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含c(RGDfk)環(huán)肽的自組裝納米復(fù)合物RPM/siRNA在腫瘤靶向治療中的應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2024-05-27 22:12
  研究背景雙鏈的小分子干擾RNA通過(guò)抑制特異性mRNA的轉(zhuǎn)錄所引起的基因沉默,被稱作是RNA干擾(RNAi),而且RNA干擾技術(shù)已經(jīng)使用了很長(zhǎng)的一段時(shí)間。小分子干擾RNA已經(jīng)引起了廣泛的關(guān)注,因?yàn)樗诙喾N疾病中有著非常有前景的治療效果,例如神經(jīng)系統(tǒng)疾病,傳染病和各種癌癥。但是,小分子干擾RNA技術(shù)在應(yīng)用到臨床環(huán)境之前仍然面臨著一系列的障礙,這些障礙主要與以下問(wèn)題相關(guān),例如:由于血清中酶的降解而導(dǎo)致的很差的藥代動(dòng)力學(xué)特征;細(xì)胞攝取率低;快速消除和沒(méi)有靶向特定的細(xì)胞類型的能力。因此,設(shè)計(jì)出能夠有效的運(yùn)載特異性的siRNA到靶組織的載體仍然是一個(gè)巨大的挑戰(zhàn),同時(shí)也是許多研究的熱點(diǎn)。如今,有許多可以自組裝形成超分子復(fù)合物的非病毒載體已經(jīng)被設(shè)計(jì)用來(lái)遞送小分子干擾RNA。例如,脂質(zhì)體,脂質(zhì)體復(fù)合物,穩(wěn)定的核酸-脂質(zhì)顆粒,陽(yáng)離子聚合物和肽類等已經(jīng)被利用來(lái)保護(hù)小分子干擾RNA,以避免其在轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中被不必要的降解。而且,這些載體可以被不同的靶向性配體所修飾從而提高它們的組織靶向能力,這些配體包括:精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸(RGD肽),葉酸,轉(zhuǎn)體和抗體。RGD肽及其結(jié)構(gòu)相關(guān)的化合物是研究最多的配體,它們屬于...

【文章頁(yè)數(shù)】:131 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

圖1-2:投射電鏡觀察RPM/siRNA納米復(fù)合物的結(jié)果

圖1-2:投射電鏡觀察RPM/siRNA納米復(fù)合物的結(jié)果

pla打e?structure;?(C):?The?mechanism?for?the?formatio打?of?RPM/si民NA?打anoparticle?complexes.??3.2?RPM/siRNA納米復(fù)合物的形態(tài)研究(投射電鏡觀察)??經(jīng)投射電鏡對(duì)RPM/siRNA....


圖2-1.流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞膜表面的avp3受體的表達(dá)

圖2-1.流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞膜表面的avp3受體的表達(dá)

3.2.1不同比例的艮PM溶液和siRNA-cy5溶液混合后進(jìn)入HUVEC細(xì)胞的攝取??情況??由圖2-2所示:在HUVEC細(xì)胞中,當(dāng)RPM溶液與siRNA-cy5溶液的體積??比為1.5:1化siRNA-Cy5大量聚集在細(xì)胞質(zhì)中,其他比例下,SiRNA-Cy5紅色??巧光都較弱....


圖2-2:?HUVEC細(xì)胞在轉(zhuǎn)染不同比例組成的RA

圖2-2:?HUVEC細(xì)胞在轉(zhuǎn)染不同比例組成的RA

3.2.2?RPM/siRNA-cy5納米復(fù)合物進(jìn)入不同細(xì)胞的狀況W及在HUVEC細(xì)胞中??隨著轉(zhuǎn)染時(shí)間的增加在分布上發(fā)生的變化??如圖2-3所示:在轉(zhuǎn)染RPM/siRNA-巧5納米復(fù)合物6個(gè)小時(shí)W后,??siRNA-cy5均勻的分布在HUVEC細(xì)胞和A549細(xì)胞的細(xì)胞質(zhì)中,環(huán)繞....


圖2-3:不同的細(xì)胞在轉(zhuǎn)染RPM/siRNA-cy5納米復(fù)合物化后的共聚焦成像圖(A)

圖2-3:不同的細(xì)胞在轉(zhuǎn)染RPM/siRNA-cy5納米復(fù)合物化后的共聚焦成像圖(A)

transfection.?Scale?bar?is?20?u?m.??3.2.3?RPM/siRNA-cy5納米復(fù)合物對(duì)。V目3受體的特異靴向性??如圖2-4所示:在HUVEC細(xì)胞中使用了抗a?V目3受體封閉30分鐘W后再??轉(zhuǎn)染RPM/siRNA-cy5納米復(fù)合物,在細(xì)胞質(zhì)中....



本文編號(hào):3983097

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