù)冷的生理鹽水充分洗、心房、右心室及脂肪組織等，切取部分左心色切片。３．研磨：按１：?９的體質(zhì)量體積比加入浴中充分研磨制成均勻的１０％勻漿液。４．離心３ｌ上清液－２０°Ｃ備檢。待標(biāo)本收集完畢后，采用Ｅ漿上清液３－ＮＴ，?ＮＯ、ｃＧＭＰ、ＰＫＧ水平，并對(duì)各組按照試劑說明書。??：

對(duì)心肌組織塊進(jìn)行約３０分鐘的透明處理。再將心肌組織塊放入石蠟中吸取組織??內(nèi)含有的透明劑；將浸蠟后的組織塊置入溶化的固體石蠟中５分鐘，組織被石蠟??全包埋后即可；??３．切片、貼片與烘干：將組織蠟塊修整后，置于病理組織切片機(jī)進(jìn)行切片處??，用眼科鑷子將切成厚度約３－５ｕｍ的蠟帶打開平鋪在４０－５ＣＴＣ恒溫的水面上，待??帶充分展開后撈起放置于載玻片上，６０＿６５°Ｃ恒溫箱內(nèi)烤片１５ｍｉｎ左右；??二、心肌纖維Ｍａｓｓｏｎ染色：以上步驟完畢后，放入Ｍａｓｓｏｎ藍(lán)化液返藍(lán)５ｍｉｎ、??洗，再用麗春紅品紅染色液染色５－１０ｍｉｍ再用磷鉬酸溶液洗ｌ－２ｍｉｍ按蒸餾??：弱酸溶液＝２：１比例配置弱酸工作液清洗ｌｍｉｎ，直接放入苯胺藍(lán)染色液中染色??－２ｍｉｎ，再用弱酸工作液體清洗ｌｍｉｎ，再用無水乙醇脫水，二甲苯透明，中性樹??封固。Ｍａｓｓｏｎ染色完成后，用４００倍顯微鏡觀察組織，藍(lán)色代表心肌膠原纖維、??胞核，而紅色代表細(xì)胞質(zhì)、肌纖維、紅細(xì)胞。??


本文編號(hào)：2912679