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HA117調(diào)控DPF3在法洛四聯(lián)癥發(fā)生中對心肌細(xì)胞分化作用機(jī)制的研究

發(fā)布時間:2020-11-18 17:01
   背景:法洛四聯(lián)癥是一種典型的先天性心臟畸形,其約占全部先天性心臟畸形的3%-5%,右心室流出道梗阻幾乎可以見于全部的法洛四聯(lián)癥患者。近年來右心室流出道發(fā)育異常和心肌細(xì)胞分化異常與法洛四聯(lián)癥的關(guān)系被廣泛報(bào)道,然而,同時包括大規(guī)模臨床樣本和體外實(shí)驗(yàn)的研究很罕見。HA117是一個新的抗分化長鏈非編碼RNA(Long noncoding RNA,LncRNA),先前的研究表明HA117在體內(nèi)和體外都與細(xì)胞分化密切相關(guān)。方法:為了探究HA117和法洛四聯(lián)癥的潛在關(guān)系,我們收集了84例行法洛四聯(lián)癥一期根治術(shù)患者的右心室流出道組織樣本,我們檢測了標(biāo)本HA117表達(dá)量水平并且收集了術(shù)前基線水平、圍術(shù)期數(shù)據(jù)、短期隨訪數(shù)據(jù),用以完成涉及橫斷面和短期預(yù)后的研究。我們觀察了HA117和其臨近下游基因DPF3的表達(dá)量以及DPF3啟動子區(qū)甲基化水平。在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,我們利用5'-氮雜胞苷和全反式維甲酸誘導(dǎo)了間充質(zhì)干細(xì)胞向心肌細(xì)胞分化,并對心肌細(xì)胞的標(biāo)志物、細(xì)胞干性標(biāo)志物和細(xì)胞行為學(xué)進(jìn)行了檢測。結(jié)果:McGoon比值、Nakata指數(shù)和左室末期舒張容積指數(shù)在HA117高表達(dá)組患者中降低,并且和HA117表達(dá)量呈負(fù)相關(guān)。HA117高表達(dá)組圍手術(shù)期的住院天數(shù)和ICU時間都更長,患者術(shù)后6月動脈血?dú)庋躏柡投鹊奶嵘贖A117高表達(dá)組相對較小。HA117高表達(dá)組DPF3啟動子區(qū)甲基化水平升高。在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中,干擾HA117的表達(dá)可以使得心肌細(xì)胞標(biāo)志物cTnT和Cx43表達(dá)升高,使得細(xì)胞干性標(biāo)志物下調(diào),同時可以促進(jìn)細(xì)胞侵襲能力和遷移能力,降低增殖能力。結(jié)論:HA117是法洛四聯(lián)癥畸形嚴(yán)重程度的危險(xiǎn)因素,是法洛四聯(lián)癥短期預(yù)后的風(fēng)險(xiǎn)因素,下調(diào)HA117可以促進(jìn)干細(xì)胞向心肌樣細(xì)胞分化,降低干細(xì)胞干性,并且影響細(xì)胞行為學(xué)。
【學(xué)位單位】:重慶醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:博士
【學(xué)位年份】:2018
【中圖分類】:R725.4
【部分圖文】:

原位雜交,患者,右心室流出道,女性


鏡下觀察。 和 ISH 檢測 HA117 表達(dá)情況測右心室流出道組織中 HA117 的表達(dá)情況,我們采用了 QRNA 表達(dá)量,并通過原位雜交確認(rèn)(圖 1.1)。 原位雜交可心室流出道組織中 HA117 在胞核表達(dá)(圖 1.1-A)。QPCR 得到者 HA117 表達(dá)量為 4.812 ± 1.319。為便于分組,取 84 名患者達(dá)量均值為 1.0(圖 1.1-B)。根據(jù) HA117 的相對表達(dá)將患者分組臨界值。 在所有 84 位患者(55 位男性和 29 位女性)中,相對表達(dá)量超過 1.0。

