雙功能分子hIL-2/mGM-CSF蛋白的改建、表達(dá)、純化及功能的初步研究
發(fā)布時(shí)間:2020-12-17 08:52
腫瘤的發(fā)生發(fā)展是腫瘤細(xì)胞與宿主免疫系統(tǒng)之間不斷較量的結(jié)果。理論上,宿主免疫系統(tǒng)能監(jiān)視并清除體內(nèi)發(fā)生突變的細(xì)胞。但體內(nèi)的腫瘤細(xì)胞會(huì)利用包括免疫平衡偏離在內(nèi)的多種途徑抑制和逃避宿主免疫系統(tǒng)的監(jiān)視與殺傷,其核心在于阻止腫瘤抗原提呈給效應(yīng)細(xì)胞,使效應(yīng)細(xì)胞不能有效執(zhí)行監(jiān)視和殺傷功能。 白細(xì)胞介素-2(interleukin-2,IL-2)和粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(granulocyte-macrophage colony-stimulating factor,GM-CSF)是腫瘤免疫治療中常用的兩種細(xì)胞因子,前者促進(jìn)T細(xì)胞增殖和殺傷功能,在局部的腫瘤排斥反應(yīng)中起決定作用;后者是促進(jìn)多種血液細(xì)胞、尤其是樹(shù)突狀細(xì)胞與單核-巨噬細(xì)胞增殖分化的生長(zhǎng)因子,可增強(qiáng)宿主體內(nèi)抗原呈遞效應(yīng),誘導(dǎo)系統(tǒng)性的抗腫瘤免疫反應(yīng);這兩種細(xì)胞因子聯(lián)合應(yīng)用的效果在多項(xiàng)研究中已有證實(shí)。但其差異甚大的生物學(xué)特性導(dǎo)致兩者在實(shí)際應(yīng)用中往往不能很好地協(xié)同作用,臨床療效欠佳。 本所早年構(gòu)建成功hIL-2/hGM-CSF融合蛋白,為了進(jìn)行體內(nèi)研究,還構(gòu)建成功hIL-2/mGM-CSF融合蛋白。預(yù)期這一種融合蛋白在保持兩種細(xì)胞因...
【文章來(lái)源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁(yè)數(shù)】:91 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
間接免疫熒光試驗(yàn)流式分析結(jié)果認(rèn)王Hl一3細(xì)胞
Right:B16F10eellswithhI-L2一mGM一CSF圖1一8間接免疫熒光試驗(yàn)流式分析結(jié)果—B16F10細(xì)胞Fiugerl一8AFCSofnIdieretlyImmune一FluoreseeneeExperimentsofrB16F10eells表1一6間接免疫熒光試驗(yàn)流式分析結(jié)果:陽(yáng)性細(xì)胞率的t檢驗(yàn)分析結(jié)果—B16F10細(xì)胞Tablel一6ttestofpositiveProPortionofrB16FIOeellsGoruPsTestPositviePorPortion(x士s)62.383士0.22542.463士2.07516.5290.003Negatvieeonortl3玫tf:WEHI一3eellswithoutRight:WEHI一3eellswithhIL一2一mGM一CSFhlL?
b.對(duì)照組:B16+認(rèn)呢Hl一3。Note:B16細(xì)胞用紅色熒光染料SNA只F染色,WEHI一3細(xì)胞用綠色熒光染料CFDA一SE染色。圖1一10促結(jié)合試驗(yàn)結(jié)果Fiugrel一10ResuirsofCellsCombinationExperiments
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]hdll1ext-Fc融合蛋白真核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)[J]. 張萍,賈洪霞,周鵬,韓驊. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2004(01)
[2]兩種hIL-6/GM-CSF融合蛋白基因的構(gòu)建、表達(dá)及活性比較[J]. 孫強(qiáng)明,孫茂盛,易山,曹增,別俊,戴長(zhǎng)柏,徐維明. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2004(01)
[3]活體染料CFDA-SE在淋巴細(xì)胞增殖研究中的應(yīng)用[J]. 肇靜嫻,曾耀英,何賢輝,王南,狄靜芳,曾山. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2003(02)
[4]包涵體蛋白體外復(fù)性的研究進(jìn)展[J]. 方敏,黃華樑. 生物工程學(xué)報(bào). 2001(06)
[5]hIL-2/mGM-CSF融合蛋白的構(gòu)建及表達(dá)[J]. 夏榮,林來(lái)興妹,周宏偉,周明乾,陳澤洪,胡志明,王小寧. 中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2001(10)
[6]包含體內(nèi)重組蛋白質(zhì)的復(fù)性[J]. 吳麗金,陳宇光. 生命的化學(xué). 2001(04)
[7]重組人粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子雙體融合分子的三級(jí)結(jié)構(gòu)模建[J]. 饒嚴(yán),顧維豐,馬大龍. 北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 1999(05)
