精索靜脈曲張大鼠睪丸生精上皮細胞中自噬的研究
發(fā)布時間：2020-12-02 10:36
背景與目的:在生理或應(yīng)激狀態(tài)下,自噬通過及時降解細胞內(nèi)受損的蛋白或細胞器等,在維持細胞穩(wěn)定,調(diào)節(jié)細胞免疫,保持細胞干性對抗細胞衰老及凋亡中發(fā)揮重要作用。而自噬在精索靜脈曲張的研究中鮮有報道。本實驗通過精索靜脈曲張大鼠模型,觀察睪丸生精上皮細胞中細胞凋亡及自噬的表達情況,并進行相關(guān)性分析,為精索靜脈曲張致不育機制研究提供新思路。方法:取40只雄性SD大鼠,隨機分為正常對照組、VC組（VC造模組）、VC手術(shù)組（VC+手術(shù)治療組）、假手術(shù)組,每組10只。正常對照組不做任何處理,VC組和VC手術(shù)組行精索靜脈曲張造模,假手術(shù)組打開腹腔但不做任何處理。第30天時對VC手術(shù)組行左側(cè)精索靜脈高位結(jié)扎手術(shù)治療。第60天時對所有組大鼠取左側(cè)睪丸標(biāo)本。睪丸組織行HE染色觀察大鼠曲精小管結(jié)構(gòu)變化;TUNEL染色觀察生精上皮細胞凋亡情況;透射電子顯微鏡觀察生精小管上皮細胞中自噬體、自噬溶酶體等;Western-blot,RT-PCT檢測LC3和Beclinl水平的變化;采用Logistic回歸對Western-blot中LC3-Ⅱ/Ⅰ與生精上皮細胞凋亡指數(shù)進行分析。結(jié)果:HE染色可見VC組中睪丸部分曲精小管結(jié)構(gòu)...
【文章來源】：武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：50 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
圖１各組大鼠睪丸組織光學(xué)顯微鏡下形態(tài)學(xué)觀察（ＨＥ，?ｌ〇ｘｌ〇）??
圖Ｄ，睪丸組織狀況則與圖Ａ類似。??５．２透射電鏡觀察??通過透射電子顯微鏡觀察各組生精上皮細胞（見圖２），正常組、假手術(shù)組??中生精上皮細胞形態(tài)規(guī)則，較少見明顯腫脹的細胞器；自噬小體，溶酶體及自噬??溶酶體也比較少見。ＶＣ組中可見部分生精上皮細胞形態(tài)欠佳，線粒體，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)??等細胞器腫脹；另外其細胞中可見較多的自噻小體，成熟的自噬溶酶體。ＶＣ手??術(shù)組中細胞形態(tài)尚規(guī)整，線粒體等細胞器腫脹明顯；自噬體、成熟的自噬溶酶體??也較為常見，但相對于ＶＣ組來說，數(shù)量相對要少，但要比正常組要明顯多。??１１??
５．３ＴＵＮＥＬ染色觀察??對各組睪丸組織進行ＴＵＮＥＬ染色，然后在４０ｘ１０倍鏡下行“弓”字觀察（見??圖３）。正常組及假手術(shù)組中曲精小管規(guī)則，細胞豐富且有序排列，較少見生精??上皮細胞凋亡。而ＶＣ組及ＶＣ手術(shù)治療組可見部分曲精小管變形明顯，細胞稀??疏且排布混亂，凋亡細胞明顯增多。但ＶＣ組睪丸曲精小管的破壞程度要比ＶＣ??手術(shù)治療組更為嚴(yán)重。??根據(jù)表１各組生精上皮細胞凋亡指數(shù)可以看出，正常組與假手術(shù)組之間睪??丸細胞凋亡指數(shù)無顯著差異（尸＞〇．〇５）。然而ＶＣ組中凋亡指數(shù)達２０．０６±２．３３°／〇??顯著高于正常組的２．９６±０．８９％?（Ｐ＜０．０１）。ＶＣ手術(shù)治療組的凋亡指數(shù)要明顯低??于ＶＣ組，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義〇Ｐ＜?０．０１）。??１２??