右心室流出道,患者,四聯(lián)癥,均值


35圖 2.1 HA117 和 DPF3 mRNA 在組織的表達(dá)情況igure 2.1 Expression of HA117 and DPF3 in clinical sampl四聯(lián)癥患者右心室流出道組織中是否存在心肌細(xì)QPCR 檢測了右心室流出道組織中的不成熟心 的表達(dá)量。TOF 組患者 GATA-4 mRNA 的相對表患者的表達(dá)水平在均值以上,49 例在均值以下。對量為 1.000±0.330。TOF 組和對照組 GATA-4 mRN

蛋白,右心室流出道,蘇木精-伊紅染色,對照組


圖 2.3 cTnT 蛋白在組織樣本中的表達(dá)Figure 2.3 Expression of cTnT proteins by IHC2.3 蘇木精-伊紅染色檢測組織結(jié)構(gòu)為了觀察TOF組和對照組患者右心室流出道的心肌結(jié)構(gòu),我們采用HE染色,可見法洛四聯(lián)癥患者心肌組織肥大、核分散,有不成熟細(xì)胞核。對照組心肌組織結(jié)構(gòu)齊整、核集中(圖 2.4)。
【參考文獻(xiàn)】

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1 陳建飛;金先慶;;新耐藥基因HA117在神經(jīng)母細(xì)胞瘤中的表達(dá)及臨床意義[J];浙江中西醫(yī)結(jié)合雜志;2015年11期

2 羅媛圓;滕銀平;劉行;李力;金先慶;;先天性腸無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥患兒中血清維生素A及腸組織維甲酸受體α和HA117的表達(dá)特點(diǎn)[J];解剖學(xué)報(bào);2015年04期

3 胡田田;徐酉華;沈亞莉;伍俞霓;郭改麗;王翠翠;;新基因HA117編碼蛋白在兒童急性白血病中的表達(dá)及其臨床意義[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào);2012年03期

4 牟廷剛;金先慶;趙利華;丁雄輝;陳建飛;孫艷輝;李昆昆;王士奇;;ATRA耐藥基因HA117相關(guān)蛋白在肺癌和乳腺癌組織中的表達(dá)特點(diǎn)及臨床意義[J];重慶醫(yī)學(xué);2011年16期

5 李昆昆;金先慶;趙利華;丁雄輝;陳建飛;孫艷輝;牟廷剛;王士奇;;新基因HA117在腸腺癌中的表達(dá)及意義[J];重慶醫(yī)學(xué);2011年14期

6 車艷;徐酉華;鄭改煥;郭玉霞;;新基因HA117在兒童急性白血病中的表達(dá)及其臨床意義[J];四川大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年05期

7 鄭改煥;金先慶;郭玉霞;羅慶;徐酉華;;新基因HA117在淋巴瘤細(xì)胞中的耐藥相關(guān)功能研究[J];腫瘤;2009年04期


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1 王士奇;先天性肛門直腸畸形發(fā)病的基因網(wǎng)絡(luò)調(diào)控機(jī)制研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

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3 郭玉霞;新基因HA117全長cDNA克隆及其耐藥功能的實(shí)驗(yàn)研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2008年

4 付勁蓉;ATRA誘導(dǎo)HL-60細(xì)胞產(chǎn)生MDR的相關(guān)基因篩選與克隆[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2003年


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1 李力;HA117對先天性腸無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥發(fā)病影響的探討[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

2 滕銀平;維甲酸相關(guān)基因HA117抗神經(jīng)元分化的初步研究[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2016年

3 羅媛圓;分化相關(guān)基因及維生素A對先天性腸無神經(jīng)節(jié)細(xì)胞癥的發(fā)病作用初探[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2015年

4 張玉青;ATRA耐藥基因HA117在肺癌組織中的表達(dá)特點(diǎn)及意義[D];山東大學(xué);2012年



本文編號:2888959

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