發(fā)布時間：2020-12-05 10:05

　　七星瓢蟲Coccinella septempunctata L.是一種優(yōu)良的捕食性天敵昆蟲,在生物防治中具有重要作用。該瓢蟲能以成蟲進行兼性滯育越冬或越夏,通過調控其滯育,不僅能延長產(chǎn)品貨架期,提高產(chǎn)品防控作用效果,也可促進其大規(guī)模生產(chǎn)和應用。滯育七星瓢蟲可顯著積累脂質,脂質是昆蟲滯育發(fā)育過程中的重要營養(yǎng)和能源物質,研究脂質積累對揭示滯育調控的分子機制至關重要。脂肪酸合成是脂積累的重要組成部分,脂肪酸合酶（fatty acid synthase,FAS）和�；�-CoAΔ11去飽和酶（acyl-CoA Delta（11）desaturase,FADΔ11）是七星瓢蟲脂肪酸合成的關鍵調控酶。FAS是一種多功能復合酶,其催化產(chǎn)物軟脂酸以甘油三酯的形式儲存能量,還能參與合成磷脂、細胞膜構造等;FADΔ11能催化飽和脂肪酸氧化生成不飽和脂肪酸,也可在昆蟲性信息素合成中發(fā)揮作用,但這兩種酶在滯育中的功能及其調控機制等尚不明確。本研究以七星瓢蟲為試驗對象,克隆了七星瓢蟲2個Fas基因和1個FadΔ11基因全長,分析了這三個基因在七星瓢蟲滯育發(fā)育及解除過程中的表達模式,并利用RNA干擾技術驗證了脂肪酸... 

【文章來源】：中國農(nóng)業(yè)科學院北京市

【文章頁數(shù)】：93 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

昆蟲脂肪酸合成通路及參Fig.1.1Fattyacidsynthesispa脂肪是昆蟲體內(nèi)重要的貯能和供能物質；脂不飽和酯酰輔酶Adesat

圖 2.1 七星瓢蟲滯育雌成蟲總 RNAig. 2.1 Total RNA extracted from Coccinella septempunctat果數(shù)據(jù)分析結果，分別以被注釋為脂肪酸合酶 FAcontig5526、contig7795 為模板設計 5 對特異性引14795）的序列片段 contig3704、contig2152、co釋為酰基-CoAΔ11 去飽和酶基因（gi|156549403物（引物信息見表）�？� RNA 提取后，通過 RT到目的基因中間序列，擴增結果如圖 2.2M 1 3 4 15

為模板設計 1 對特異性引物（引物信息見表）。總 RNA 提取后，通過 RT-PCR 合成 cDNA 第一條鏈，利用 PCR 方法擴增得到目的基因中間序列，擴增結果如圖 2.2圖2.2 七星瓢蟲CsFas2（A）、CsFas1（B）以及CsFadΔ11（C）基因中間序列PCR產(chǎn)物電泳圖Fig. 2.2 CsFas2（A）、CsFas1（B）and CsFadΔ11（C） intermediate sequences of Coccinella septempunctataobtained from amplication of PCR2.3.3 RACE 結果根據(jù)中間片段拼接所得序列設計了 CsFas2、CsFas1 和 CsFadΔ11 三個基因的 RACE 引物（具體信息見表）。利用 Clontech 公司的 SMARTerRACE5’/3’Kit 試劑盒擴增三個基因的 5’和 3’端，28s18s10025050075020001000M 1 3 2M2 34 1510005002000750250100MA BC

【參考文獻】：
期刊論文
[1]昆蟲脂肪酸合成通路關鍵基因的研究進展[J]. 鄭天祥,錢雨農(nóng),張大羽.  中國生物工程雜志. 2017(11)
[2]昆蟲RNAi通路及其核心元件的研究綜述[J]. 沈修婧,楊廣.  應用昆蟲學報. 2016(03)
[3]七星瓢蟲滯育關聯(lián)基因的轉錄組學分析[J]. 齊曉陽,任小云,安濤,陳紅印,黃建,張禮生.  環(huán)境昆蟲學報. 2016(02)
[4]昆蟲鐘基因研究進展[J]. 任爽,魏慧敏,郝友進,陳斌.  昆蟲學報. 2016(03)
[5]滯育七星瓢蟲抑制性消減雜交文庫的構建及分析[J]. 蔣莎,黃鳳霞,齊曉陽,任小云,陳紅印,黃建,張禮生.  中國生物防治學報. 2016(01)
[6]滯育七星瓢蟲的代謝適應與抗寒性評價[J]. 任小云,張禮生,齊曉陽,安濤,韓艷華,陳紅印.  環(huán)境昆蟲學報. 2015(06)
[7]蚊科昆蟲滯育的研究進展[J]. 吳傳劍,郝友進,陳斌.  重慶師范大學學報(自然科學版). 2015(06)
[8]昆蟲滯育研究進展[J]. 張曉燕,翟一凡,莊乾營,林清彩,吳文虎,陶玫,于毅.  山東農(nóng)業(yè)科學. 2015(02)
[9]昆蟲脂肪酸及其脫飽和酶與耐寒性的關系概述[J]. 易杰群,鄒志文,張古忍.  環(huán)境昆蟲學報. 2015(01)
[10]家蠶滯育機理研究進展[J]. 劉玫靜,童曉玲,張高軍.  蠶學通訊. 2014(04)

博士論文
[1]被孢霉Δ～9脂肪酸脫飽和酶cDNA序列的克隆與鑒定[D]. 張羽航.華南理工大學 1999

碩士論文
[1]DH對家蠶MF不滯育機理研究[D]. 何慶玲.江蘇科技大學 2015
[2]七星瓢蟲雌成蟲滯育相關蛋白差異表達的研究[D]. 劉遙.中國農(nóng)業(yè)科學院 2014
[3]多異瓢蟲滯育調控的溫光周期效應研究[D]. 吳根虎.南京農(nóng)業(yè)大學 2013
[4]家蠶BmN培養(yǎng)細胞晝夜節(jié)律生物鐘基因的表達特征[D]. 束梅影.蘇州大學 2013
[5]七星瓢蟲滯育調控的溫光周期效應及滯育后生物學研究[D]. 王偉.中國農(nóng)業(yè)科學院 2012
[6]蔥蠅LSP-2基因的克隆、表達及生物信息學分析[D]. 徐晶晶.重慶師范大學 2012
[7]二化螟越冬幼蟲耐寒性及其機理研究[D]. 張擁軍.華中農(nóng)業(yè)大學 2007



本文編號：2899282