長(zhǎng)鏈非編碼RNA THOR調(diào)節(jié)腎細(xì)胞癌細(xì)胞的生物學(xué)功能及其機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間：2020-12-05 22:36
研究背景與目的:腎細(xì)胞癌（renal cell carcinoma,RCC）的發(fā)病率近年來(lái)呈快速增長(zhǎng)的趨勢(shì),已嚴(yán)重威脅人類的健康。幾乎所有腎細(xì)胞癌對(duì)化療和放療不敏感,而近來(lái)靶向治療的興起,為治療腎細(xì)胞癌開(kāi)啟了全新的道路。長(zhǎng)鏈非編碼RNA（Longnoncoding RNAs,LncRNAs）可通過(guò)多種機(jī)制廣泛參與基因表達(dá)的調(diào)控。最近發(fā)現(xiàn)的一種新的非常保守的長(zhǎng)鏈非編碼RNA THOR與惡性腫瘤的發(fā)生發(fā)展相關(guān)。本文研究了 THOR在腎細(xì)胞癌細(xì)胞中的表達(dá)及其生物學(xué)功能,并探討其可能的機(jī)制,以期為尋找新的治療靶點(diǎn)提供理論依據(jù)。研究方法和內(nèi)容:1.qPCR檢測(cè)THOR在人腎細(xì)胞癌組織、腎細(xì)胞癌細(xì)胞株（786-0、A498、ACHN及原代人腎細(xì)胞癌細(xì)胞）的表達(dá),并檢測(cè)THOR在癌旁腎組織、HK-2和原代人腎上皮細(xì)胞中的表達(dá)情況。2.針對(duì)786-0細(xì)胞株,分別運(yùn)用siRNA敲減、CRISPR/Cas9敲除THOR的表達(dá)后,qPCR檢測(cè)THOR;細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng);MTT法檢測(cè)細(xì)胞存活;克隆形成試驗(yàn)、BrdU ELISA法檢測(cè)細(xì)胞增殖。針對(duì)原代人腎細(xì)胞癌細(xì)胞,HK-2和原代人腎上皮細(xì)胞,運(yùn)用siRN...
【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁(yè)數(shù)】：115 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【部分圖文】：
圖１－１?ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ在腎癌組織與癌旁組織中的表達(dá)情況（＊ｐ＜０．０５）??Ｆｉｇｕｒｅ?１?－１?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＬｎｃＲＮＡ?ＴＨＯＲ?ｉｎ?ｒｅｎａｌ?ｃｅｌｌ?ｃａｒｃｉｎｏｍａ?ａｎｄ?ａｄｊａｃｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ?（＊ｐ＜０．０５）??
Ｎ：?Ｓｕｒｒｏｕｄｉｎｇ?ｒｅｎａｌ?ｔｉｓｓｕｅｓ??Ｔ：?ＲＣＣ?Ｔｕｍｏｒ?ｔｉｓｓｕｅｓ??圖１－１?ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ在腎癌組織與癌旁組織中的表達(dá)情況（＊ｐ＜０．０５）??Ｆｉｇｕｒｅ?１?－１?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＬｎｃＲＮＡ?ＴＨＯＲ?ｉｎ?ｒｅｎａｌ?ｃｅｌｌ?ｃａｒｃｉｎｏｍａ?ａｎｄ?ａｄｊａｃｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ?（＊ｐ＜０．０５）??１．２．２?ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ在不同細(xì)胞株中的表達(dá)情況??觀察到ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ在人腎細(xì)胞癌組織中具有特異性表達(dá)后，我們接下??來(lái)檢測(cè)腎細(xì)胞癌細(xì)胞中的ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ表達(dá)情況。結(jié)果顯示在腎小管上皮細(xì)??胞株ＨＫ－２?（“ＨＫ－２”）及原代人腎小管上皮細(xì)胞（“Ｅｐｉ”）中未檢測(cè)到ＬｎｃＲＮＡ??ＴＨＯＲ表達(dá)。在３種腎細(xì)胞癌細(xì)胞株（７８６－０，?Ａ４９８和ＡＣＨＮ）中ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ??有表達(dá)，其中在７８６－０細(xì)胞系中表達(dá)量相對(duì)較高，在２種不同原代人腎細(xì)胞癌??細(xì)胞（“ＲＣＣ１”和“ＲＣＣ２”）中１＾１＾人１１１０１１也有表達(dá)，上述各細(xì)胞株與１？：－２??比較差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（＊ｐ＜０．０５）。（圖１－２）??２３??
計(jì)學(xué)意義（＊ｐ＜０．０５）。其中ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９編輯作用后細(xì)胞生長(zhǎng)能力受抑制程度最??高。無(wú)意義轉(zhuǎn)染對(duì)照細(xì)胞（ｓｉ－Ｃ）與未轉(zhuǎn)染的親代對(duì)照細(xì)胞（Ｐａｒｅｎｔａｌ）相比，培??養(yǎng)第９６小時(shí)時(shí)活細(xì)胞計(jì)數(shù)值無(wú)明顯差異。（圖２－２）??３７??
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Long Non-coding RNA MEG3 Induces Renal Cell Carcinoma Cells Apoptosis by Activating the Mitochondrial Pathway[J]. 王淼,黃韜,羅剛,黃超,肖行遠(yuǎn),汪良,蔣國(guó)松,曾甫清. Journal of Huazhong University of Science and Technology(medical Sciences). 2015(04)
[2]Cancer statistics: updated cancer burden in China[J]. Wanqing Chen. Chinese Journal of Cancer Research. 2015(01)
本文編號(hào)：2900204
【文章來(lái)源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省
【文章頁(yè)數(shù)】：115 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【部分圖文】：
圖１－１?ＬｎｃＲＮＡＴＨＯＲ在腎癌組織與癌旁組織中的表達(dá)情況（＊ｐ＜０．０５）??Ｆｉｇｕｒｅ?１?－１?Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｏｆ?ＬｎｃＲＮＡ?ＴＨＯＲ?ｉｎ?ｒｅｎａｌ?ｃｅｌｌ?ｃａｒｃｉｎｏｍａ?ａｎｄ?ａｄｊａｃｅｎｔ?ｔｉｓｓｕｅｓ?（＊ｐ＜０．０５）??
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計(jì)學(xué)意義（＊ｐ＜０．０５）。其中ＣＲＩＳＰＲ／Ｃａｓ９編輯作用后細(xì)胞生長(zhǎng)能力受抑制程度最??高。無(wú)意義轉(zhuǎn)染對(duì)照細(xì)胞（ｓｉ－Ｃ）與未轉(zhuǎn)染的親代對(duì)照細(xì)胞（Ｐａｒｅｎｔａｌ）相比，培??養(yǎng)第９６小時(shí)時(shí)活細(xì)胞計(jì)數(shù)值無(wú)明顯差異。（圖２－２）??３７??
【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Long Non-coding RNA MEG3 Induces Renal Cell Carcinoma Cells Apoptosis by Activating the Mitochondrial Pathway[J]. 王淼,黃韜,羅剛,黃超,肖行遠(yuǎn),汪良,蔣國(guó)松,曾甫清. Journal of Huazhong University of Science and Technology(medical Sciences). 2015(04)
[2]Cancer statistics: updated cancer burden in China[J]. Wanqing Chen. Chinese Journal of Cancer Research. 2015(01)
本文編號(hào)：2900204
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