發(fā)布時(shí)間：2020-11-21 19:28

　　 胰島素是治療糖尿病的特效藥物,糖尿病是最常見的內(nèi)分泌代謝疾病。單組分人胰島素已成為目前治療糖尿病的首選藥物。與基因工程生產(chǎn)人胰島素相比,豬胰島素酶促半合成人胰島素的方法簡便有效,且我國豬資源豐富,半合成所需豬胰島素來源充分,研制生產(chǎn)所需的投資少,周期短,符合我國現(xiàn)階段國情。由于一步法固相酶促半合成人胰島素的方法具有一系列優(yōu)點(diǎn),實(shí)用價(jià)值更高,因此,人胰島素的一步法固相酶促半合成便成為一個(gè)重要課題。 本文報(bào)道了用固定化胰蛋白酶催化豬胰島素一步法合成人胰島素的工藝。合成了優(yōu)質(zhì)且高含量的蘇氨酸叔丁醚叔丁酯,純度可達(dá)98.5%,收率穩(wěn)定;快速制備高活力的固定化胰蛋白酶,活力單位高達(dá)5990.5U/g,該工藝具有更為快捷簡便的特點(diǎn)。以豬胰島素和蘇氨酸叔丁醚叔丁酯為原料,固定化胰蛋白酶催化,通過一步轉(zhuǎn)肽法半合成人胰島素,轉(zhuǎn)肽率可達(dá)75.1%。制得的人胰島素經(jīng)鑒定和純度檢測,結(jié)果為:PAGE和SDS-PAGE為單一蛋白帶,遷移率與人胰島素標(biāo)準(zhǔn)品一致;HPLC為單一蛋白峰,保留時(shí)間與人胰島素標(biāo)準(zhǔn)品相同。
【學(xué)位單位】：四川大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2004
【中圖分類】：R341
【部分圖文】：

12345圖2聚丙烯酞胺凝膠電泳圖譜Fig2PolyaerylamidegeleleetroPhoresis(PAGE)1·Pl2.Hl·E(erudeProduet)3·Hl(debloekedProduct)(PurifiedProduct)5.Nov一NordiskHl人胰島素酣分離純化結(jié)果QSepharoseFF陰離子交換層析分離H工一ester圖譜見

QSepharoseFF離子梯度層析純化Hl圖譜PurifieationofHlonQ一SePharoseFastFlowioneolumn(2.0x11em)waselutedby45%ethano5歸e卜扣.bgl詩口TFNH4CI);Flowrate:.0·smllmin.7人胰島素的鑒定結(jié)果7.1聚丙烯酞胺凝膠電泳(PAGE)結(jié)果:通過12%APGB，對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行鑒定，見圖2。結(jié)產(chǎn)品為單一蛋白帶，與人胰島素標(biāo)準(zhǔn)品蛋白帶位7.2SDS一聚丙烯酞胺凝膠電泳(SDS一PAGE)結(jié)果:通過15%SDS一PAGE，對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行鑒定，結(jié)果顯分子量與人胰島素對(duì)照品相同，且純度較高，為
【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前2條

1 周蕊;人胰島素一步法固相酶促半合成的研究[D];四川大學(xué);2004年

2 高秀蓉;人胰島素固相酶促半合成及其工藝的研究[D];四川大學(xué);2005年

本文編號(hào)：2893486