攜帶miR-27a的外泌體介導的電離輻射旁效應對皮膚傷口愈合的影響及其機制的研究
發(fā)布時間：2020-12-03 07:00
目的:急性放射性皮膚損傷的癥狀包括紅斑、脫發(fā)、干燥脫屑和色素沉著,皮膚損傷嚴重程度與輻射劑量、劑量率、皮膚厚度以及射線品質有關。換句話說,在同樣的物理照射劑量下,不同射線品質的輻射對同一個體將造成不同程度的皮膚損傷。一般認為自然發(fā)生的α粒子由于穿透力弱不能穿透人的皮膚表皮層,只有當其照射劑量達幾百格瑞才可使皮膚出現紅斑等明顯的損傷,但是目前鮮少有文獻可以證明低劑量α粒子照射不會對皮膚造成任何損傷。正因為α粒子射程短,根據放射生物學傳統(tǒng)的靶理論,低劑量外照射僅會傷及皮膚表面角質層,而不會影響對皮膚損傷修復具有重要作用的真皮層成纖維細胞。然而由于可能存在電離輻射旁效應,低劑量α粒子照射也有可能通過旁效應信號影響真皮層,從而對皮膚修復功能造成損傷。已有研究結果提示,電離輻射旁效應可能在輻射的健康危害和腫瘤放療的效率及副作用中具有重要作用。因此明確電離輻射旁效應在皮膚傷口愈合過程中的作用及其發(fā)生機制對降低輻射對正常細胞組織的危害具有重要現實意義。方法:本研究第一部分采用直接照射法和共培養(yǎng)法處理BALB/c小鼠背部皮膚,通過肉眼和皮膚石蠟切片HE染色觀察其表觀形態(tài)、通過游標卡尺測量傷口大小反映其...
【文章來源】：蘇州大學江蘇省
【文章頁數】：111 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
電離輻射旁效應大事記大量的研究提示[26,50,55]
圖 1.1 活體共培養(yǎng)模型。、Western Blot 檢測受照小鼠皮膚γH2AX表達水平射后 30 min 小鼠皮膚置于凍存管內液氮速凍；適量強效裂解液（RIPA 強效裂解液、1% PMSF），冰上超聲至皮；00 g、4 ℃，離心 10 min，取上清，用 BCA 試劑盒測蛋白濃度，多（Synergy 2，美國 BIO-TEK 公司）測量吸收光，波長 562 nm；相應體積的 5×SDS-PAGE 上樣緩沖液，混合均勻，95 ℃變性 5 m12% SDS-PAGE 80 V 恒壓電泳分離蛋白，濕法穩(wěn)流（200 mA）轉膜60 min；TBST 清洗膜 4 次，每次 5 min，3% BSA 室溫封閉 1 h；（anti-γH2AX）孵育膜 4 ℃過夜，TBST 清洗膜 4 次，每次 10 m（HRP-anti-rabbit，碧云天，中國）室溫孵育膜 1 h，TBST 清洗膜
實驗結果一、α粒子直接照射對小鼠皮膚傷口愈合的影響γH2AX 被廣泛用作 DNA 損傷的生物標記物。如圖 1.2 所示，小鼠皮膚在受到 0.56 Gy 的α粒子照射后 30 min，其γH2AX 表達水平與未照射組相比出現顯著增加，證實照射是成功的。然而受照小鼠皮膚直到第十天也并未出現肉眼可見的改變；這與文獻報道[1]的一致。那么這樣的α粒子劑量是否對皮膚沒有任何影響呢？本研究發(fā)現小鼠受照區(qū)域的傷口愈合速度相比對照組明顯減慢，如圖 1.3，傷口制造后第三天和第七天，照射組傷口面積顯著大于未照射組；到了第十天，照射組傷口愈合減慢趨勢依然存在，但無統(tǒng)計學差異。另外研究還發(fā)現，傷口制造后第十天，皮膚已基本愈合，但是照射組愈合皮膚表皮層明顯比未照射組厚，這也是照射組皮膚愈合更差的一個佐證。也就是說，雖然照射后小鼠皮膚沒有出現肉眼可見的損傷，但實際上其生物學功能已經發(fā)生了一定程度的改變。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]外泌體—電離輻射誘導旁效應的另一種機制[J]. 陳纖,蔣友芹,尹曉明,田文倩,王敬東,楊紅英. 輻射研究與輻射工藝學報. 2014(03)
[2]Inhibitory Effects of miR-146b-5p on Cell Migration and Invasion of Pancreatic Cancer by Targeting MMP16[J]. 林凡,王欣,揭志剛,洪曉泉,李旭,王敏,俞亞紅. Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences). 2011(04)
本文編號：2896166
【文章來源】：蘇州大學江蘇省
【文章頁數】：111 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
電離輻射旁效應大事記大量的研究提示[26,50,55]
圖 1.1 活體共培養(yǎng)模型。、Western Blot 檢測受照小鼠皮膚γH2AX表達水平射后 30 min 小鼠皮膚置于凍存管內液氮速凍；適量強效裂解液（RIPA 強效裂解液、1% PMSF），冰上超聲至皮；00 g、4 ℃，離心 10 min，取上清，用 BCA 試劑盒測蛋白濃度，多（Synergy 2，美國 BIO-TEK 公司）測量吸收光，波長 562 nm；相應體積的 5×SDS-PAGE 上樣緩沖液，混合均勻，95 ℃變性 5 m12% SDS-PAGE 80 V 恒壓電泳分離蛋白，濕法穩(wěn)流（200 mA）轉膜60 min；TBST 清洗膜 4 次，每次 5 min，3% BSA 室溫封閉 1 h；（anti-γH2AX）孵育膜 4 ℃過夜，TBST 清洗膜 4 次，每次 10 m（HRP-anti-rabbit，碧云天，中國）室溫孵育膜 1 h，TBST 清洗膜
實驗結果一、α粒子直接照射對小鼠皮膚傷口愈合的影響γH2AX 被廣泛用作 DNA 損傷的生物標記物。如圖 1.2 所示，小鼠皮膚在受到 0.56 Gy 的α粒子照射后 30 min，其γH2AX 表達水平與未照射組相比出現顯著增加，證實照射是成功的。然而受照小鼠皮膚直到第十天也并未出現肉眼可見的改變；這與文獻報道[1]的一致。那么這樣的α粒子劑量是否對皮膚沒有任何影響呢？本研究發(fā)現小鼠受照區(qū)域的傷口愈合速度相比對照組明顯減慢，如圖 1.3，傷口制造后第三天和第七天，照射組傷口面積顯著大于未照射組；到了第十天，照射組傷口愈合減慢趨勢依然存在，但無統(tǒng)計學差異。另外研究還發(fā)現，傷口制造后第十天，皮膚已基本愈合，但是照射組愈合皮膚表皮層明顯比未照射組厚，這也是照射組皮膚愈合更差的一個佐證。也就是說，雖然照射后小鼠皮膚沒有出現肉眼可見的損傷，但實際上其生物學功能已經發(fā)生了一定程度的改變。
【參考文獻】：
期刊論文
[1]外泌體—電離輻射誘導旁效應的另一種機制[J]. 陳纖,蔣友芹,尹曉明,田文倩,王敬東,楊紅英. 輻射研究與輻射工藝學報. 2014(03)
[2]Inhibitory Effects of miR-146b-5p on Cell Migration and Invasion of Pancreatic Cancer by Targeting MMP16[J]. 林凡,王欣,揭志剛,洪曉泉,李旭,王敏,俞亞紅. Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences). 2011(04)
本文編號：2896166
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