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山楂葉黃酮類成分在糖脂代謝紊亂大鼠體內(nèi)的代謝組學研究

發(fā)布時間:2020-03-22 07:30
【摘要】:山楂葉具有活血化瘀、理氣通脈、化濁降脂的功效,常用于氣滯血瘀、胸痹心痛、高脂血癥等,其主要活性成分為黃酮類化合物。本論文采用糖脂代謝紊亂大鼠模型考察山楂葉總黃酮(HLF)和牡荊素-2’’-O-鼠李糖苷(RHV)代謝動力學特征和對內(nèi)源性物質(zhì)代謝的影響,研究藥物和內(nèi)源性物質(zhì)的體內(nèi)代謝變化,為闡明山楂調(diào)節(jié)糖脂代謝的作用提供物質(zhì)基礎(chǔ)研究依據(jù)。研究內(nèi)容如下:1.采用高糖高脂飼料喂養(yǎng)并結(jié)合腹腔注射鏈脲佐菌素來制備糖脂代謝紊亂模型大鼠,通過檢測血糖和血脂篩選造模成功的大鼠用于代謝研究。建立了RHV及其主要代謝產(chǎn)物牡荊素(VIT)在模型大鼠血漿中的HPLC-UV分析方法,灌胃給予糖脂代謝紊亂模型大鼠RHV后,分析血漿中的原形藥物和代謝產(chǎn)物,考察藥代動力學變化,獲得了RHV及VIT的藥代動力學參數(shù)。2.建立了大鼠血樣內(nèi)源性物質(zhì)的高效液相色譜-四級桿飛行時間串聯(lián)質(zhì)譜(HPLC-Q-TOF-MS)分析方法,分析單次給藥與多次給藥后糖脂代謝紊亂大鼠血清內(nèi)源性物質(zhì),發(fā)現(xiàn)24個內(nèi)源性物質(zhì)發(fā)生顯著變化,其中苯丙氨酸、色氨酸、亮氨酸、丙酮酸等含量下降,花生四烯酸、硬脂酸、膽酸、油酸等含量上升。HLF和RHV可回調(diào)上述物質(zhì)的變化,調(diào)節(jié)脂肪酸代謝、氨基酸代謝、TCA循環(huán)等通路。3.建立了大鼠尿樣內(nèi)源性物質(zhì)的HPLC-Q-TOF-MS分析方法,分析給藥前后糖脂代謝紊亂大鼠尿樣內(nèi)源性物質(zhì),發(fā)現(xiàn)25個內(nèi)源性物質(zhì)發(fā)生顯著變化,其中乳酸、檸檬酸、馬尿酸、丙氨酸等含量下降,鵝去氧膽酸、甘氨膽酸、尿酸等含量上升。HLF和RHV可回調(diào)上述物質(zhì)的變化,調(diào)節(jié)膽汁酸代謝、TCA循環(huán)等通路。4.建立了大鼠糞樣內(nèi)源性物質(zhì)的HPLC-Q-TOF-MS分析方法,分析給藥前后糖脂代謝紊亂大鼠糞便內(nèi)源性物質(zhì),有14個內(nèi)源性物質(zhì)發(fā)生了顯著變化,其中苯丙氨酸、谷氨酸、色氨酸等含量下降,尿酸、油酸、β-羥基丁酸等含量上升。HLF和RHV可回調(diào)上述物質(zhì)的變化,調(diào)節(jié)脂肪酸代謝、氨基酸代謝等通路。
【圖文】:

HPLC色譜,專屬性,檢測限,濃度


0 0 . 5 1 201 0時 間 ( h)血糖值mmo圖 2.5 各組大鼠的糖耐量測定結(jié)果 圖 2.6 各組大鼠血脂測定結(jié)果附注:與 Con 相比,**P 0.012.4.3 方法學考察2.4.3.1 檢測限與定量限測定結(jié)果將 RHV 與 VIT 標準溶液和模型大鼠血樣與給藥大鼠血樣以“2.3.4.3”項下方法注入高效液相色譜中進行分析,得到如圖 2.7 所示液相色譜圖。結(jié)果顯示,該方法對 RHV 與 VIT 分離效果良好。RHV 濃度為 0.132 g/mL 為其血漿樣本檢測限,RHV 濃度為 0.329 g/mL 為其血漿樣本定量限;VIT 濃度為 0.046 g/mL 為其血漿樣本檢測限,VIT 濃度為 0.104 g/mL 為其血漿樣本定量限。0.00.51.01.5****Con Mod血脂數(shù)據(jù)mmoRHV 標準品 VIT 標準品

血樣,主成分分析,給藥,總離子流


圖 3.2 單次給藥血樣主成分分析血樣的 HPLC-MS 分析分析天后大鼠血清進行分析的質(zhì)譜總離子流圖見圖 3.4,為給藥組、AC 組大鼠血樣的 HPLC-MS 總離子流圖。od 組總離子流圖,發(fā)現(xiàn)給藥組總離子流圖輪廓與 M輪廓類似。結(jié)果顯示長期給藥對Ⅱ型糖尿病大鼠體內(nèi)大鼠血清樣本 PCA 得分圖(圖 3.3)發(fā)現(xiàn),各組樣。與 Con 組相比,Mod 組血樣與其完全分離,,表明各給藥組樣本組內(nèi)聚集,組間分散,表明給藥組與 M
【學位授予單位】:西北大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2019
【分類號】:R285.5

【參考文獻】

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本文編號:2594728

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