發(fā)布時間：2020-11-05 10:21

　　 目的 1.建立大鼠阿霉素腎病、腎硬化動物模型，應用水蛭素（脈血康腸溶膠囊）來治療大鼠阿霉素腎病、腎硬化，觀察其療效，評價其對腎病、腎硬化病理進展過程的作用，以期發(fā)現(xiàn)對腎病、腎硬化有治療作用的中成藥物， 2.探討水蛭素治療腎病、腎硬化的作用機理，從而更好地指導臨床上對腎病、腎硬化的治療。 材料與方法 將用阿霉素誘導形成腎病、腎硬化的Wistar大鼠50只,進行隨機分組，分為正常對照A組（10只）、腎病對照B組（10只）、腎硬化對照C組（10只）、腎病水蛭素治療組D組（10只）、腎硬化水蛭素治療E組（10只）。觀測各組大鼠血生化：尿蛋白、血漿白蛋白（ALB）、尿素氮（BUN）、肌酐（CR）、血脂（TG、CHO）及尿液分析：尿蛋白定性的變化，共監(jiān)測5次，分別為模型制造前、第一次尾靜脈注射阿霉素2周后、第二次尾靜脈注射阿霉素2周后、水蛭素灌胃治療前、4周灌胃實驗結束后。模型制造成功后，給予水蛭素灌胃治療，療程4周，之后將各組大鼠麻醉10%福爾馬林體循環(huán)灌注處死，留取雙側腎臟標本，常規(guī)方法進行組織脫水、石蠟包埋及切片，并進行HE法染色，光境下觀察腎組織中腎小球硬化、腎小管損傷及其它病理性損害的改變及其程度，并用免疫組化（SP法）觀察腎臟組織內轉化生長因子β1(TGF-β1)的分布及表達。通過上述指標來評估水蛭素藥物對腎病、腎硬化的治療效果。 結果 1.尿蛋白定性方面 第一次尾靜脈注射阿霉素后，B、C、D、E組均出現(xiàn)蛋白尿，第二次注射后C、E組蛋白量明顯較較第一次注射后增多。水蛭素治療4周后，D與B組、E組與C組蛋白定性可見明顯減少。 2.血生化方面 B、C、D、E組在第一次尾靜脈注射阿霉素2周后血總蛋白、白蛋白均出現(xiàn)不同程度的降低及血總膽固醇、甘油三酯的升高，第二次注射后C、E組低蛋白血癥、高脂血癥加重并出現(xiàn)輕度腎功能的損害血肌酐、尿素氮出現(xiàn)增高。經(jīng)水蛭素干預治療后，D組與B組相比血總膽固醇及甘油三酯可見明顯降低，血白蛋白及總蛋白有所回升，E組與D組比較除上述相同結果外，血肌酐、尿素也稍有降低。 3.腎組織HE染色病理方面 A組：大鼠腎臟外觀大小正常，質韌，表面光滑，腎皮質、髓質結構分界清晰,腎小球毛細血管壁未見增厚，血管絆未見閉塞，未見球囊粘連，未見系膜細胞、細胞外基質增生。各級腎小管及集合管結構可，腎小管上皮細胞未見空泡變性、脂滴樣變性、顆粒樣變性、玻璃樣變性或壞死，腎小管及集合管未見擴張、萎縮，管腔內未見管型,間質未見血管擴張、充血、炎癥細胞浸潤，小球、小管周圍及間質未見纖維增生。 B組:外觀蒼白,體積腫大，質韌，切面腎皮質與腎髓質結構欠清晰，系膜外基質輕度增生，腎小管上皮細胞可見不同程度的顆粒變性、空泡變性，腎小管及集合管腔內可見大量的蛋白管型,腎小管囊性擴張，腎小管間質炎癥細胞輕度浸潤。 C組：大鼠腎臟外觀黃，體積縮小，硬韌，表面呈顆粒，切面皮髓分界不清，腎小球系膜細胞、系膜基質增生，腎小球基底膜斷裂，有局灶分布的節(jié)段性硬化的腎小球，毛細血管節(jié)段性絆閉塞，毛細血管袢瘤樣擴張，腎小球與腎小囊粘連，球囊壁增厚，腎小球及腎小管周圍纖維增生明顯、伴有成纖維細胞浸潤，腎小管明顯萎縮，周圍腎小管代償性片狀擴張，腎小管上皮細胞脫落壞死、內皮細胞空泡變性，蛋白管型形成。腎間質重度炎性細胞浸潤。 D組：外觀稍蒼白，腫大的體積減輕，切面腎皮質、髓質結構欠清晰，病理變化各方面均較ADR腎病組有所緩解，腎小管及集合管腔內蛋白管型減輕,但仍較多，腎小管間質炎癥細胞浸潤減輕。 E組：外觀黃，稍變小。腎小球、腎小管、腎間質病理改變程度較硬化組緩解。 4.腎組織免疫組化方面 B組可見腎小管陽性表達，腎小球幾乎無表達；C組腎小管強陽性表達，腎小球陽性表達；D組腎小管陽性表達，較B組可見減輕；E組腎小球、腎小管陽性表達，與C組相比TGF-β1所形成的棕黃色沉淀物明顯減少。 結論 1.水蛭素能不同程度降低阿霉素腎病、腎硬化大鼠尿蛋白、血肌酐、尿素氮、血甘油三酯、總膽固醇，升高血總蛋白、白蛋白。 2.水蛭素能不同程度減輕阿霉素腎病、腎硬化大鼠的病理改變，降低腎小球硬化系數(shù)、腎小管間質損傷分數(shù)及腎小球小管TGF-β1的表達。 3.水蛭素的上述治療效果我們認為可能因為它的活血化瘀、抗凝、降低血脂，間接抗炎、抗增殖的作用，同時能降低TGF-β1表達改善腎功能，延緩腎臟損害的進展。
【學位單位】：泰山醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2014
【中圖分類】：R285.5;R-332
【部分圖文】：

各組大鼠體重-時間曲線圖

（a-d）各組血生化指標的直觀圖

圖 4 各組腎小球硬化系數(shù)直觀圖 圖 5 各組腎小管損傷分數(shù)直觀圖圖 6 腎間質 TGF-β1Area 免疫組化直觀圖（TGF-β1 陽性面積百分比）A B C D
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本文編號：2871502