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高效液相色譜法靈香草中槲皮素含量

發(fā)布時(shí)間:2024-06-04 23:34
  為了測(cè)定靈香草中槲皮素含量,以2 mol/L的鹽酸甲醇溶液為提取溶劑,采用Wondasil C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm)為分離柱,篩選流動(dòng)相甲苯、乙酸乙酯和甲酸的不同配比,探索HPLC法測(cè)定靈香草甲醇提取物中槲皮素含量的最佳條件.結(jié)果顯示,當(dāng)甲苯、乙酸乙酯和甲酸的配比為10:8:1,流速為1.5 mL/min時(shí)槲皮素分離效果較好;紫外檢測(cè)波長(zhǎng)為375 nm時(shí),槲皮素保留時(shí)間為19 min;以槲皮素保留時(shí)間和峰面積進(jìn)行定性與定量分析,峰面積與含量絕對(duì)相關(guān)系數(shù)是0.9 998,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)變化范圍為1.83%~2.49%,加樣回收率平均為96.44%,表明采用HPLC法檢測(cè)靈香草甲醇提取物中槲皮素含量靈敏度高、可重復(fù)性好.本研究可為靈香草藥材成分的開(kāi)發(fā)利用提供較好的參考.

【文章頁(yè)數(shù)】:4 頁(yè)

【部分圖文】:

圖1槲皮素對(duì)照品(A)與靈香草鹽酸甲醇提取液(B)的色譜圖

圖1槲皮素對(duì)照品(A)與靈香草鹽酸甲醇提取液(B)的色譜圖

色譜柱采用WondasilC18反向色譜柱,通過(guò)紫外掃描,檢測(cè)發(fā)現(xiàn)槲皮素在波長(zhǎng)為375nm時(shí)有最大吸收,特將HPLC檢測(cè)的波長(zhǎng)設(shè)定為375nm.通過(guò)考察甲苯-乙酸乙酯-甲酸按不同比例混合(10∶6∶4,10∶5∶2和10∶8∶1)對(duì)峰形及分離度影響,將槲皮素標(biāo)準(zhǔn)液HPLC圖....


圖2槲皮素標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖2槲皮素標(biāo)準(zhǔn)曲線

使用注射器量取上述不同濃度的母液1.5mL,采用0.22μm有機(jī)相系濾膜過(guò)濾,分別置于不同刻度試管中.按3.1得到的色譜條件,進(jìn)行高效液相色譜檢測(cè),測(cè)定不同濃度槲皮素的峰面積,采用SPSS19.0軟件分析槲皮素含量與峰面積之間的線性關(guān)系,得到線性回歸直線方程為y=78257x+....



本文編號(hào):3989326

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