藥物對活細(xì)胞初級纖毛影響的高通量篩選方法的構(gòu)建與驗證
【學(xué)位單位】:江蘇大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位年份】:2019
【中圖分類】:R96
【部分圖文】:
2圖 1.1 纖毛的結(jié)構(gòu)示意圖。(a)纖毛是由纖毛膜、軸絲和基體組成的毛發(fā)狀細(xì)胞器。根據(jù)的結(jié)構(gòu)不同,纖毛可分為三類:(b)初級纖毛,軸絲為“9×2 + 0”結(jié)構(gòu),由 9 對外周雙微管與連接絲組成。(c)運(yùn)動纖毛,由 9 對雙聯(lián)體微管、內(nèi)/外動力蛋白臂、輻條及 1 對中管組成,為“9×2+2”結(jié)構(gòu)。(d)節(jié)點(diǎn)纖毛,軸絲為“9×2 + 0”結(jié)構(gòu),由九對雙重微管接絲和內(nèi)/外動力蛋白臂組成。Fig 1.1 Schematic diagrams of cilium structure. (a) Cilia is a hair-like organelle composed ciliary membrane, axoneme, and basal body. (b) Primary cilia: the axoneme is "9x2+0" struconsisting of nine pairs of doublet microtubules and nexin. (c) Motile cilia consist of 9 pairs of dmicrotubules, inner/outer dynein arms, radial spoke and a pair of central singlet microtubules, wh"9x2+2" structure. (d) Node cilia: the axoneme is "9x2+0" structure, consisting of nine pairs of domicrotubules, nexin and inner/outer dynein arms.
江 蘇 大 學(xué) 碩 士纖毛軸絲的結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)是基體(或稱為母γ 微管蛋白)構(gòu)成,為軸絲 α、β 微管蛋白二軸絲外覆的纖毛膜是特化的細(xì)胞質(zhì)膜,完全相同[1, 14]。最近的一項蛋白質(zhì)組學(xué)研究表明,有六膜、纖毛基體及其相關(guān)附屬結(jié)構(gòu)上,這其中些受體蛋白,就像嵌在纖毛膜上的“探頭”物理、化學(xué)或生物信號分子刺激,然后將信子效應(yīng)器或 Hedgehog(Hh)[16-19]、Wnt[20-22等信號通路的相應(yīng)下游信號蛋白,從而調(diào)控細(xì)胞分化等生理病理過程,具體作用模式如
進(jìn)纖毛分解;還可激活 INPP5E55 來抑制纖毛發(fā)生[37]。而在分子機(jī)制方面,目前纖毛在正;虿±項l件下分解的具體機(jī)制相對而言研究較為清晰的是,在體外研究中,由血清引起的細(xì)胞纖毛分機(jī)制如下:在加入血清后,解聚驅(qū)動蛋白成員 Kif2a 和 Kif24 被HEF1-Aurora A 途徑迅速誘導(dǎo)纖毛軸質(zhì)微管去穩(wěn)定化和解聚合(圖 1.3)看,該過程首先是 G2 / M 期激酶 Plk1 磷酸化,激活解聚驅(qū)動蛋白 Kif2延伸[38]。隨后 Ndel1 穩(wěn)定基底體中的 Trichoplein,與 Pitchfork 一起激活HEF1,進(jìn)而激活組蛋白去乙; 6(HDAC6)、促進(jìn)微管蛋白去乙酰致纖毛解聚(圖 1.3)。最后,在 S 期和 G2 期表達(dá)的 Nek2 與定位于與的解聚驅(qū)動蛋白成員 Kif24 結(jié)合[39],磷酸化并激活該第二解聚驅(qū)動蛋白期開始后拆解過程的不可逆性,保證了中心粒能夠在 S 期復(fù)制并在 M 期裂紡錘體[35](圖 1.3)。
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