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鯉魚iNOS全長cDNA的獲得及在感染條件下的差異表達分析

發(fā)布時間:2020-12-04 18:06
  一氧化氮是一種多功能的氣態(tài)生物信使,由多種細胞或組織產(chǎn)生,它可以降低甚至殺滅感染因子,而過量的一氧化氮又會造成機體組織損傷,加快炎癥進程,誘導型一氧化氮合成酶(i NOS)是合成一氧化氮分子的關(guān)鍵限速酶,因此掌握i NOS的作用機制從而對其調(diào)控顯得至關(guān)重要。實驗旨在獲得i NOS的全長c DNA序列,為進一步利用RT-PCR、Northernblot等方法研究i NOS蛋白在鯉魚中的調(diào)節(jié)機制奠定基礎(chǔ),并利用熒光定量技術(shù)檢測i NOS在體內(nèi)體外受到外來刺激后的表達變化情況,以及其表達是否有組織特異性。實驗目的:獲得鯉魚誘導型一氧化氮合成酶c DNA全長序列,并通過體內(nèi)體外實驗探究i NOS在刺激因子刺激下的表達變化及其組織特異性表達規(guī)律;實驗方法:以鯉魚外周血白細胞c DNA文庫中獲得的i NOS的EST序列為基礎(chǔ),采用文庫篩選和c DNA 5’末端快速擴增技術(shù)(5’-RACE)相結(jié)合的方法,獲得鯉i NOS c DNA全長序列,體外實驗用脂多糖(LPS,1.0μg/m L)刺激原代培養(yǎng)的外周血白細胞4 h、12 h,刀豆蛋白A(Con A,1.0μg/m L)刺激4 h、24 h,提取... 

【文章來源】:吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】:69 頁

【學位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻綜述
    第一章 魚類先天性免疫研究進展
        1 魚類先天性免疫概述
        2 魚類先天性免疫器官
        3 魚類先天性免疫細胞
        4 先天性免疫分子
    第二章 誘導型一氧化氮合成酶研究進展
        1 iNOS的結(jié)構(gòu)和功能
        2 iNOS的表達及表達調(diào)控機制
        3 iNOS與炎癥疾病的關(guān)系
第二篇 研究內(nèi)容
    第一章 鯉魚iNOS全長cDNA的獲得及鑒定分析
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        4 小結(jié)
    第二章 絲裂原刺激前后iNOS在白細胞中的差異表達分析
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        4 小結(jié)
    第三章 鞭毛蛋白誘導iNOS在頭腎組織中的表達
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
        4 小結(jié)
    第四章 嗜水氣單胞菌感染鯉魚后iNOS在不同組織中的表達
        1 材料與方法
        2 結(jié)果
        3 討論
結(jié)論
參考文獻
導師簡介
作者簡介
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]誘導型一氧化氮合成酶及其相關(guān)分子的研究進展[J]. 林海珊,歐敏.  現(xiàn)代醫(yī)學. 2015(05)
[2]鼠傷寒沙門氏菌鞭毛蛋白提取及多抗制備[J]. 顏成英,湯曉艷,王敏,康大成,李朋穎,龔艷.  食品工業(yè)科技. 2014(22)
[3]誘導型一氧化氮合酶抑制劑的研究進展[J]. 張浩,昝金行,劉培勛.  中國新藥雜志. 2013(06)
[4]魚類非特異性免疫研究進展[J]. 李莉,李春梅.  河南農(nóng)業(yè)科學. 2012(02)
[5]魚類免疫系統(tǒng)的研究進展[J]. 王俊相,李玉萍,孔令富,李蓮軍.  四川畜牧獸醫(yī). 2010(07)
[6]鴨沙門氏菌鞭毛抗原的提取與抗原性鑒定初報[J]. 徐耀輝,喬宏興,臧金燦,李翠平,盧建洲.  中國農(nóng)學通報. 2007(09)
[7]水生動物10種非特異性免疫分子的研究進展[J]. 龍華.  長江大學學報(自科版). 2005(11)
[8]鯉魚外周血白細胞的分離和體外培養(yǎng)[J]. 豐培金,盧強,李蓮瑞,張俊輝.  中國獸醫(yī)學報. 2004(04)
[9]魚類主要組織相容性復合體研究現(xiàn)狀與展望[J]. 軒興榮,蔡完其.  上海水產(chǎn)大學學報. 2001(04)

碩士論文
[1]鯉魚TLR5基因克隆、鑒定及對嗜水氣單胞菌感染的應答[D]. 孫真.吉林大學 2014



本文編號:2898023

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