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靶向caspase-8小發(fā)夾RNA減輕去血清/缺氧誘導的人骨髓間充質(zhì)干細胞凋亡~

發(fā)布時間:2020-12-11 03:06
  目的:研究caspase-8小發(fā)夾RNA(Cap8 shRNA)對人骨髓間充質(zhì)干細胞(hMSCs)凋亡的調(diào)控作用。方法:構(gòu)建2個靶向人caspase-8基因的穿梭質(zhì)粒pAd-Cap8 shRNA,并鑒定可有效抑制人HEK293細胞中caspase-8表達的pAd-Cap8 shRNA質(zhì)粒。構(gòu)建表達Cap8 shRNA的重組腺病毒質(zhì)粒,并在HEK293細胞中包裝、擴增重組腺病毒rAd-Cap8 shRNA。檢測rAd-Cap8 shRNA感染的hMSCs中caspase-8 mRNA和蛋白表達。利用annexin V/PI雙染色法和caspase-8活性檢測分析去血清/缺氧誘導的hMSCs凋亡變化,利用熒光定量PCR檢測hMSCs中VEGF、肝細胞生長因子1(HGF)、胰島素樣生長因子(IGF-1)、Bcl-2和Bcl-xL mRNA表達。結(jié)果:通過定量PCR篩選到可有效抑制caspase-8表達的pAd-Cap8 shRNA質(zhì)粒。成功構(gòu)建Cap8 shRNA的重組腺病毒質(zhì)粒,并包裝、擴增重組腺病毒rAd-Cap8 shRNA。熒光定量PCR和Western blotting結(jié)果證實rA... 

【文章來源】:中國病理生理雜志. 2014年07期 第1172-1178頁 北大核心

【文章頁數(shù)】:7 頁


本文編號:2909791

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