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多囊卵巢綜合征易感基因dennd1a在斑馬魚模型中的表達特性

發(fā)布時間:2020-12-23 19:36
  目的探討多囊卵巢綜合征(PCOS)易感基因dennd1a在斑馬魚模型胚胎發(fā)育過程以及成魚不同器官中的表達,構(gòu)建適用于PCOS分子機制研究的斑馬魚實驗動物模型。方法采用反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)及實時熒光定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)技術(shù),檢測dennd1a基因在斑馬魚中的表達特性。利用胚胎整體原位雜交(WISH)方法,觀察dennd1a基因在斑馬魚胚胎內(nèi)的表達及分布。結(jié)果 qRT-PCR結(jié)果顯示斑馬魚dennd1a mRNA的表達水平隨著胚胎的發(fā)育而增加,且在多個組織中均有表達,于神經(jīng)系統(tǒng)和雄性生殖系統(tǒng)中存在高表達。WISH結(jié)果表明該基因早期主要在神經(jīng)系統(tǒng)表達。結(jié)論斑馬魚dennd1a基因的表達在胚胎早期發(fā)育中發(fā)揮重要作用,基因高表達尤其發(fā)現(xiàn)于中樞神經(jīng)系統(tǒng)和雄性生殖系統(tǒng),提示該基因的表達可能通過影響神經(jīng)內(nèi)分泌功能,調(diào)控雄激素的合成或釋放,誘發(fā)PCOS并導(dǎo)致相關(guān)表型。 

【文章來源】:山東大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2019年01期 北大核心

【文章頁數(shù)】:7 頁

【部分圖文】:

多囊卵巢綜合征易感基因dennd1a在斑馬魚模型中的表達特性


雌性斑馬魚的不同器官中dennd1amRNA的定性表達Fig.3Qualitativeexpressionofdennd1amRNAindifferentorgansoffemalezebrafish

定量表達,斑馬魚


、骨髓、腎臟不同器官中廣泛表達。定量結(jié)果顯示,dennd1a的表達在腦、眼、骨髓以及肝臟和鰭中表達水平較高,而在肌肉、脾、腎、鰓、卵巢、腸中表達水平較低。在雌魚中,dennd1a在腦中的表達是在腸的(12.06±1.55)倍(P<0.01);而在雄魚中,dennd1a在腦的表達是腸的(20.52±1.57)倍(P<0.01)。圖3雌性斑馬魚的不同器官中dennd1amRNA的定性表達Fig.3Qualitativeexpressionofdennd1amRNAindifferentorgansoffemalezebrafish圖4雌性斑馬魚的不同器官中dennd1amRNA的定量表達Fig.4Quantitativeexpressionofdennd1amRNAindifferentorgansoffemalezebrafish2.2成體動物卵巢與精巢中dennd1amRNA的定量表達見圖7。dennd1a在成年雄魚精巢的表達量是雌魚卵巢表達量的(3.34±0.44)倍(P<0.01)。2.3斑馬魚胚胎整體原位雜交2.3.1斑馬魚1日齡胚胎整體原位雜交見圖8。dennd1a主要在神經(jīng)系統(tǒng)表達,包括端腦頂蓋、后腦、松果體、側(cè)后結(jié)節(jié)以及視網(wǎng)膜。在松果體和視網(wǎng)膜,dennd1a的表達局限于少數(shù)神經(jīng)細胞(如視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞;紫色),而在中腦和后腦,dennd1a基因的表達則較為彌散(淺紫色;白色星號)。圖5雄性斑馬魚的不同器官中dennd1amRNA的定性表達Fig.5Qualitativeexpressionofdennd1amRNAindifferentorgansofmalezebrafish圖6雄性斑馬魚的不同器官中dennd1amRNA的定量表達Fig.6Quantitativeexpressionofdennd1amRNAindifferentorgansofmalezebrafish圖7成體卵巢與精巢中dennd1amRNA的定量表達Fig.7Quantitativeexpressionofd

斑馬魚,定量表達,整體原位雜交,松果體


alezebrafish2.2成體動物卵巢與精巢中dennd1amRNA的定量表達見圖7。dennd1a在成年雄魚精巢的表達量是雌魚卵巢表達量的(3.34±0.44)倍(P<0.01)。2.3斑馬魚胚胎整體原位雜交2.3.1斑馬魚1日齡胚胎整體原位雜交見圖8。dennd1a主要在神經(jīng)系統(tǒng)表達,包括端腦頂蓋、后腦、松果體、側(cè)后結(jié)節(jié)以及視網(wǎng)膜。在松果體和視網(wǎng)膜,dennd1a的表達局限于少數(shù)神經(jīng)細胞(如視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞;紫色),而在中腦和后腦,dennd1a基因的表達則較為彌散(淺紫色;白色星號)。圖5雄性斑馬魚的不同器官中dennd1amRNA的定性表達Fig.5Qualitativeexpressionofdennd1amRNAindifferentorgansofmalezebrafish圖6雄性斑馬魚的不同器官中dennd1amRNA的定量表達Fig.6Quantitativeexpressionofdennd1amRNAindifferentorgansofmalezebrafish圖7成體卵巢與精巢中dennd1amRNA的定量表達Fig.7Quantitativeexpressionofdennd1amRNAinadultze-brafishovariesandtestis

【參考文獻】:
期刊論文
[1]DENND1A基因多態(tài)性與多囊卵巢綜合征易感性的Meta分析[J]. 彭丹紅,羅嘉莉,凌麗,李雪琳,任慕蘭.  南京醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2017(10)
[2]microRNA-183在PCOS胰島素抵抗中的表達及其臨床意義[J]. 李婧博,劉洪彬,賈月月,王澤,孫梅,石玉華.  山東大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2017(01)
[3]多囊卵巢綜合征易感基因與代謝表型相關(guān)性分析[J]. 孫梅,盛燕,馬增香,陳子江,唐蓉.  中華婦產(chǎn)科雜志. 2014 (06)



本文編號:2934243

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