【參考文獻】：
期刊論文
[1]通精靈對實驗性精索靜脈曲張大鼠精子DNA完整性與睪丸組織氧化應(yīng)激的影響[J]. 杜寶昕,鄭軍狀,劉冰,陶方澤,方躍坤,徐文麗,崔云. 中華男科學(xué)雜志. 2017(11)
[2]精索靜脈曲張大鼠睪丸細胞自噬的初步研究[J]. 朱少明,余偉民,饒婷,阮遠,李浩勇,楊瀟,寧金卓,袁潤,趙勝,程帆. 現(xiàn)代泌尿外科雜志. 2017(05)
[3]針挑治療對精索靜脈曲張不育患者血液流變指標(biāo)及療效的影響[J]. 陳棟,何肖,陳卓銘,胡雷,鐘鍵,洪衍波,黃君,章岳娟,鄭富仕. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2017(03)
[4]加味桂枝茯苓湯治療腎虛血瘀型精索靜脈曲張性不育患者療效觀察[J]. 黃小慶,蘇勁松,徐云森,王曉文,郭宇明,嚴(yán)文兵,吳江平,龍云,招活,高榮芳. 中國實驗方劑學(xué)雜志. 2017(08)
[5]精索靜脈顯微手術(shù)對改善精索靜脈曲張患者精子質(zhì)量的效果分析[J]. 劉剛,朝魯,陳銳,崔志剛,劉小勇,宋笑童,劉淳,向瑜,韓文濤. 現(xiàn)代泌尿外科雜志. 2015(10)
[6]茶多酚對精索靜脈曲張大鼠睪丸生精細胞凋亡的影響[J]. 武政華,柯鑫文,馮少勇,張利,武進峰,程偉,成建軍,張建東,張雁鋼. 中華男科學(xué)雜志. 2015(08)
[7]EAU、AUA-ASRM、中國精索靜脈曲張診療指南解讀[J]. 王萬榮,譚艷,謝勝,謝子平,歐陽海,李韜,康照鵬. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2015(50)
[8]Bcl-2、CytC和caspase-3在實驗性精索靜脈曲張大鼠生精細胞中的表達及意義[J]. 成建軍,張雁鋼,李超鵬. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報. 2012(05)
[9]自噬與泛素化蛋白降解途徑的分子機制及其功能[J]. 陳科,程漢華,周榮家. 遺傳. 2012(01)
[10]精索靜脈曲張患者血中兒茶酚胺濃度的變化[J]. 許寧,曹林升,薛學(xué)義,江濤,羅義麒. 現(xiàn)代泌尿外科雜志. 2007(05)
碩士論文
[1]精索靜脈曲張與雄性激素水平的相關(guān)性研究[D]. 陳云斌.廣西醫(yī)科大學(xué) 2013
[2]精索靜脈曲張對青春期大鼠生精細胞凋亡基因Bcl-2和Bax表達的影響[D]. 陳樂仲.汕頭大學(xué) 2006
本文編號：2895176
【文章來源】：武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】：50 頁
【學(xué)位級別】：碩士
【部分圖文】：
圖１各組大鼠睪丸組織光學(xué)顯微鏡下形態(tài)學(xué)觀察（ＨＥ，?ｌ〇ｘｌ〇）??
圖Ｄ，睪丸組織狀況則與圖Ａ類似。??５．２透射電鏡觀察??通過透射電子顯微鏡觀察各組生精上皮細胞（見圖２），正常組、假手術(shù)組??中生精上皮細胞形態(tài)規(guī)則，較少見明顯腫脹的細胞器；自噬小體，溶酶體及自噬??溶酶體也比較少見。ＶＣ組中可見部分生精上皮細胞形態(tài)欠佳，線粒體，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)??等細胞器腫脹；另外其細胞中可見較多的自噻小體，成熟的自噬溶酶體。ＶＣ手??術(shù)組中細胞形態(tài)尚規(guī)整，線粒體等細胞器腫脹明顯；自噬體、成熟的自噬溶酶體??也較為常見，但相對于ＶＣ組來說，數(shù)量相對要少，但要比正常組要明顯多。??１１??
