尾加壓素Ⅱ通過ERK1/2途徑誘導(dǎo)大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖和上調(diào)Egr-1表達(dá)
發(fā)布時(shí)間:2020-12-05 00:37
目的:研究不同濃度尾加壓素Ⅱ(UⅡ)及其受體拮抗劑urantide對(duì)培養(yǎng)大鼠肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(PASMC)增殖的影響,探討絲裂原活化蛋白激酶(MAPK)途徑及早期生長反應(yīng)因子1(Egr-1)在UⅡ誘導(dǎo)大鼠PASMCs增殖中的作用。方法:以組織貼塊法原代培養(yǎng)大鼠PASMCs:(1)采用Brd U摻入實(shí)驗(yàn)測(cè)定不同濃度(1μmol/L、0.1μmol/L和0.01μmol/L)UⅡ及其受體拮抗劑對(duì)大鼠PASMCs增殖的影響;(2)采用real-time PCR檢測(cè)UⅡ及其受體拮抗劑對(duì)細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶1/2(ERK1/2)、應(yīng)激活化蛋白激酶(SAPK)、p38 MAPK及Egr-1mRNA表達(dá)的影響;(3)采用Western blotting檢測(cè)UⅡ、urantide及ERK1/2抑制劑PD98059對(duì)PASMCs磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、p-SAPK、p-p38 MAPK和Egr-1蛋白表達(dá)的影響。結(jié)果:(1)UⅡ在一定濃度范圍(1μmol/L、0.1μmol/L和0.01μmol/L)呈濃度依賴性地促進(jìn)肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖(P<0.01或P<0.05),這種增殖...
【文章來源】:中國病理生理雜志. 2014年11期 第2093-2097頁 北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
材料和方法
1 動(dòng)物
2 主要試劑
3 主要方法
3.1 大鼠PASMCs的培養(yǎng)及免疫熒光鑒定
3.2 Brd U摻入實(shí)驗(yàn)
3.3 Real-time PCR
3.4 Western blotting分析
4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
1培養(yǎng)大鼠PASMCs鑒定
2 UⅡ?qū)ε囵B(yǎng)大鼠PASMCs增殖的影響
3不同濃度UⅡ、urantide及PD98059對(duì)大鼠PASMCs ERK1/2、SAPK、p38 MAPK和Egr-1mRNA表達(dá)的影響
4 不同濃度UⅡ及urantide及PD98059對(duì)大鼠PASMCs p-ERK1/2、p-SAPK、p-p38 MAPK和Egr-1 蛋白表達(dá)的影響
討論
本文編號(hào):2898540
【文章來源】:中國病理生理雜志. 2014年11期 第2093-2097頁 北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【文章目錄】:
材料和方法
1 動(dòng)物
2 主要試劑
3 主要方法
3.1 大鼠PASMCs的培養(yǎng)及免疫熒光鑒定
3.2 Brd U摻入實(shí)驗(yàn)
3.3 Real-time PCR
3.4 Western blotting分析
4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
結(jié)果
1培養(yǎng)大鼠PASMCs鑒定
2 UⅡ?qū)ε囵B(yǎng)大鼠PASMCs增殖的影響
3不同濃度UⅡ、urantide及PD98059對(duì)大鼠PASMCs ERK1/2、SAPK、p38 MAPK和Egr-1mRNA表達(dá)的影響
4 不同濃度UⅡ及urantide及PD98059對(duì)大鼠PASMCs p-ERK1/2、p-SAPK、p-p38 MAPK和Egr-1 蛋白表達(dá)的影響
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