發(fā)布時(shí)間：2020-11-05 08:16

　　 短體線蟲(Pratylenchus Filipjev,1936)又稱根腐線蟲,是一類遷移性的植物內(nèi)寄生線蟲,在世界各地普遍發(fā)生,寄主范圍廣泛。短體線蟲、根結(jié)線蟲和孢囊線蟲是作物上危害最為嚴(yán)重的三種植物寄生線蟲,對(duì)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。目前,黃淮地區(qū)短體線蟲的發(fā)生分布以及危害等相關(guān)的研究報(bào)道較少,為了更加系統(tǒng)、準(zhǔn)確地了解黃淮地區(qū)短體線蟲的分布和危害,從而為該線蟲的防治提供理論基礎(chǔ),本研究對(duì)黃淮地區(qū)短體線蟲種群進(jìn)行了調(diào)查,并利用形態(tài)和分子相結(jié)合的方法對(duì)其種類進(jìn)行了鑒定。本研究共采集到河南、山東、安徽三省共27個(gè)地級(jí)市主要大田作物的根際土樣209份,并對(duì)樣品中的短體線蟲進(jìn)行了分類鑒定,同時(shí)對(duì)純培養(yǎng)得到的咖啡短體線蟲(P.coffeae)進(jìn)行了繁殖力測(cè)定,研究結(jié)果如下:1、在小麥、玉米、芝麻、大豆、煙草等作物上共分離出短體線蟲58個(gè)種群,它們來(lái)自河南鄭州市、洛陽(yáng)市、許昌市、商丘市、焦作市、南陽(yáng)市、信陽(yáng)市、平頂山市;山東省的臨沂市、泰安市、新泰市、萊蕪市;安徽省的宿州市。采用單雌培養(yǎng)的方法在胡蘿卜愈傷組織上純化培養(yǎng)出短體線蟲22個(gè)不同種群。利用形態(tài)和分子相結(jié)合的方法鑒定了短體線蟲25個(gè)種群,它們屬于短體屬線蟲的3個(gè)種,分別為咖啡短體線蟲、斯克里布納短體線蟲(P.scribnei)和落選短體線蟲(P.neglectus)。2、本文共獲得短體線蟲18S序列8條、28S序列23條以及ITS序列25條,其中咖啡短體線蟲7個(gè)種群共獲得2條18S序列,序列長(zhǎng)度均為1003 bp;6條28S序列,序列長(zhǎng)度為780-781 bp;7條ITS序列,序列長(zhǎng)度為1245-1254 bp;斯克里布納短體線蟲10個(gè)種群共獲得2條18S序列,序列長(zhǎng)度分別為897 bp、898 bp;8條28S序列,序列長(zhǎng)度為785-786 bp;10條ITS序列,序列長(zhǎng)度為1099-1106 bp;落選短體線蟲8個(gè)種群共獲得4條18S序列,序列長(zhǎng)度為888-891 bp;9條28S序列,序列長(zhǎng)度為776-781 bp;8條ITS序列,序列長(zhǎng)度為897-914 bp。基于18S、28S D2D3區(qū)和ITS序列對(duì)短體線蟲進(jìn)行了系統(tǒng)發(fā)育分析,結(jié)果表明本文獲得的短體線蟲25個(gè)種群的序列均能與已報(bào)道的同種短體線蟲序列形成一個(gè)單系群。3、在胡蘿卜愈傷組織上分別接種30條、50條和100條咖啡短體線蟲,60 d后的統(tǒng)計(jì)結(jié)果表明咖啡短體線蟲能夠在胡蘿卜愈傷組織上大量繁殖,不同處理組之間存在顯著性差異(p0.05),隨著初始接種蟲量的增加,其繁殖量逐漸增大。
【學(xué)位單位】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2018
【中圖分類】：S432.45
【文章目錄】：
致謝
摘要
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 短體線蟲的分類史
    1.2 短體線蟲的種類
    1.3 短體線蟲的形態(tài)學(xué)鑒定特征
    1.4 短體線蟲的分子鑒定及系統(tǒng)學(xué)研究進(jìn)展
    1.6 短體線蟲的生物學(xué)習(xí)性
        1.6.1 短體線蟲的生活史
        1.6.2 短體線蟲的繁殖力
    1.7 短體線蟲的經(jīng)濟(jì)重要性
        1.7.1 短體線蟲的重要種類和寄主范圍
        1.7.2 短體線蟲的致病性
    1.8 短體線蟲的發(fā)生條件
    1.9 短體線蟲的防治方法
2 引言
3 材料與方法
    3.1 材料
        3.1.1 供試試劑
        3.1.2 主要試劑配制
    3.2 方法
        3.2.1 樣品的采集
        3.2.2 線蟲的分離
        3.2.3 短體線蟲的培養(yǎng)和擴(kuò)繁
            3.2.3.1 胡蘿卜愈傷組織的制備
            3.2.3.2 短體線蟲的擴(kuò)繁
        3.2.4 短體線蟲玻片的制作
        3.2.5 形態(tài)學(xué)特征數(shù)據(jù)的測(cè)量
        3.2.6 短體線蟲rDNAPCR擴(kuò)增
            3.2.6.1 單條線蟲的DNA提取
            3.2.6.2 rDNA18S、28SD2D3區(qū)、ITS序列的PCR擴(kuò)增
            3.2.6.3 短體線蟲rDNAPCR產(chǎn)物的克隆與測(cè)序
        3.2.7 序列分析及系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
        3.2.8 咖啡短體線蟲繁殖力測(cè)定
4 結(jié)果與分析
    4.1 咖啡短體線蟲（P.coffeae）的描述
        4.1.1 形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果
        4.1.2 分子序列特征分析
    4.2 斯克里布納短體線蟲（P.scribneri）的描述
        4.2.1 形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果
        4.2.2 分子序列特征分析
    4.3 落選短體線蟲（P.neglectus）的描述
        4.3.1 形態(tài)學(xué)鑒定結(jié)果
        4.3.2 分子序列特征分析
    4.4 系統(tǒng)發(fā)育樹的構(gòu)建
        4.4.1 基于rDNA18S序列的短體線蟲系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系分析
        4.4.2 基于rDNA28SD2D3區(qū)序列的短體線蟲系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系分析
        4.4.3 基于rDNAITS序列的短體線蟲系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系分析
    4.5 咖啡短體線蟲的繁殖力測(cè)定
5 結(jié)論與討論
    5.1 河南、山東、安徽三省短體線蟲種類的分類鑒定
    5.2 短體線蟲的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系
    5.3 咖啡短體線蟲繁殖力測(cè)定
參考文獻(xiàn)
ABSTRACT

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2871370