５．３ＴＵＮＥＬ染色觀察??對各組睪丸組織進行ＴＵＮＥＬ染色，然后在４０ｘ１０倍鏡下行“弓”字觀察（見??圖３）。正常組及假手術(shù)組中曲精小管規(guī)則，細胞豐富且有序排列，較少見生精??上皮細胞凋亡。而ＶＣ組及ＶＣ手術(shù)治療組可見部分曲精小管變形明顯，細胞稀??疏且排布混亂，凋亡細胞明顯增多。但ＶＣ組睪丸曲精小管的破壞程度要比ＶＣ??手術(shù)治療組更為嚴(yán)重。??根據(jù)表１各組生精上皮細胞凋亡指數(shù)可以看出，正常組與假手術(shù)組之間睪??丸細胞凋亡指數(shù)無顯著差異（尸＞〇．〇５）。然而ＶＣ組中凋亡指數(shù)達２０．０６±２．３３°／〇??顯著高于正常組的２．９６±０．８９％?（Ｐ＜０．０１）。ＶＣ手術(shù)治療組的凋亡指數(shù)要明顯低??于ＶＣ組，且差異具有統(tǒng)計學(xué)意義〇Ｐ＜?０．０１）。??１２??
【參考文獻】：
期刊論文
[1]通精靈對實驗性精索靜脈曲張大鼠精子DNA完整性與睪丸組織氧化應(yīng)激的影響[J]. 杜寶昕,鄭軍狀,劉冰,陶方澤,方躍坤,徐文麗,崔云. 中華男科學(xué)雜志. 2017(11)
[2]精索靜脈曲張大鼠睪丸細胞自噬的初步研究[J]. 朱少明,余偉民,饒婷,阮遠,李浩勇,楊瀟,寧金卓,袁潤,趙勝,程帆. 現(xiàn)代泌尿外科雜志. 2017(05)
[3]針挑治療對精索靜脈曲張不育患者血液流變指標(biāo)及療效的影響[J]. 陳棟,何肖,陳卓銘,胡雷,鐘鍵,洪衍波,黃君,章岳娟,鄭富仕. 中國中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2017(03)
[4]加味桂枝茯苓湯治療腎虛血瘀型精索靜脈曲張性不育患者療效觀察[J]. 黃小慶,蘇勁松,徐云森,王曉文,郭宇明,嚴(yán)文兵,吳江平,龍云,招活,高榮芳. 中國實驗方劑學(xué)雜志. 2017(08)
[5]精索靜脈顯微手術(shù)對改善精索靜脈曲張患者精子質(zhì)量的效果分析[J]. 劉剛,朝魯,陳銳,崔志剛,劉小勇,宋笑童,劉淳,向瑜,韓文濤. 現(xiàn)代泌尿外科雜志. 2015(10)
[6]茶多酚對精索靜脈曲張大鼠睪丸生精細胞凋亡的影響[J]. 武政華,柯鑫文,馮少勇,張利,武進峰,程偉,成建軍,張建東,張雁鋼. 中華男科學(xué)雜志. 2015(08)
[7]EAU、AUA-ASRM、中國精索靜脈曲張診療指南解讀[J]. 王萬榮,譚艷,謝勝,謝子平,歐陽海,李韜,康照鵬. 世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘. 2015(50)
[8]Bcl-2、CytC和caspase-3在實驗性精索靜脈曲張大鼠生精細胞中的表達及意義[J]. 成建軍,張雁鋼,李超鵬. 中國醫(yī)藥導(dǎo)報. 2012(05)
[9]自噬與泛素化蛋白降解途徑的分子機制及其功能[J]. 陳科,程漢華,周榮家. 遺傳. 2012(01)
[10]精索靜脈曲張患者血中兒茶酚胺濃度的變化[J]. 許寧,曹林升,薛學(xué)義,江濤,羅義麒. 現(xiàn)代泌尿外科雜志. 2007(05)
碩士論文
[1]精索靜脈曲張與雄性激素水平的相關(guān)性研究[D]. 陳云斌.廣西醫(yī)科大學(xué) 2013
[2]精索靜脈曲張對青春期大鼠生精細胞凋亡基因Bcl-2和Bax表達的影響[D]. 陳樂仲.汕頭大學(xué) 2006
本文編號：2895176
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