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白蘞多糖的結構特征及免疫活性研究

發(fā)布時間:2024-06-29 16:08
  目的以中藥白蘞為原料,提取白蘞多糖并采用膜分離技術將多糖按分子量分段,篩選白蘞多糖免疫活性分子量段并分離純化得到白蘞活性均一多糖,通過化學方法與光譜方法結合分析其結構特征,確定免疫調節(jié)活性的多糖類型,為深入研究其機制和制劑創(chuàng)新奠定基礎。方法(1)采用響應面分析法優(yōu)化水煎煮法提取白蘞多糖的工藝,得到白蘞多糖后采用TCA法除去多糖中的蛋白質,脫蛋白后的總多糖(AJP)經膜分離得到7個不同分子量段組分,濾膜的分子量截留值分別為150 kDa、100 kDa、50 kDa、20 kDa、10 kDa和6 kDa。(2)白蘞多糖免疫活性研究:將7個不同分子量段的多糖分別進行小鼠體外免疫活性研究,通過檢測白蘞活性多糖對小鼠脾細胞體外增殖影響,選擇3個體外免疫活性高的進行體內免疫活性研究,通過白蘞多糖對免疫低下小鼠體重及免疫器官指數的影響、單核/巨噬細胞功能的影響、T和B淋巴細胞增殖反應的影響和免疫低下小鼠血清中TNF-α、IL-1的影響結果進行免疫功能的研究。(3)篩選后的白蘞活性多糖分別經DEAE Cellulose 52纖維素柱色譜分離。采用高效凝膠滲透色譜法(HPGPC-ELSD)測定多糖的...

【文章頁數】:68 頁

【學位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖2-1膜分離裝置

圖2-1膜分離裝置

佳木斯分離蘞總多糖(AJP),用最少的雙蒸水加熱溶解.1項下的操作方法進行膜分離,當料箱中的多糖多糖,然后進行反洗,直至苯酚硫酸法檢測不a)分子量多糖濃縮凍干,得白蘞多糖(>150k液繼續(xù)以同樣的方法進行膜分離,更換不同分kDa,10kDa,6kDa)。得7個不同分子....


圖2-2提取時間對白蘞多糖提取率的影響

圖2-2提取時間對白蘞多糖提取率的影響

圖2-2提取時間對白蘞多糖提取率的影響Fig.2-2Effectofextractiontimeontheextractionrate取溫度對白蘞多糖提取率的影響提取時間的增高而逐漸增加,當提取溫度達80℃、90℃、100℃取率最高(見圖2-3)。圖....


圖2-3提取溫度對白蘞多糖提取率的影響

圖2-3提取溫度對白蘞多糖提取率的影響

隨著提取時間的增高而逐漸增加,當提取溫度達80℃、90℃、100℃時,即可達到多糖提取率最高(見圖2-3)。圖2-3提取溫度對白蘞多糖提取率的影響Fig.2-3Effectofextractiontemperatureontheextractionra....


圖2-4料液比對白蘞多糖提取率的影響

圖2-4料液比對白蘞多糖提取率的影響

隨著料液比的增加對提高白蘞多糖的影響較大,液料比從1:16~1:24時,多糖提取率隨著溶液比例的增加而增高,當液料比達到1:20時,即可達到多糖提取率最高(見圖2-4)。圖2-4料液比對白蘞多糖提取率的影響Fig.2-4Effectofsolid-liquidr....



本文編號:3997804

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