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轉(zhuǎn)染NM23基因?qū)θ宋赴┞闶蟾骨灰浦擦鲇绊懙难芯?/H1>
發(fā)布時(shí)間:2024-06-23 09:06
  目的:將攜帶NM23轉(zhuǎn)移抑制基因的腺病毒載體感染人低分化胃癌BGC-823細(xì)胞,探討過(guò)表達(dá)NM23轉(zhuǎn)移抑制基因?qū)β闶蟾骨灰浦擦鲛D(zhuǎn)移的影響。方法:1.繪制BGC-823細(xì)胞生長(zhǎng)曲線圖;2.將BGC-823細(xì)胞進(jìn)行分組,分別為空白對(duì)照組(Ctrl組)、空病毒載體pCMV-MCS-IRES-EGFP感染BGC-823細(xì)胞為陰性對(duì)照組(NC組)、重組腺病毒載體pCMV-NM23-IRES-EGFP感染BGC-823細(xì)胞為實(shí)驗(yàn)組(NM23-OE組),孵育48h后觀察細(xì)胞內(nèi)是否攜帶綠色熒光蛋白EGFP;3.將18只雌性BALB/c-nu裸鼠隨機(jī)分為三組,每組各6只;調(diào)整細(xì)胞量為1×107個(gè)/ml,于裸鼠腹腔內(nèi)接種0.2ml單細(xì)胞懸液。以接種空白BGC-823細(xì)胞為Ctrl組、接種感染pCMV-MCS-IRES-EGFP的BGC-823細(xì)胞為NC組、接種感染pCMV-NM23-IRES-EGFP的BGC-823細(xì)胞為NM23-OE組。每日觀察裸鼠生活狀態(tài),每2日測(cè)量裸鼠腹圍,應(yīng)用小動(dòng)物超聲探查裸鼠腹腔內(nèi)成瘤情況。4.2周后解剖裸鼠,分別進(jìn)行肉眼觀察及鏡下觀察。計(jì)算移植瘤轉(zhuǎn)移器官...

【文章頁(yè)數(shù)】:58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

圖1人低分化胃癌BGC-823細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線圖

圖1人低分化胃癌BGC-823細(xì)胞的生長(zhǎng)曲線圖

天后生長(zhǎng)速度加快,進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期。BGC-823細(xì)胞數(shù)量在培養(yǎng)。連續(xù)培養(yǎng)7日為一周期,將培養(yǎng)時(shí)間設(shè)置為橫軸,每日于倒置數(shù)量,將計(jì)數(shù)結(jié)果設(shè)置為縱軸,繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線圖。表1人低分化胃癌BGC-823細(xì)胞在不同時(shí)間的細(xì)胞數(shù)量(n=1,時(shí)間t細(xì)胞數(shù)量(x105個(gè)/m....


圖2熒光顯微鏡下觀察三組細(xì)胞的感染情況

圖2熒光顯微鏡下觀察三組細(xì)胞的感染情況

遵義醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文梁娜2.2熒光顯微鏡觀察三組BGC-823細(xì)胞的感染情況課題組前期已摸索出感染BGC-823細(xì)胞的感染效率為80%的最佳感染復(fù)數(shù)MOI值為80,并以此MOI進(jìn)行BGC-823細(xì)胞的感染。NM23-OE組和NC組有綠色熒光蛋白表達(dá),Ct....


圖3腹圍生長(zhǎng)曲線圖

圖3腹圍生長(zhǎng)曲線圖

18只裸鼠均建立了人胃癌腹腔移植瘤模型,在第1周內(nèi)一般情況良好,活動(dòng)自,體形無(wú)改變。Ctrl組及NC組裸鼠在1周后開始出現(xiàn)飲食量減少、動(dòng)作遲緩、精倦怠,體重逐漸增加,并見(jiàn)蛙狀腹。而NM23-OE組裸鼠一般活動(dòng)不受限,精神、食尚可。無(wú)裸鼠在實(shí)驗(yàn)中死亡。.3.2....


圖4三組裸鼠2周后最大腹圍對(duì)比圖

圖4三組裸鼠2周后最大腹圍對(duì)比圖

圖4三組裸鼠2周后最大腹圍對(duì)比圖A:Ctrl組裸鼠最大腹圍B:NC組裸鼠最大腹圍C:NM23-OE組裸鼠最大腹圍表2三組裸鼠相差腹圍對(duì)比(n=3,)組別相差腹圍(mm)Ctrl組NC組NM23-OE組29.17±1.4726.50±3.511....



本文編號(hào):3995291


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