[8]人IL-2/GM-CSF融合基因的克隆及序列測(cè)定[J]. 黃樹(shù)其,林來(lái)興妹,方向東,高基民,王小寧,劉新垣. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 1998(02)
[9]人IL2/GMCSF融合基因的克隆及序列測(cè)定[J]. 黃樹(shù)其,陳德元,黃美華,王小寧,方向東. 解放軍廣州醫(yī)高專學(xué)報(bào). 1997(02)
[10]IL2-GMCSF融合蛋白高效表達(dá)條件的初步研究[J]. 黃樹(shù)其,林來(lái)興妹,齊錫位,殷志新,劉新垣,方向東,高基民,王小寧. 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 1996(03)
本文編號(hào):2921759
【文章來(lái)源】:南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁(yè)數(shù)】:91 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
間接免疫熒光試驗(yàn)流式分析結(jié)果認(rèn)王Hl一3細(xì)胞
Right:B16F10eellswithhI-L2一mGM一CSF圖1一8間接免疫熒光試驗(yàn)流式分析結(jié)果—B16F10細(xì)胞Fiugerl一8AFCSofnIdieretlyImmune一FluoreseeneeExperimentsofrB16F10eells表1一6間接免疫熒光試驗(yàn)流式分析結(jié)果:陽(yáng)性細(xì)胞率的t檢驗(yàn)分析結(jié)果—B16F10細(xì)胞Tablel一6ttestofpositiveProPortionofrB16FIOeellsGoruPsTestPositviePorPortion(x士s)62.383士0.22542.463士2.07516.5290.003Negatvieeonortl3玫tf:WEHI一3eellswithoutRight:WEHI一3eellswithhIL一2一mGM一CSFhlL?
b.對(duì)照組:B16+認(rèn)呢Hl一3。Note:B16細(xì)胞用紅色熒光染料SNA只F染色,WEHI一3細(xì)胞用綠色熒光染料CFDA一SE染色。圖1一10促結(jié)合試驗(yàn)結(jié)果Fiugrel一10ResuirsofCellsCombinationExperiments
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]hdll1ext-Fc融合蛋白真核表達(dá)載體的構(gòu)建及表達(dá)[J]. 張萍,賈洪霞,周鵬,韓驊. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2004(01)
[2]兩種hIL-6/GM-CSF融合蛋白基因的構(gòu)建、表達(dá)及活性比較[J]. 孫強(qiáng)明,孫茂盛,易山,曹增,別俊,戴長(zhǎng)柏,徐維明. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2004(01)
[3]活體染料CFDA-SE在淋巴細(xì)胞增殖研究中的應(yīng)用[J]. 肇靜嫻,曾耀英,何賢輝,王南,狄靜芳,曾山. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2003(02)
[4]包涵體蛋白體外復(fù)性的研究進(jìn)展[J]. 方敏,黃華樑. 生物工程學(xué)報(bào). 2001(06)
[5]hIL-2/mGM-CSF融合蛋白的構(gòu)建及表達(dá)[J]. 夏榮,林來(lái)興妹,周宏偉,周明乾,陳澤洪,胡志明,王小寧. 中國(guó)免疫學(xué)雜志. 2001(10)
[6]包含體內(nèi)重組蛋白質(zhì)的復(fù)性[J]. 吳麗金,陳宇光. 生命的化學(xué). 2001(04)
[7]重組人粒細(xì)胞-巨噬細(xì)胞集落刺激因子雙體融合分子的三級(jí)結(jié)構(gòu)模建[J]. 饒嚴(yán),顧維豐,馬大龍. 北京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 1999(05)
[8]人IL-2/GM-CSF融合基因的克隆及序列測(cè)定[J]. 黃樹(shù)其,林來(lái)興妹,方向東,高基民,王小寧,劉新垣. 細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 1998(02)
[9]人IL2/GMCSF融合基因的克隆及序列測(cè)定[J]. 黃樹(shù)其,陳德元,黃美華,王小寧,方向東. 解放軍廣州醫(yī)高專學(xué)報(bào). 1997(02)
[10]IL2-GMCSF融合蛋白高效表達(dá)條件的初步研究[J]. 黃樹(shù)其,林來(lái)興妹,齊錫位,殷志新,劉新垣,方向東,高基民,王小寧. 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 1996(03)
本文編號(hào):2921759
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