青蛤(Cyclina sinensis)Kazal型絲氨酸蛋白酶抑制劑基因的表達與其重組蛋白活性分析
發(fā)布時間:2024-11-03 10:32
青蛤是我國重要的海產(chǎn)經(jīng)濟動物,鑒于其具有較高的營養(yǎng)價值和鮮美的口味,因此青蛤的增養(yǎng)殖在水產(chǎn)行業(yè)中具有重要的地位。但是,近年來由于國內(nèi)沿海地區(qū)采取高密度、高投餌和高產(chǎn)出的養(yǎng)殖方式,使青蛤的種質(zhì)嚴重衰退、抗病力逐步下降,加之養(yǎng)殖區(qū)域水質(zhì)污染嚴重,連年出現(xiàn)了養(yǎng)殖青蛤的病害和大規(guī)模死亡現(xiàn)象。本研究通過對青蛤免疫相關(guān)因子絲氨酸蛋白酶抑制劑的表達研究,從分子水平上初步揭示其免疫作用機制及信號轉(zhuǎn)導(dǎo)方式,為探索青蛤的免疫抗病機制、建立青蛤的健康養(yǎng)殖途徑提供了有價值的理論基礎(chǔ)和實驗數(shù)據(jù)。文章首先介紹了青蛤的經(jīng)濟價值和相關(guān)研究背景,闡述了我國當(dāng)前貝類養(yǎng)殖業(yè)中普遍存在的問題及其原因。重點說明了病原微生物—鰻弧菌對青蛤養(yǎng)殖的危害,并且分析了鰻弧菌的致病機理和防治方法。該部分還介紹了絲氨酸蛋白酶抑制劑基因的結(jié)構(gòu)及其在貝類免疫調(diào)節(jié)中的重要作用。研究者通過SMART高通量測序的方法構(gòu)建了青蛤的cDNA文庫,使用生物信息學(xué)分析方法,得到了青蛤絲氨酸蛋白酶抑制劑(SPI)基因序列的全長。結(jié)果顯示,青蛤SPI基因全長587bp,開放閱讀框為456bp,編碼151個氨基酸,其蛋白質(zhì)理論分子量為16.850KD,理論等電點pI...
【文章頁數(shù)】:81 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
本文編號:4011129
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【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
將預(yù)測的青蛤氦基酸序列(Cs)與菲律賓蛤仔故p/?arwm)、2種??中帶蛤?qū)匍L牡蝴(Croymyfrea?g/gos1)的?Kazal?家族絲氨酸??蛋白酶抑制劑氨基酸序列進行同源性分析比對(圖2.2),結(jié)果發(fā)現(xiàn)Kazal家族的基??因序列中富含半胱氨酸。由于動物體內(nèi)半胱氨酸具....
2.3.4青蛤Kazal-SPI氨基酸系統(tǒng)學(xué)分析??將青蛤的Kazal型SPI基因與其他13個物種(見表2.1)的相關(guān)氨基酸序列??進行比對,利用鄰接法構(gòu)建了分子系統(tǒng)樹(圖2.5),采用bootstrap?1000個循環(huán)檢??驗拓撲結(jié)構(gòu)的置信度。結(jié)果表明,青蛤Kazal型SPI與....
圖3.1青蛤總RNA電泳1?The?electrophoretogram?of?total?一鏈的合成??NA經(jīng)反轉(zhuǎn)后的cDNA模板進物為一條345bp左右的條帶,
血?閉殼肌?肝臟?外套膜?腮??組織名稱??圖3.3?SPI基因在青蛤不同組織中的表達情況??28??
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