發(fā)布時(shí)間：2020-11-20 20:12

　　 本文通過(guò)篩選出具有良好抑菌作用的中藥,同時(shí)這些中藥也有一定的增加抗菌藥藥效的作用,這些中藥作為后期組方的候選藥材,確定榆梔散組方(由地榆、梔子和大黃組成),研究榆梔散抑菌作用與臨床應(yīng)用效果,為合理用藥提供科學(xué)依據(jù)。1.選用CLSI推薦的腸桿菌科常用的幾大類抗菌藥物對(duì)臨床分離的16株大腸桿菌進(jìn)行初步的MIC測(cè)定,通過(guò)表型做出初步的篩選,進(jìn)而根據(jù)CLSI所推薦的初篩和確證試驗(yàn)檢測(cè)耐藥菌株是否產(chǎn)ESBLs,在獲得產(chǎn)ESBLs的基礎(chǔ)上通過(guò)PCR對(duì)產(chǎn)ESBLs的常見耐藥基因進(jìn)行檢測(cè),進(jìn)而確定分離的耐藥大腸桿菌所含有的ESBLs的具體的基因型。結(jié)果表明,16株分離株都含有耐藥基因,含兩種耐藥基因7株,含三種耐藥基因3株,分離菌株均產(chǎn)ESBLs,對(duì)頭孢噻肟鈉、頭孢曲松鈉、頭孢他啶、阿莫西林等耐藥率高達(dá)100%,對(duì)其他抗菌藥也有不同程度的耐藥。2.采用12種中藥的亞抑菌濃度與大腸桿菌耐藥的抗菌藥物聯(lián)合對(duì)所分離的耐藥大腸桿菌進(jìn)行傳代,測(cè)定候選中藥對(duì)傳代的耐藥大腸桿菌菌所耐受的抗菌藥物MIC值的影響,優(yōu)選出具有抑制耐藥大腸桿菌作用的中藥,確定由地榆、梔子、大黃組成的榆梔散,進(jìn)而采用上述方法測(cè)定榆梔散對(duì)傳代耐藥菌MIC值的影響。結(jié)果表明榆梔散可增強(qiáng)青霉素類、頭孢菌素類、氟喹諾酮類等抗菌藥的抑菌作用。3.選取健康10日齡肉雞進(jìn)行耐藥菌株的體內(nèi)攻毒試驗(yàn),采用榆梔散水煮液、白頭翁散水煮液分別治療。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,高劑量和中劑量榆梔散對(duì)大腸桿菌人工感染雞具有很好的治療效果,其治愈率分別達(dá)到了90.0%和83.3%,優(yōu)于與之相對(duì)應(yīng)的白頭翁散,其治愈率僅為73.3%,表明榆梔散治療雞大腸桿菌感染的效果要優(yōu)于傳統(tǒng)的白頭翁散。4.根據(jù)菌體細(xì)胞壁超微結(jié)構(gòu)、菌液中AKP含量、胞外可溶性蛋白含量、菌體總蛋白以及細(xì)菌DNA等五個(gè)指標(biāo),分析榆梔散對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌的抑菌作用。結(jié)果表明,榆梔散主要是破壞了細(xì)菌結(jié)構(gòu)的完整性,細(xì)胞壁、細(xì)胞膜通透性增加,使得菌液中AKP含量、胞外可溶性蛋白含量增加,雖然對(duì)菌體總蛋白含量沒有明顯影響,但抑制了某些菌體蛋白以及DNA的合成,從而影響菌體的正常代謝,而發(fā)揮抑菌作用。5.應(yīng)用榆梔散水煎液對(duì)5個(gè)品種共1058只大腸桿菌病病雞進(jìn)行了臨床效果試驗(yàn),結(jié)果表明榆梔散水煎液對(duì)耐藥菌株引起的雞大腸桿菌病具有較好的療效,平均治愈率為91.6%,有效率達(dá)89.3%。相比白頭翁水煮液的治療效果,榆梔散水煮液平均有效率提高了7.9%,平均治愈率提高了6.0%,為在養(yǎng)雞場(chǎng)采用榆梔散治療雞大腸桿菌病提供了理論和技術(shù)支持。
【學(xué)位單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S853.7
【部分圖文】：

PCR擴(kuò)增結(jié)果

57圖4-1 榆梔散對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌作用后的透射電鏡圖Fig.4-1 TEM imagine of Yuzhi Powder extract effect on ESBLs-producing E.coli4.3.2 榆梔散對(duì)產(chǎn) ESBLs 大腸桿菌胞外 AKP 含量的影響見圖 4-2。不同濃度的水煮液作用 1h 后，AKP 量呈直線上升，3h 后 1/2MIC作用的 AKP 量達(dá)到最大值，隨后趨于平穩(wěn)；MIC 榆梔散水煮液作用約 3h 后菌液中的 AKP 量也達(dá)到最大值，但 AKP 的量要遠(yuǎn)大于 1/2MIC 組。對(duì)照組的堿性磷酸酶（AKP）含量無(wú)明顯變化，結(jié)果表明，不同濃度的榆梔散水煮液在短時(shí)間內(nèi)可破壞產(chǎn) ESBLs 耐藥大腸桿菌的細(xì)胞壁，進(jìn)而引起細(xì)胞壁通透性的增加，導(dǎo)致堿性磷酸酶（AKP）外滲

對(duì)細(xì)胞壁的破壞程度（AKP 的滲出量）與劑量呈依懶性，即隨著藥物濃度的提高，胞外 AKP 的含量逐漸提高，細(xì)胞壁的破壞程度愈強(qiáng)。圖4.2 榆梔散對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸桿菌胞外AKP活性的影響Fig.4.2 Effects of Yuzhi Powder on extracellular AKP activity in ESBLs-producingE.coli
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2891936