白斑綜合癥病毒(WSSV)進(jìn)入造血組織細(xì)胞的途徑,紅螯螯蝦網(wǎng)格蛋白輕鏈的克隆及制備抗體的檢測
發(fā)布時間:2020-12-04 21:30
對蝦白斑綜合癥病毒(White spot syndrome virus,WSSV)屬線形病毒科(Nimaviridae)白斑病毒屬(Whispovirus),是一種環(huán)狀雙鏈DNA病毒,能感染對蝦、螯蝦等各種蝦類。該病毒宿主范圍廣,傳染力強(qiáng),致死率高,是養(yǎng)殖蝦類的主要病原,但目前該病毒的對宿主細(xì)胞的侵染機(jī)制仍不清楚。本文通過不同的內(nèi)吞抑制劑及內(nèi)吞標(biāo)志物,對WSSV進(jìn)入造血組織細(xì)胞的途徑進(jìn)行了分析。此外,對紅螯螯蝦(Cherax quadricarinatus)造血組織細(xì)胞的網(wǎng)格蛋白輕鏈c DNA進(jìn)行克隆,并制備得到了特異性的抗體。本研究有助于進(jìn)一步對WSSV的感染機(jī)制進(jìn)行深入地研究,并對蝦養(yǎng)殖業(yè)中WSSV病害的防治提供了有益的借鑒和科學(xué)的依據(jù)。(1)借助相關(guān)的內(nèi)吞途徑抑制劑及內(nèi)吞標(biāo)志物,研究WSSV進(jìn)入造血組織細(xì)胞的相關(guān)內(nèi)吞途徑。結(jié)果表明,網(wǎng)格蛋白抑制劑Chlorpromazine(CPZ)能有效地抑制WSSV侵染,并且與轉(zhuǎn)鐵蛋白及網(wǎng)格蛋白共定位,說明WSSV是通過網(wǎng)格蛋白介導(dǎo)的內(nèi)吞途徑進(jìn)入造血組織細(xì)胞。此外,在內(nèi)吞的過程中,需要dynamin和細(xì)胞膜上膽固醇的參與,并且需要經(jīng)過酸化。(...
【文章來源】:自然資源部第三海洋研究所福建省
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
WSSV生活周期示意圖
8圖 1-4:WSSV 感染原代培養(yǎng)的紅螯螯蝦的造血組織細(xì)胞及血細(xì)胞的情況[6D.未感染病毒的血細(xì)胞和造血組織細(xì)胞;B、E.感染病毒 2h 后的血細(xì)胞和造血組織細(xì)胞;C、F.毒 24 h 后的血細(xì)胞和造血組織細(xì)胞。
前言而在體外實驗中,WSSV 均能感染克氏原螯蝦和紅螯螯蝦(Cheraxquadricarinatus)的血細(xì)胞及造血組織細(xì)胞,并且在感染病毒后的兩種細(xì)胞中,均能檢測到 WSSV 基因組的轉(zhuǎn)錄,但僅能在造血組織細(xì)胞的細(xì)胞核觀察到增殖出的子代病毒。而進(jìn)一步的實驗表明,WSSV 的主要結(jié)構(gòu)蛋白 VP26、VP28 和VP51 無法在感染后的血細(xì)胞中表達(dá),僅能在感染后的造血組織細(xì)胞中表達(dá)[60]。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]白斑綜合癥病毒(WSSV)感染對蝦的途徑及滴度研究[J]. 戴俊逸,李文婷,楊豐. 應(yīng)用海洋學(xué)學(xué)報. 2013(01)
[2]對蝦白斑綜合征病毒胸腺嘧啶核苷酸合成酶基因的系統(tǒng)進(jìn)化分析[J]. 李嵚,楊豐,張景海,陳英杰. 沈陽藥科大學(xué)學(xué)報. 2004(02)
[3]對蝦白斑綜合征桿狀病毒體內(nèi)增殖模型的建立[J]. 黃燦華,石正麗,張建紅,張立人,陳棣華,J.R.Bonami. 中國病毒學(xué). 1999(04)
[4]用對蝦的致病病毒人工感染克氏原螯蝦[J]. 魏靜,陸承平,楊叢海. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 1998(04)
[5]用聚合酶鏈反應(yīng)和酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測無包埋體對蝦病毒[J]. 朱山,郭福生,涂小林,陸承平,吳時友. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 1998(02)
本文編號:2898267
【文章來源】:自然資源部第三海洋研究所福建省
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
WSSV生活周期示意圖
8圖 1-4:WSSV 感染原代培養(yǎng)的紅螯螯蝦的造血組織細(xì)胞及血細(xì)胞的情況[6D.未感染病毒的血細(xì)胞和造血組織細(xì)胞;B、E.感染病毒 2h 后的血細(xì)胞和造血組織細(xì)胞;C、F.毒 24 h 后的血細(xì)胞和造血組織細(xì)胞。
前言而在體外實驗中,WSSV 均能感染克氏原螯蝦和紅螯螯蝦(Cheraxquadricarinatus)的血細(xì)胞及造血組織細(xì)胞,并且在感染病毒后的兩種細(xì)胞中,均能檢測到 WSSV 基因組的轉(zhuǎn)錄,但僅能在造血組織細(xì)胞的細(xì)胞核觀察到增殖出的子代病毒。而進(jìn)一步的實驗表明,WSSV 的主要結(jié)構(gòu)蛋白 VP26、VP28 和VP51 無法在感染后的血細(xì)胞中表達(dá),僅能在感染后的造血組織細(xì)胞中表達(dá)[60]。
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]白斑綜合癥病毒(WSSV)感染對蝦的途徑及滴度研究[J]. 戴俊逸,李文婷,楊豐. 應(yīng)用海洋學(xué)學(xué)報. 2013(01)
[2]對蝦白斑綜合征病毒胸腺嘧啶核苷酸合成酶基因的系統(tǒng)進(jìn)化分析[J]. 李嵚,楊豐,張景海,陳英杰. 沈陽藥科大學(xué)學(xué)報. 2004(02)
[3]對蝦白斑綜合征桿狀病毒體內(nèi)增殖模型的建立[J]. 黃燦華,石正麗,張建紅,張立人,陳棣華,J.R.Bonami. 中國病毒學(xué). 1999(04)
[4]用對蝦的致病病毒人工感染克氏原螯蝦[J]. 魏靜,陸承平,楊叢海. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 1998(04)
[5]用聚合酶鏈反應(yīng)和酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測無包埋體對蝦病毒[J]. 朱山,郭福生,涂小林,陸承平,吳時友. 南京農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報. 1998(02)
本文編號:2898267
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