發(fā)布時間：2020-11-20 20:36

　　 目的建立1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶(MPTP)帕金森病(PD)模型,探討模型組嗅球細(xì)胞凋亡和膠質(zhì)細(xì)胞增生情況。方法 3只成年健康食蟹猴,靜脈注射MPTP建立PD模型,另3只靜脈注射生理鹽水作為對照。取出嗅球,免疫組織化學(xué)染色檢測Caspase-3、Bcl-2、離子鈣接頭蛋白分子1(Iba-1)和膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)在食蟹猴嗅球中的表達(dá)情況,采用Image J v1.8.0軟件分析模型組和對照組之間的差異。結(jié)果 MPTP損傷后,與對照組相比,模型組嗅球突觸小球?qū)覥aspase-3陽性細(xì)胞數(shù)明顯增加,而Bcl-2表達(dá)減少;與對照組相比,模型組嗅球突觸小球?qū)雍屯饩W(wǎng)狀層的GFAP和Iba-1陽性細(xì)胞數(shù)增加。結(jié)論 MPTP可誘導(dǎo)食蟹猴嗅球突觸小球?qū)蛹?xì)胞凋亡,并伴有星形膠質(zhì)細(xì)胞增生和小膠質(zhì)細(xì)胞激活,這可能與帕金森病的功能障礙有關(guān)。
【部分圖文】：

?×400)每視野數(shù)量為11.06±3.47(圖1D)，而相應(yīng)對照組每視野數(shù)量為2.13±1.45(圖1C)。經(jīng)ImageJv1.8.0軟件計(jì)數(shù)分析Caspase-3陽性細(xì)胞數(shù)，與對照組相比，MPTP組Caspase-3陽性細(xì)胞明顯增多(P＜0.01，圖2)。與Caspase-3陽性細(xì)胞分布相似，Bcl-2陽性細(xì)胞多集中于嗅球突觸小球?qū)雍屯饩W(wǎng)狀層(圖3A，3B)。與對照組相比，MPTP組嗅球的Bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)減少(圖3A，3B)，40倍鏡(×400)每視野數(shù)量為7.82±4.41，而相應(yīng)對照組每視野數(shù)量為26.69±15.55(P＜0.05)(圖3C，3D)。經(jīng)ImageJv1.8.0軟件分析，Bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)見圖4。圖2MPTP誘導(dǎo)嗅球細(xì)胞凋亡后定量計(jì)數(shù)Caspase-3陽性細(xì)胞與對照組比較，＊＊P＜0.01Fig．2CountingCaspase-3positivecellsquantitativelyComparedwiththecontrolgroup，＊＊P＜0.01圖4定量計(jì)數(shù)Bcl-2陽性細(xì)胞與對照組比較，＊＊P＜0.05Fig．4CountingBcl-2positivecellsquantitativelyComparedwiththecontrolgroup，＊＊P＜0.05

，40倍鏡(×400)每視野數(shù)量為11.06±3.47(圖1D)，而相應(yīng)對照組每視野數(shù)量為2.13±1.45(圖1C)。經(jīng)ImageJv1.8.0軟件計(jì)數(shù)分析Caspase-3陽性細(xì)胞數(shù)，與對照組相比，MPTP組Caspase-3陽性細(xì)胞明顯增多(P＜0.01，圖2)。與Caspase-3陽性細(xì)胞分布相似，Bcl-2陽性細(xì)胞多集中于嗅球突觸小球?qū)雍屯饩W(wǎng)狀層(圖3A，3B)。與對照組相比，MPTP組嗅球的Bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)減少(圖3A，3B)，40倍鏡(×400)每視野數(shù)量為7.82±4.41，而相應(yīng)對照組每視野數(shù)量為26.69±15.55(P＜0.05)(圖3C，3D)。經(jīng)ImageJv1.8.0軟件分析，Bcl-2陽性細(xì)胞數(shù)見圖4。圖2MPTP誘導(dǎo)嗅球細(xì)胞凋亡后定量計(jì)數(shù)Caspase-3陽性細(xì)胞與對照組比較，＊＊P＜0.01Fig．2CountingCaspase-3positivecellsquantitativelyComparedwiththecontrolgroup，＊＊P＜0.01圖4定量計(jì)數(shù)Bcl-2陽性細(xì)胞與對照組比較，＊＊P＜0.05Fig．4CountingBcl-2positivecellsquantitativelyComparedwiththecontrolgroup，＊＊P＜0.05

Vol．50，No．1陳名宇等．帕金森病MPTP食蟹猴模型嗅球細(xì)胞凋亡·5·圖1MPTP誘導(dǎo)嗅球細(xì)胞凋亡免疫組織化學(xué)染色標(biāo)尺示100μm(下同)A、C．對照組嗅球Caspase-3染色;B、D．MPTP組嗅球Caspase-3染色圖3MPTP誘導(dǎo)嗅球Bcl-2細(xì)胞數(shù)量減少A和C．對照組嗅球Bcl-2染色;B和D．MPTP組嗅球Bcl-2染色圖5MPTP激活嗅球小膠質(zhì)細(xì)胞A、C．對照組嗅球Iba-1染色;B、D．MPTP組Iba-1染色圖7MPTP促進(jìn)星型膠質(zhì)細(xì)胞增生A、C．對照組嗅球GFAP染色;B、D．MPTP組嗅球GFAP染色Fig．1CellapoptosisinducedbyMPTPinolfactorybulbsImmunohistochemistryBar=100μm(Thesameasbelow)A，C，TheimmunohistochemistryofCaspase-3inolfactorybulbsofnormalgroup;B，D，TheimmunohistochemistryofCaspase-3inolfactorybulbsofMPTPgroupFig．3ThedecreasedBcl-2positivecellsinducedbyMPTPinolfactorybulbsA，C，TheimmunohistochemistryofBcl-2inolfactorybulbsofnormalgroup;B，D，TheimmunohistochemistryofBcl-2inolfactorybulbsofMPTPgroupFig．5MicrogliaactivationinducedbyMPTPinolfactorybulbsA，C，TheimmunohistochemistryofIba-1inolfactorybulbsofnormalgroup;B，D，TheimmunohistochemistryofIba-1inolfactorybulbsofMPTPgroupFig．7AstrocyteproliferationinducedbyMPTPinolfactorybulbsA，C，TheimmunohistochemistryofGFAPinolfactorybulbsofnormalgroup;B，D，TheimmunohistochemistryofGFAPinolfactorybulbsofMPTPgroup2．MPTP激活嗅球膠質(zhì)細(xì)胞MPTP損傷后，與正常對照組相比，MPTP組Iba-1陽性細(xì)胞數(shù)增多，陽性細(xì)胞體積增大(圖5A，5B)。Iba-1陽性細(xì)胞主要集中在嗅球突觸小球?qū)雍屯饩W(wǎng)狀層(圖5A，5B)。定量計(jì)數(shù)MPTP組嗅球40倍鏡(×400)每視野Iba-1陽性細(xì)胞數(shù)量為19.88±
【參考文獻(xiàn)】

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1 程煒;任振華;關(guān)云謙;吳迪;岳峰;李光武;;1-甲基-4-苯基-1,2,3,6-四氫吡啶對食蟹猴嗅球多巴胺能神經(jīng)元的影響[J];解剖學(xué)報(bào);2014年03期

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5 馮衍生;WDR26對氧化應(yīng)激所致心肌細(xì)胞mPTP開放的影響及其心肌保護(hù)作用研究[D];中南大學(xué);2012年

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本文編號：2891968