發(fā)布時(shí)間：2020-12-02 10:36

　　背景與目的:在生理或應(yīng)激狀態(tài)下,自噬通過及時(shí)降解細(xì)胞內(nèi)受損的蛋白或細(xì)胞器等,在維持細(xì)胞穩(wěn)定,調(diào)節(jié)細(xì)胞免疫,保持細(xì)胞干性對抗細(xì)胞衰老及凋亡中發(fā)揮重要作用。而自噬在精索靜脈曲張的研究中鮮有報(bào)道。本實(shí)驗(yàn)通過精索靜脈曲張大鼠模型,觀察睪丸生精上皮細(xì)胞中細(xì)胞凋亡及自噬的表達(dá)情況,并進(jìn)行相關(guān)性分析,為精索靜脈曲張致不育機(jī)制研究提供新思路。方法:取40只雄性SD大鼠,隨機(jī)分為正常對照組、VC組（VC造模組）、VC手術(shù)組（VC+手術(shù)治療組）、假手術(shù)組,每組10只。正常對照組不做任何處理,VC組和VC手術(shù)組行精索靜脈曲張?jiān)炷?假手術(shù)組打開腹腔但不做任何處理。第30天時(shí)對VC手術(shù)組行左側(cè)精索靜脈高位結(jié)扎手術(shù)治療。第60天時(shí)對所有組大鼠取左側(cè)睪丸標(biāo)本。睪丸組織行HE染色觀察大鼠曲精小管結(jié)構(gòu)變化;TUNEL染色觀察生精上皮細(xì)胞凋亡情況;透射電子顯微鏡觀察生精小管上皮細(xì)胞中自噬體、自噬溶酶體等;Western-blot,RT-PCT檢測LC3和Beclinl水平的變化;采用Logistic回歸對Western-blot中LC3-Ⅱ/Ⅰ與生精上皮細(xì)胞凋亡指數(shù)進(jìn)行分析。結(jié)果:HE染色可見VC組中睪丸部分曲精小管結(jié)構(gòu)... 

【文章來源】：武漢大學(xué)湖北省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：50 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１各組大鼠睪丸組織光學(xué)顯微鏡下形態(tài)學(xué)觀察（ＨＥ，?ｌ〇ｘｌ〇）??

圖Ｄ，睪丸組織狀況則與圖Ａ類似。??５．２透射電鏡觀察??通過透射電子顯微鏡觀察各組生精上皮細(xì)胞（見圖２），正常組、假手術(shù)組??中生精上皮細(xì)胞形態(tài)規(guī)則，較少見明顯腫脹的細(xì)胞器；自噬小體，溶酶體及自噬??溶酶體也比較少見。ＶＣ組中可見部分生精上皮細(xì)胞形態(tài)欠佳，線粒體，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)??等細(xì)胞器腫脹；另外其細(xì)胞中可見較多的自噻小體，成熟的自噬溶酶體。ＶＣ手??術(shù)組中細(xì)胞形態(tài)尚規(guī)整，線粒體等細(xì)胞器腫脹明顯；自噬體、成熟的自噬溶酶體??也較為常見，但相對于ＶＣ組來說，數(shù)量相對要少，但要比正常組要明顯多。??１１??

５．３ＴＵＮＥＬ染色觀察??對各組睪丸組織進(jìn)行ＴＵＮＥＬ染色，然后在４０ｘ１０倍鏡下行“弓”字觀察（見??圖３）。正常組及假手術(shù)組中曲精小管規(guī)則，細(xì)胞豐富且有序排列，較少見生精??上皮細(xì)胞凋亡。而ＶＣ組及ＶＣ手術(shù)治療組可見部分曲精小管變形明顯，細(xì)胞稀??疏且排布混亂，凋亡細(xì)胞明顯增多。但ＶＣ組睪丸曲精小管的破壞程度要比ＶＣ??手術(shù)治療組更為嚴(yán)重。??根據(jù)表１各組生精上皮細(xì)胞凋亡指數(shù)可以看出，正常組與假手術(shù)組之間睪??丸細(xì)胞凋亡指數(shù)無顯著差異（尸＞〇．〇５）。然而ＶＣ組中凋亡指數(shù)達(dá)２０．０６±２．３３°／〇??顯著高于正常組的２．９６±０．８９％?（Ｐ＜０．０１）。ＶＣ手術(shù)治療組的凋亡指數(shù)要明顯低??于ＶＣ組，且差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義〇Ｐ＜?０．０１）。??１２??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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碩士論文
[1]精索靜脈曲張與雄性激素水平的相關(guān)性研究[D]. 陳云斌.廣西醫(yī)科大學(xué) 2013
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本文編號：2895176