發(fā)布時(shí)間：2020-07-05 16:01

【摘要】：龍血樹(Dracaena Vandelli ex Linnaeus)是一種熱帶特有的珍稀藥用植物,也是一種著名的觀葉植物。傣族貝葉經(jīng)記載龍血樹葉具有和血竭相似的醫(yī)療功效,已有醫(yī)藥公司將龍血樹葉開發(fā)成傣藥擺埋嘎篩并上市銷售,市場反饋及前期藥理實(shí)驗(yàn)顯示對(duì)糖尿病有顯著療效,但其降血糖機(jī)制尚未揭示。為了闡明龍血樹葉藥效成分的化學(xué)本質(zhì),以對(duì)該藥的深入開發(fā)提供科學(xué)依據(jù),本實(shí)驗(yàn)重點(diǎn)就水溶性有效組分進(jìn)行了系統(tǒng)的研究。本文以柬埔寨龍血樹葉為原料,經(jīng)熱水浸提獲降血糖總水提物,醇沉后得粗糖,得率為8.59%。采用sevag法除游離蛋白(三氯甲烷和正丁醇最佳體積比5:1),糖保留率98.11%,蛋白脫除率23.83%。最優(yōu)脫色材料為A-722MP陰離子交換樹脂,糖保留率90.92%,脫色率73.03%。通過L6大鼠成肌細(xì)胞建立降糖活性追蹤模型,指導(dǎo)對(duì)活性組分的篩選分離純化,用GOD-POD法檢測培養(yǎng)液糖含量。以DEAE-52纖維素材料柱層析,用去離子水和0.1mol/L、0.3 mol/L、0.6 mol/L、1 mol/L梯度氯化鈉溶液作洗脫劑,苯酚-硫酸法跟蹤檢測繪制洗脫曲線,得四個(gè)糖組分QLZI、QLZII、QLZIII、QLZIV,其中降糖活性最強(qiáng)的為主體組分QLZI。再用Sephacryl S-100HR凝膠分純QLZI,以去離子水為洗脫劑,苯酚-硫酸法和考馬斯亮藍(lán)法分別示蹤糖和蛋白并繪制洗脫曲線,得糖-蛋白混合物L(fēng)XS、果聚糖配體LZS、蛋白LSP,三組分均有降糖活性。LZS和LSP質(zhì)量比1:1混合后活性提高。利用UV、IR、質(zhì)譜、核磁共振波譜及離子色譜儀對(duì)LZS測定分析,鑒定其為聚合糖配體,單糖組成以果糖、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖為主,含有1.45%質(zhì)量的檸檬酸。經(jīng)查閱文獻(xiàn)及SciFinder數(shù)據(jù)庫,知LZS為一個(gè)新的化合物。SDS-PAGE電泳表明,活性蛋白LSP的分子量約13000Da。本研究確認(rèn)了糖類與其結(jié)合蛋白是龍血樹葉的重要降糖活性成分,為認(rèn)識(shí)龍血樹葉治療糖尿病藥理機(jī)制和藥物的研發(fā)技術(shù)提供了理論依據(jù)以及實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
【學(xué)位授予單位】：云南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2018
【分類號(hào)】：R284.2

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2742819