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Wnt3a基因對臍血來源CD34~+造血干/祖細胞體外擴增及定向分化作用的研究

發(fā)布時間:2020-12-09 15:07
  Wnt家族蛋白及其受體、調節(jié)蛋白等共同組成了復雜的信號通路,在動物的發(fā)育與干細胞命運的調控方面都起著重要的作用。Wnt信號通路不僅直接促進造血干細胞的自我更新,而且還通過影響造血干細胞微環(huán)境而間接地影響造血干細胞的功能。Wnt家族成員之一Wnt3a在造血干/祖細胞自我更新的過程中發(fā)揮著重要的作用。鑒于此我們通過構建攜帶Wnt3a基因的腺病毒感染原代小鼠骨髓基質細胞,建立轉基因滋養(yǎng)層細胞。通過與臍血CD34+造血干/祖細胞的共培養(yǎng)研究轉基因滋養(yǎng)層細胞擴增CD34+造血干/祖細胞的作用。實驗結果顯示,與普通滋養(yǎng)層加細胞因子組相比,轉基因滋養(yǎng)層加細胞因子組培養(yǎng)的CD34+造血干/祖細胞集落形成能力(CFC)是其1.55±0.06倍;混合集落形成能力是其1.95±0.26倍;高增殖潛能集落形成能力(HPP-CFC)是其1.45±0.40倍;LTC-IC活性是其3.83±0.86倍。結果表明Wnt3a轉基因滋養(yǎng)層細胞通過分泌Wnt3a蛋白,實現其體外擴增造血干/祖細胞的作用。 我們在轉Wnt3a滋養(yǎng)層細胞成功培養(yǎng)擴增CD34... 

【文章來源】:中國人民解放軍軍事科學院北京市

【文章頁數】:100 頁

【學位級別】:博士

【文章目錄】:
中文摘要
英文摘要
縮略語表
前言
主要儀器
主要試劑
第一部分 轉 Wnt3a小鼠骨髓基質細胞滋養(yǎng)層的建立與檢測
    第一節(jié) Wnt3a基因的克隆
        材料與方法
        實驗結果
    第二節(jié) pAd-Wnt3a重組腺病毒質粒的構建
        材料與方法
        實驗結果
    第三節(jié) 轉Wnt3a小鼠骨髓基質細胞滋養(yǎng)層的建立
        材料與方法
        實驗結果
    討論
    參考文獻
+造血干/祖細胞擴增作用">第二部分 轉Wnt3a小鼠骨髓基質細胞滋養(yǎng)層對 CD34+造血干/祖細胞擴增作用
    材料與方法
    實驗結果
    討論
    參考文獻
+造血干/祖細胞的紅系分化潛能的影響">第三部分 轉Wnt3a小鼠骨髓基質細胞滋養(yǎng)層對擴增后 CD34+造血干/祖細胞的紅系分化潛能的影響
    材料與方法
    實驗結果
    討論
    參考文獻
+造血干/祖細胞紅系分化潛能機制的初步探討">第四部分 Wnt3a影響 CD34+造血干/祖細胞紅系分化潛能機制的初步探討
    材料與方法
    實驗結果
    討論
    參考文獻
總結
致謝
博士期間已完成或發(fā)表的論著
附錄 博士期間發(fā)表的部分論著


【參考文獻】:
期刊論文
[1]Wnt3a轉基因基質細胞的建立及其對臍血CD34+造血干/祖細胞擴增作用的研究[J]. 師偉,韓姝,李艷華,謝小燕,施雙雙,陳琳,白慈賢,閆舫,南雪,王韞芳,裴雪濤.  生物化學與生物物理進展. 2005(09)
[2]骨髓來源基質細胞促進造血重建的實驗研究[J]. 施小鳳,傅晉翔,朱孝中.  中國血液流變學雜志. 2004(01)



本文編號:2907057

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